• Santé - Fragment, ADN, Souris

Clonage dans un vecteur

bonjour. je voudrais savoir comment peut-on augmenter l'efficacité du clonage des fragment d'ADN d souris dans les vecteurs.  [...] On pourrait presque dire que chaque clonage est différent. il y a pas mal de paramètres à prendre en compte. taille de l'insert, taille du plasmide, technique de transfo, conditions de ligation (ratio insert/vecteur, température, durée, Unités de ligase, bouts francs, cohésifs), etc. etc.etc.   [...]

[Génétique] Ogm

Non ca c'est de la science fiction... tu prends un fragment d'adn et tu le mets dans le lapin, l'homme, la souris, la baleine, l'elephant, la grenouille, la bacterie, la levure, un champignon etc... et ca te donnera TOUJOURS la meme protéine. et en plus il n'y a rien de magique la dedans on sait tres exactement pourquoi c'est le cas.  [...] Et les etudes serieuses menées sur la question on démontré qu'il n'y avait aucune difference entre les souris nourrie aux OGM de celles nourrie sans OGM.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Oui et non. La séquence nucléotidique est un fragment d'ADN, mais dont normalement on connait justement la séquence, on sait donc ce que c'est.  [...] Pour être plus précis, on peut dire qu'un fragment d'ADN est une séquence nucléotidique mais une séquence nucléotidique peut également être un fragment d'ARN. Donc ce n'est pas une équivalence stricte.  [...]

transgenese

Le vecteur est une molécule d'ADN auto-réplicable dans laquelle on insère, on clone, un fragment d'ADN provenant d'une autre source (bactérie, virus, eucaryotes,……etc.).  [...] De l'ADN plasmidique est injecté dans le tissus cible (par exemple le muscle de la patte d'une souris) puis on applique deux plaques d'acier contre la patte qui servent ainsi d'électrode, on envoie ensuite des impulsions électriques répétées, en essayant de trouver les fréquences et intensité correspondant au meilleur transfert.  [...]

Notion de gène

Bien sur que ca existe et ca représente une grande partie de notre génome. Chez l'Homme, on compte environ 30.000 gènes seulement ce qui n'est pas grand chose comparé à la taille de notre génome. Parmi les séquences non codantes, on trouve entre autre les séquences régulatrices de l'expression d'autres gènes (par exemple).   [...] c'est là qu'est l'ambiguité pour moi... tu parles d'un fragment d'ADN...alors que moi je dirais que le gène n'est pas le fragment d'ADN mais une information contenue dessus ( car un seul fragment d'ADN semble pouvoir contenir plusieur genes).  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

juste un petit hic tu me dis que le fragment de Kleenow est une enzyme amputée de sa fonction exonucléase 3'5' et pourtant dans mon cours il est explicitement écrit. Le fragment de Kleenow est une sous-unité de l' ADN polymérase I. Il a une activité polymérase 5'3' et une activité exonucléase 3'5' Ce il ne peut correspondre qu'au fragment de Kleenow car si ça avait visé l' ADN polymérase I cela aurait été elle.  [...] Pour l'instant il me semble avoir compris (à chaque fois des questions réaparaissent.) surtout dans le cas du brin discontinue parce qu'en fait tu me dis que l' ADN pol. arrive au bout de son segment  [...] segments n'a pas lieu d'être car tout est accolé il n'y a pas de passage à un autre segment, n'est-ce pas Par ailleurs j'ai un doute sur la compréhension du texte du cours que j'ai mis dans mon premier message, l'enzyme de la première phrase c'est bien le fragment de Kleenow de la 3ème phrase Et on est bien d'accord que ce fragment agit à la fois sur le segment après réplication par son action exonucléase 5'3' de réparation et sur lesegment d'après par son activité à la fois polymérase 5'3' (synthétisation) et exonucléase 3'5' (réparation).  [...]

[Biochimie] Mécanisme de réplication de l'ADN

apres que adn polymerase 1 transforme arn amorce en adn quel est le role de adn poly 3 ici elle a deja fait lelongation puisque on est a la terminaison de quel fragment il parle.  [...] ces amorces sont ensuite detruit et remplacees par de l'adn puisque la synthese du fragment suivant a amene e 3'OH apparie necessaire. Voila un petit resume,j'esper qu'il va t'aider un peu.  [...]

plasmide-clonage

Ton gène ou fragment d'ADN que tu désires cloner est inséré dans le plasmide grace à un polylinker qui coupe le gène de la bétagalactosidase (bgz).  [...] Le principe est bon, sauf que le gene de la Bgal etant tres grand (3Kb) on utilise plutot le phenomene d'alpha complementation pour faire cette selection blanc/bleu.   [...]

[Génétique] ADN polymérase

ma question est surement très bête mais j'arrive vraiment pas à comprendre. dans un QCM on me demande quelle ADN polymérase est indispensable à la réplication de l'ADN, je pensais (très sure de moi) que c'était l'ADN pol 3, mais non... la réponse est ADN pol 1 Pourtant c'est bien la 3 qui sert pour l'élongation de l'ADN du brin avancé et qui permet la formation des fragment d'Okazaki non.  [...] Moi j'aurai dit que les 3 sont indispensables car chacune à un rôle précis, c'est vrai que l'ANN Pol 3 sert pour l'élongation de l'ADN du brin avancé et qui permet la formation des fragments d'Okazaki, mais l'ADN Pol 1 a aussi un rôle car la synthèse discontinue aboutit à une césure (lacune) entre l'extrémité 3' d'un fragment d'Okazaki et l'extrémité 5' de l'amorce d'ARN du fragment d'Okazaki suivant.  [...]

[Divers] clonage et maths

Maintenant en théorie on peut en décrire les étapes. On retrouvera un peu de math au moment où l'on veut savoir combien on met d'ADN dans combien de vecteur (c'est un rapport mol/mol alors que jusque là en principe on a tout évalué en µg).  [...] Une chose intéressante peut survenir pour vous au moment où l'on fait migrer nos fragments pour diverses vérifications. On les fait migrer dans un gel d'agarose en principe et la migration se fait non pas en fonction de la taille des fragments mais du log de la taille des fragments.  [...]