• Santé - Extraction, Quantité, Kits

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

Bonsoir, en biologie moléculaire nous avons étudié l'extraction de l'ADN, l'ARN et des plasmides. Bon l'ADN c'est facile mais l'ARN et les plasmides ça n'est pas très claire, j'ai fait des recherches sur le net mais ça ne m'a pas vraiment aidé,si il y en a parmi vous qui aimerait bien m'expliquer comment se font ces 2 extractions, je leur en serais très TRES reconnaissante.  [...] Les deux techniques les plus employées en laboratoire pour extraire de l'ADN plasmidique (je ne sais pas s'il y en a d'autres) sont. l'extraction au phénol-chloroforme et l'extraction à l'aide de kits industriels, type OMEGA, Sigma-Aldrich...etc. La première permet de récupérer une plus grosse quantité d'ADN plasmidique que la seconde, mais est plus délicate à réaliser.  [...]

[Biologie Cellulaire] Problème quantité d'adn plasmidique après extraction

Je viens vous trouver car j'ai un petit doute quand à une extraction d'adn plasmidique. Habituellement j'utilise des kit qiagen (miniprep) et j'obtiens environ 100ng/µl de plasmide.  [...] Merci pour vos renseignements. J'ai refait une extraction en utilisant des RNases et je me retrouve avec une quantité egale à celle obtenue avec les kits.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN

Ca coute un peu cher mais les kits d'extraction spécialement concus pour petite quantité d'arn sont la meilleure solution dans ton cas à mon avis.  [...] Avant j'extrayais l'ARN sur tisssus et pour lyser, j'utilisais le phénol -choroforme, quand je suis repassé sur cellules, j'ai testé le phénol-choroforme/kit RNeasy vs kit RNeasy, j'avais + en quantité et l'arn de meilleure qualité, du coup je suis resté avec ce protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

Je sais que Qiagen offre de bons kits permettant l'extraction d'ADN génomique végétal et d'autres kits permettant l'extraction d'ARN.  [...] En faisant une extraction classique au phénol / chloroforme, on récupère tous les acides nucléiques. Maintenant il y a peut être des étapes spécifiques pour détruire les cellules végétales. Sans trop chahuter les ARN. De plus c'est (très) long et non reproductible.  [...]

Détection bactériennes

Si c'est bien ça, je ne crois pas que ça existe. Même passer par une étape de culture n'est pas la solution. ça ne vous permet pas de détecter les bactéries v iables n on c ultivables (VNC). La solution que je vois c'est de passer par l'ARN 16S.   [...] Là je me penche sur l'activité des enzymes de restriction issue de 10 bactéries, une activité enzymatique peu trahir leur présence et la PCR est un moyen d'amplifier le signal.   [...]

[Biologie Moléculaire] pb dosage ARNtotal spectro

Pensez-vous aussi que je doive utiliser un autre kit pour mes extractions (oui parce que je dois faire suite au stagiaire de l'année dernière, donc utiliser ce kit...mais il est fait pour cellules et tissus de mammifère, or je travaille sur les champignons...celà me laisse perplexe).  [...] Nous sommes pas mal à avoir des manips qui foirent au labo (juste une salle est dédiée à la biomol, dans laquelle on manip des microorganismes, on fait des extractions ADN, ARN, des PCR, des gels...).  [...]

[Biologie Moléculaire] un protocole fiable pou extraire l'ADN

je fais des extraction d'ADN à partir de sang humain atteint par le VIH,j'ai pas réussi a avoir un protocole convenable surtout pour la lyse des globules blancs.j'aimerais bien avoir une technique convenable et surtout fiable parce que mes ADN sont fragmentés et de mauvaise qualité(avec le détail des quantités de chaque réactif dans chaque solution ou bien simplement avoir la gentillesse de m'envoyer des sites ou des liens qui peuvent m'aider)merci infiniment.  [...] Tu ne fais pas d'extraction par kit J'utilisais ChargeSwitch® gDNA Blood Kits de chez Invitrogen et ça marche très bien.  [...]

[Génétique] kit qiagen

Ceci dit, à peu de choses près, on sait tous ce qu'il y a dans les solutions des kits surtout pour une technique aussi simple que l'extraction de plasmides. Dans les tampons de lyse tu as du SDS et de la soude (pH 12-13), dans la seconde solution de neutralisation tu as un agent acide, les solutions de lavages sont à bases d'alcool, le TE est du Tris-EDTA et la colonne contient une résile en silice.  [...] J'utilise le même type de kit mais chez Sigma et ils sont aussi avares en infos... Mais en fait à mon avis c'est simple. regardes les protocoles dits classiques d'extraction de plasmides et il n'y a pas de mystères les kits sont fait avec les mêmes produits.  [...]

[Biologie Cellulaire] Méthodes d'étude en histologie

effectivement, selon les pièces entre la fixation, la déshydratation, l'inclusion, la coupe, et les colorations ultérieures, plusieurs heures. Donc non. Pour cela on peut utiliser des coupes au cryostat (en quelques minutes, on obtient une coupe).   [...] une empreinte, effectivement ça semble compromis. Des techniques enzymatiques, je n'en ai pas l'expérience, mais je pense que ce n'est pas impossible. En ce qui concerne les colorations lipidiques (type Oil Red O ou Sudan), le problème n'est pas la fixation mais le déparaffinage qui dissous les lipides. Pour cela on fera des coupes congelées.   [...]

Extraction d'ADN

Renseigne toi sur le site de Qiagen a savoir s'ils ont un kit micro. Si tu es limité sur la quantité d'échantillon, il vaut mieux opter pour le kit d'extraction le plus petit possible (donc kit mini si le kit micro n'existe pas).  [...] Pour les kits Qiagen (que j'utilise aussi), je ne suis pas sûre que ce soit approprié pour l'extraction à partir de poils ou fécès.  [...]