• Santé - Extrait, ADN, Plantes

[Biotechnologie] Electrophorèse capillaire

J'ai extrait l'ADN de plusieurs plantes et effectué une PCR RAPD sur ces ADN. Ensuite j'ai réalisé une électrophorèse capillaire. Arrivé à cette étape, je ne comprends pas comment les molécules d'ADN sont séparées vu qu'elles sont toutes chargées négativement.  [...] En fait, selon si elles sont plus ou moins grande, elles sont plus ou moins freinées par le maillage de ton gel d'électrophorèse, du coup elles ne vont pas a la même vitesse vers la cathode et elles se séparent.   [...]

[Biotechnologie] An efficient TALEN mutagenesis system in rice

L'ADN chromosomique (hors plasmides, etc.) provenants des individus/plants résistants à l'hygromycine est extrait avec une méthode/kit rapide spécifique pour plantes (ex. Tiangen TM concernant l'équipe qui publie). La même méthode de digestion par PCR / enzymes de restriction que pour les chloroplastes est appliquée pour scanner les lignées transgéniques (Fig.  [...] En gros la méthode de transformation par transfect bactérien chez les plantes est relativement plus efficace/rapide que d'autres méthodes. Utilisé sur des cellules végétales embryonnaires, le taux de mutation constaté dépasse les 30%.  [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

d'exemplaires un fragment d'ADN particulier (la séquence d'intérêt, ADN d'intérêt ou ADN cible) à partir d'un extrait d'ADN (ADN matriciel). En.  [...] La PCR est donc une technique de purification ou de clonage. L'ADN extrait à partir d'un organisme ou d'un échantillon contenant des ADN d'origines.  [...]

Problème de PCRs

Peut être certaine personne ont rencontré le même problème que moi et pourront m'aider. Je travaille sur de l'ADN environnemental extrait avec le kit DNA plant mini kit de Qiagen. Sur cet ADN je voudrais amplifider le 16s/18s et ITS. Pour le 16s j'ai utilisé les amorces 16s8f (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3') et 16s1541r (5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA*-3') et pour ITS.  [...] Il pourrait s'agir d'inhibiteur autres (pipette, paillasse), je ne sais pas trop. AU départ je soupconnais la Taq de n'être pas aassez robuste donc maintenant je prends la taq platinum de invitrogen mais j'ai toujours ces problèmes. La première PCR semble marcher mais les autres ensuite ne marche plus.   [...]

de la tache de sang au profil génétique

j'aimerais savoir si quelqu'un peut m'aider à comprendre comment on extrait l'ADN d'une cellule et comment on le purifie pour ensuite utiliser la méthode PCR afin de dresser un profil génétique et identifier un criminel.  [...] Merci beaucoup pour vos réponses, ms je ne comprends pas très bien encore...à vrai dire il s'agit de mon sujet de TPE. Donc lorsqu'on explose la membrane cellulaire, le trizol permet-il de purifier ou d'extraire l'ADN Et qu'est-ce que le trizol exactement Je sais qu'une fois que l'ADN est purifé et extrait, on regarde sur les parties non codantes de l'ADN, les microsatellites.  [...]

Technique : RFLP

Après avoir extrait l'ADN de ces champignons, on va faire une RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) sur l'ADN extrait.  [...] tu as dis précédemment que l'adn était coupé en point x (car site de restriction) et cela donnait des fragments. Soit, mets tu dis que s'il y a absence de ce site alors il y a migration de fragments plus courts ce ne serait pas le contraire par hasard, car si présence de site de restriction alors ca coupe donc longueur moindre que s'il n'y avait pas de site.  [...]

Conservation d'échantillons biologiques à t° ambiante

Au pire transporte tes échantillons dans un sachet étanche recouvert de glace, ce sera toujours mieux que la température ambiante. Comme l'a dit Gorben si c'estpour en extraire de l'ADN ca ne devrait pas poser de soucis, ca ne serait pas le même problème si tu voulais en extraire de l'ARN.  [...] L'ideal serait de t'assurer que l'ADN de tes échantillons soit extrait avant leur envoi, il est courant d'envoyer de l'ADN non réfrigéré pour séquencage et celui-ci résiste très bien pendant le transport.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription in vitro de sondes ARN marquées

J'ai extrait des ARN à partir du tissu cible, fait une RT puis une PCR avec des primers couplés à des promoteurs T3 ou T7. J'ai fait migrer les produits, extrait l'ADN sur gel, et fait une deuxième PCR sur cet ADN.  [...] Jusque là tout va bien, à part peut-être de légères bandes trop hautes sur ma deuxième PCR. Ce qui est assez étrange vu que j'ai extrait l'ADN sur gel (j'ai isolé ma bande d'intérêt), et qu'elles n'apparaissaient même pas sur la première PCR avec des cDNA totaux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Après avoir extrait l'ADN, tu peux faire un gel d'agarose pour estimer la quantité de ton extrait ou bien le doser au spectro à 260 nm.  [...] Si vous voulez vous assurer de vos échantillons le plus simple (puisque tout a été changé) est de refaire une extraction d'ADN bien propre et de voir si là ca fonctionne ou pas.  [...]

[Identification] Extraction d'ADN

NaCl et le détergent ont plutôt un rôle dans les phases d'extraction de l'ADN mais ça m'étonnerait que l'exercice te demande de donner leurs rôles.  [...] Puis, j'avais pensé aussi à la paroi de la cellule végétale. il devrait y avoir plasmolyse (la paroi éclate et donc les molécules, dont l'ADN sont libérées en-dehors de la cellule).  [...]