• Santé - Extraction, Solution, Eau

mettre en evidence l'adn?

j'ai de vagues souvenirs de premiere S d'un tp ou on avait mis en evidence l'adn dans un oignon. en fait on le pelait puis on lui faisait subir pas mal de mauvais traitements (four micro-onde, vinaigre il me semble...) et a la fin on avait une solution dans laquelle on percevait à l'oeil des amas de brins d'adn emmelés, par le trouble que produit leur anisotropie.  [...] Rq. la solution d'extraction. 60 ml d'eau distillée, 14 g de NaCL (2 c. à café) et 2 gtte de vinaigre d'alcool. Garder au frais.  [...]

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

De l'ADN a été extrait à partir de pulpe de tomate et ensuite stocké au congélateur.Je pars donc ensuite de cette extraction (2microlitres) que j'ajoute à 48 microlitres d'une solution contenant de l'eau, un tampon, des bases nucléotidiques, les primers REVERSES et FORWARD ainsi que la TAQ polymérase.Ensuite on lance la PCR pour 40 cycles.  [...] Peut etre que tu n'a tout simplement rien amplifié et que c'est l'ADN génomique n'est pas sorti du puit... Essaye d'autres primers sur ta solution d'ADN pour voir si autre chose peu etre amplifié et ainsi migrer correctement dans ton gel.  [...]

[Biochimie] Extraction enzymes

Pour réaliser l'extraction des enzymes de l'orge, j'ai procédé à un broyage de grains d'orge avec de l'eau distillée puis à une filtration et enfin une centrifugation pour récuperer les enzymes.  [...] Cependant, si ton enzyme est robuste, il n'est pas étonnant qu'une extraction à l'eau t'es permis de mesurer tout de même une activité.  [...]

[Biochimie] Extration agar agar et carraghénanes

S'il vous plais, pouvez vous m'aider à trouve la technique (bien détaillée) de l'extraction de l'agar agar et des carraghénanes à partir des algues marines.  [...] Pour extraire les carraghénanes on utilise deux méthodes, une extraction à l'eau et une extraction à en milieu fortement alcalin.  [...]

[Biologie Moléculaire] osmose hématies et leucocytes

Dans le but de faire une extraction d'ADN à partir de sang, j'ai recherché des protocoles m'indiquant qu'il fallait faire éclater les hématies par choc osmotique...J'imagine donc qu'il faut ajouter une solution mois concentré (comme de l'eau distillée je pense) mais comment faire pour que seul les hématies éclatent et non pas les leucocytes.  [...] Je ne vais pas travailler avec du sang humain mais le résultat serait le même. Effectivement les hématies n'ont pas ne noyau donc peut d'ADN c'est pour cela que je veux les faire éclater. Je vais donc garder les leucocytes intacts pour les récupérer après centrifugation ce qui me permettras une fois les leucocytes récupérés de faire une extraction efficace.  [...]

Précipitation protéines au sulfate d'ammonium

- Mes solutions stocks de sulfate de protamine et de sulfate d'ammonium doivent elles être préparées dans de l'eau ou dans mon tampon d'extraction (important, il contient 20% de glycérol qui doit largement modifié la solubilité des deux sels précédents) J'ai tenté de préparé le sulfate de protamine dans le tampon et j'ai de gros problèmes de solubilité.  [...] Effectivement, à ta place, je diluerai les solutions stocks dans de l'eau. Il suffit juste que tu adaptes leur concentration pour qu'in fine tu obtiens la bonne concentration finale dans ton tampon d'extraction.  [...]

peser la matière en suspension sur un filtre ?

Le problème c'est qu'après filtration, mon filtre n'est pas tout à fait sec, je devrais donc le passer à l'étuve à 100°C pour retirer toute trace d'eau mais lors de cette étape, les composés volatiles vont alors s'évaporer et je vais perdre une partie des molécules potentiellement intéressantes pour mes analyses ultérieurs.  [...] pour info, l'eau filtrée va subir une extraction SPE et les MES un extraction ASE.  [...]

[Biologie Moléculaire] Causes d'échecs de la production de protéines recombinantes

Là encore diminuer l'induction peut aider. Changer d'hôte peut être une solution. Il existe aussi des produits commerciaux qui aident à obtenir un rempliement correct après extraction.  [...] Changer d'hôte peut être une solution. Il existe aussi des produits commerciaux qui aident à obtenir un rempliement correct après extraction. Pourrais-tu me donner plus d'information sur ces products Car je fait face au même pronlème.  [...]

[Biologie Moléculaire] Révélation des extraits d'ADN

Après être passée par l'étape de la préparation des solutions pour mon extraction (réussie grâce aux membres du forum), je me suis jetée à l'eau pour faire ma première extraction. j'ai eu au final de minuscules petits dépôts au fond de mes eppendorfs, on m'a assuré que c'était de l'ADN.  [...] par contre la seconde série de puits correspondait à des ADN extraits à l'ancienne avec toute l'armada de solutions que j'avais eu tant de mal à préparer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Etapes de mise au point qPCR - gène peu exprimé

J'ai passé en qPCR tous mes couples d'amorces parallèlement à mes 2 gènes housekeeping préférés, sur des ADNc de cellules qui surexpriment mon gène en faisant des gamme de dilution de mes ADNc de 10-1 à 10-5. Grosse déception, seuls 2 couples sur les 6 designés ont eu une courbe de fusion acceptable, et une efficacité correcte.   [...] Concernant l'extraction d'ARN, je ne pense pas qu'il y ait de souci puisque j'ai fait migrer mes ARN dans une puce de bioanalyzer Agilent 2100 et ils sont nickels. J'ai utilisé de l'eau RNase free.  [...]