• Santé - Extraction, Liquide, Méthode, Séparation

[Biologie végétale] Extraction d'un milieu Murashige et skoog (agar)

Je suis actuellement en labo en Espagne et je cherche un moyen d'extraire des composes (ibuprofen, tonalide, DBA,pyrene...) d'un milieu de Murashige et skoog.   [...] J'ai déjà essayer une extraction liquide liquide mais la reproductivite de la methode est mediocre a cause de la solidification de l'agar et de la mauvaise séparation des phases. J'ai réalisé également une hydrolyse acide pour degrader l'agar. Cette methode foonctionne mais la recuperation de certains composes est mauvaise (20% pour l'ibuprofen par ex) mais excellente pour d'autres (atrazine, pyrene, DBA et tonalide).  [...]

[Biologie Moléculaire] Chromatographie et éléctrophorése

La chromatographie est une méthode de séparation dans une phase mobile (liquide, gaz).  [...] L'électrophorèse est une méthode de séparation dans un champ électrique.  [...]

[Identification] IPG strip gel combiner a une extraction au PBS

J'aimerais savoir si vous avez un protocole me permettant d'utiliser une extraction proteique au PBS (cellule vegetal, hypocotyl de soja) suivi d'une separation utilisant la methode IPG (pour ensuite effectuer une electrophorese et un CBB staining).  [...] Une personne dans le labo l'a deja essayer et son gel apres coloration etait... vide, aucun spot (sauf un mais bon...), il a ensuite essayer en utilisant un kit de lavage de l'extrait proteique mais le resultat obtenu etait moin bon qu'une extraction PBS suivie d'une 1-D en tube gel.  [...]

[Biochimie] Etude des protéines par spectrométrie de masse

En fait, suivant l'étude que l'on veut faire, on va devoir utiliser tel ou tel analyseur et c'est surtout ça qui va nous indiquer quelle source d'ionisation utiliser. Si on veut étudier un mélange complexe pour faire une étude d'interactôme par exemple, il sera préférable d'utiliser un analyseur orbitrap (un analyseur très résolutif) qui est toujours couplé à une source d'ionisation ESI.   [...] De plus, la source ESI est facilement couplée à une chromatographie liquide qui va entrainer la séparation des peptides avant l'entrée dans le spectro. Il est bien sur possible de le faire avec un appareil MALDI-TOF mais ca prendra beaucoup plus de temps puisqu'il faudra faire des gels à 2 dimensions par exemple pour séparer au maximum nos protéines puis faire l'extraction de chaque spot, reduction alkylation et digestion qu'on dépose sur la plaque MALDI (aujourd'hui la robotisation fait qu'il est possible de coupler une chromatographie liquide au MALDI).  [...]

[Microbiologie] Les ferments du lait

La modification du lait en yaourt ou fromage se fait par hydrolyse des caséines du lait. Selon le degré d'hydrolyse on aura des textures différentes.   [...] Le beurre se fait sans coagulation, c'est une séparation des matières grasses du lait et du liquide. Pour le babeure, je n'en sais rien, je sais juste qu'il s'agit d'un lait acidifié, mais je ne sais pas via quelles méthodes.  [...]

Un grand pas en avant vers un séquençage ultra-rapide de l'ADN

Ce 1 er février 2016, Aurélien Bancaud, chercheur au laboratoire Laas (Laboratoire d'analyse et d'architecture des systèmes) a reçu le prix d'instrumentation de la société française de chimie. Sa découverte. une méthode révolutionnaire de séparation des fragments d' ADN qui permet de réduire à 10 mn un travail qui prend généralement plusieurs heures.  [...] L'ADN s'écoule sur la puce et un courant électrique permet la séparation. Grâce à cette méthode, la préparation, la séparation et la détection de bandes d'ADN se font en une seule étape et donc en un temps record. l'ADN pourrait être ainsi caractérisé en 10 mn seulement.  [...]

[1ere S] L'importance de l'électrophorese

l'électrophorèse est une méthode de séparation des molécules en fonction de leur taille, de leur masse et de leur charge électrique.  [...] cette méthode se prète bien à la séparation de différentes protéines dans un mélange et/ou leur identification à partir de témoins dont on connait les caractéristiques de la migration.  [...]

[Biologie Cellulaire] Ultracentrifugation

Bonjour, j'aimerais une petite précision sur l'ultracentrifugation. Je voudrais savoir sur quel paramètre s'appuie cette méthode C'est-à-dire qu'il y a séparation en fonction de la masse, ou de la densité, ou quel paramètre.  [...] C'est une séparation en fonction de la densité. C'est un genre de décantation accélérée en quelque sorte. Le fait de centrifuger exacerbe les différence de densité des différents constituants d'un mélange et permet leur séparation rapide. Par exemple, lorsque dans un tube tu mets un liquide qui formera un gradient de densité, du plus dense au fond au moins dense en surface, tu pourras séparer par exemple les constituants d'une cellule qui iront se placer au cours de la centrifugation à l'endroit ou leur densité est égale à celle de ton support.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARN insoluble ??

les ARN de cellules non transfectées se resuspendent bien. Le problème c'est que pour transformer des hépatocytes, c'est la seule solution. Mais le PEI a été évacué en changeant le milieu, et il y a eu un lavage avant extraction.  [...] Très bonnes idées ici, je pensais a un truc du genre. Je comptais aussi essayer avec de l'acétate de sodium. Ce truc est chiantissime... Le problème pour la méthode de transfection, c'est que c'est à ma conaissance la seule technique qui fonctionne sur des hépatocytes.  [...]

levure s. POMBE

Malheureusement, les méthodes de synthèse utilisées jusqu'à présent par BIO-PEP sont très coûteuses, et la vice-présidente section recherche et développement propose de mettre au point l'utilisation des technologies d'ADN recombinant pour produire le peptide.  [...] le peptide doit enfin être récupérée puis purifiée, cette étape faisant appel à des techniques plus classiques (séparation, extraction, purification).  [...]