• Santé - Extraction, Précipitation, Acides

[Biologie Moléculaire] Biotinylation et colonnes

Pensez-vous qu'il est possible de simplifier ces étapes de purification Par exemple faire directement un gel à la sortie de la PCR (ma bande est à 800bp).   [...] Pensez-vous que le fait que mes amplicons soient biotinylés empêche l'utilisation de kits de purification d'ADN (par exemple le NucleoSpin Extract II).  [...]

[Microbiologie] Test de Lancefield

Voilà j'ai un petit trou et j'ai perdu mes cours à ce sujet. Je ne me rappelle plus comment on réalise le test de Lancefield pour le sérogroupage des streptocoques.   [...] =. par la technique de Lancefield qui comprend une extraction du polyoside C à partir d'une suspension de la souche par l'acide chlorhydrique à chaud ou par l'acide nitreux ou par le formamide ou encore par la pronase suivie d'une réaction de précipitation en tube en présence des antisérums spécifiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Solution Q du kit Qiagen

A tout hasard est ce que tu utilises le Kit Rneasy Mini pour l'extraction de l'ARN, pourrais tu m'expliquer quel est le principe Merci d'avance.  [...] effectivement Marie_Eve a raison. il ne faut pas oublier la précipitation des acides nucléiques avec de l'alcool (à 70 % je crois). Mea Culpa.  [...]

[Biochimie] TPE sur l'ADN

*l'extraction classique par phénol/chloroforme et précipitation de l'ADN (par EtOH).  [...] La technique est légèrement différente des précédentes avec l'emploi notemment de DTT pour séparer correctement les deux fractions.   [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification infructueuse

Idée un peu simple pour tester l'extraction. hydrolyse complète, puis voir au chlorure d'argent si on aurait une précipitation Ag 3 PO 4.  [...] Les petits polyphénols peuvent peut-être dénaturer les enzymes (). Mais en principe ils devraient rester dans la phase organique de l'extraction... Pour les polysaccharides, certains peuvent peut-être agir comme inhibiteurs compétifis (). Cependant en concentrant l'ADN par précipitation, j'imagine qu'on élimine pas mal de ces polymères osidiques avec l'éluant.  [...]

[Biologie Moléculaire] Précaution pour etude méthylation ADN

je vais devoir faire une étude de la méthylation d'une region, surement par traitement bisulfite et sequencage et j'aurais aimé savoir s'il y avait des précautions à prendre pour la préparation des ADN.   [...] Merci pour vos réponses, c'est ce que je fais tout le temps avec mes ADN donc çà devrait aller. Je pensais qu'il y avait peut être des techniques d'extraction, ou de précipitation particulière.  [...]

[Identification] Trypsinisation avant 2D-LC-MS/MS : CaCl2 ?

Dans mon protocole de trypsinisation de solution, j'utilise du PPS (pour ses propriétés détergentes compatibles MS/MS) et CaCl2 (1mM). Mais je ne comprend pas pourquoi j'utilise du CaCl2.   [...] Ps. Je travaille sur des cellules d'Arabidopsis thaliana, j'ai fait l'extraction protéique par précipitation au TCA (j'ai utilisé de l'urée comme détergent). Après ma trypsinisation, je fais du 2D-LC-MS/MS.  [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme de ligase?

2/ Je n'aime pas trop que les deux partenaires d'une ligation soient extraits d'un gel, ça diminue pas mal l'efficacité de ligation. Il vaut mieux purifier uniquement le fragment sur gel et traiter le vecteur à la phosphatase (+ extraction phénol après, of course).  [...] S'il reste la moindre trace de phosphatase pendant la réaction de ligation, ça va déphosphoryler aussi ton fragment et rendre la ligation impossible. Dernier point. l'extraction au phénol est toujours suivie d'une précipitation à l'éthanol, mais je suppose que tu le savais déjà.  [...]

[Physiologie] dosage du glycogene hépatique

J'ai fait le meme TP la semaine derniere et j'ai quelque idees à propos de ces reactifs utilises.le KOH,c'est pour digerer le foie-l'ethanol,pour precipiter le glycogene(extraction du foie par precipiatation).  [...] Oui ninio,je sais que tu parles de la precipitation du glycogene mais moi je corrige une faute que je l'ai ecrit dans ma 1ere message.  [...]

Extraction de l'ADN

[COLOR= Plum ]Bonjours,je voudrais savroir pour quoi au cours de l'extraction de l'ADN génomique d'Arabidopsis thaliana.aprés broyage du tissu et la mises de la solution de lyse,pour précipitation des protéines,on doit incuber le mélange dans une étuve et pour quoi exactement à 65°C [/COLOR ].  [...] Peut-être est-ce une température suffisante pour dénaturer les protéines partiellement tout en restant inférieur au Tm de ton ADN.   [...]