• Santé - Extraction, Isolation, Culture, Cellules

[Biologie Cellulaire] Conservation de biopsies de peaux

[Biologie Cellulaire] Conservation de biopsies de peaux.  [...] Je souhaiterais savoir qu'elle est le meilleur moyen de conserver des biopsies de peaux (pour le transport) afin d'effectuer par la suite une extraction/ isolation et culture des cellules cutanées.  [...]

Immunoprécipitation de la chromatine

Le protocole donné est. extraction de l'ADN depuis la cellule puis isolation de la chromatine que l'on souhaite- on retire les protéines fixées dessus puis on séquence l'adn.  [...] La ChIP permet d'identifier le site de fixation d'une protéine sur l'ADN. Il faut posséder l'anticorps spécifique de la protéine qui t'intéresse (ou alors exprimer une protéine taggée dans ta cellule et avoir un anticorps anti-tag). Donc tu extrais les complexes ADN/protéines des cellules, tu les découpes en courts fragments (qq centaines de paires de bases par exemple pour commencer) tu incubes avec ton anticorps.  [...]

[Biologie Cellulaire] isolation et culture de sébocytes humains

Par ailleurs, dans la biblio toujours, la plupart des milieux de culture utilisés contiennent de la toxine de cholera. Quelqu'un saurait-il quel est son rôle dans la culture de sébocytes.  [...] je souhaite travailler sur ce type de cellules. Avez vous pu les isoler facilement, à partir de quel tissu et auriez vous un protocole détaillé.  [...]

Extraction d'ADN

La technique pour l'isolement rapide d'ADN mitochondrial (mt ADN) à partir de cellules d'animaux, est basée sur le procédé sélectif de dénaturation alcaline de BIRNHOIM et DOLY et évite l'utilisation de la centrifugation en gradient de densité dans le CsCl.  [...] Je crois me souvenir qu'une centrifugation particulière permet d'isoler les mitochondries (elle est relativement puissante si mes souvenirs sont exactes. Peut être peux tu commencer par ca avant de faire ton extraction.  [...]

[Biologie Moléculaire] les ARNs et extraction

En fait le protocole est fait de manière classique. Extraction au chloroforme d'environ 5 millions de cellules. récupération de la phase aqueuse, centrifugation et lavage et précipitation a l'éthanol. on redissoud le culot dans 10 µL d'eau. on a un rapport de pureté a peu près de 1.  [...] The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. twenty-something years on.  [...]

Un complexe anticorps-polymère pour isoler rapidement les cellules souches

Une équipe de l'Universite de Nagoya a développé une nouvelle méthode d'isolation des cellules souches, dix fois plus rapide que le procédé conventionnel. Elle fait intervenir un complexe comprenant un anticorps spécifique des cellules souches et un polymère qui devient hydrophobe une fois chauffé.  [...] L' isolation des cellules souches a lieu dans un tube à essai contenant deux phases insolubles, du polyéthylene-glycol pour la phase organique et du dextran pour la phase aqueuse. Le lot de cellules à trier et le complexe anticorps-polymère sont ajoutés au tube, et le tout est mélangé et chauffé.  [...]

Cancer du foie : une nouvelle méthode pronostique non invasive testée

Les chercheurs de l'Unité Inserm Carcinogenèse hépatique et virologique moléculaire ont utilisé la technique d' isolation selon la taille des cellules tumorales ou ISET (pour Isolation by Size of Epithelial Tumor Cells) sur 44 patients atteints de cancer primitif du foie.  [...] Les résultats, obtenus par l'analyse de seulement 3 millilitres de sang, montrent que la circulation des cellules tumorales dans le sang est bien un signe de progression de la tumeur chez les patients atteints de cancer primitif du foie. Les chercheurs de l'Inserm mettent en évidence que la présence et le nombre de ces cellules tumorales circulantes sont bien associés de manière significative à une survie écourtée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification des ARNm procaryote ?

A simple and efficient Triton X-100 boiling and chloroform extraction method of RNA isolation from Gram-positive and Gram-negative bacteria.  [...] A fast, reliable, and inexpensive Triton X-100 boiling procedure for RNA isolation from both the Gram-positive and Gram-negative bacteria was developed. The yield of RNA was 0.2-2 mg per 10 ml bacterial culture. The method was tested on Gram-positive and Gram-negative bacteria of eight genera and nine species and yielded reproducible results.  [...]

[Biochimie] Sodium Deoxycholate

Je voudrais savoir si quelqu'un sait quel est l'action du sodium deoxycholate Je l'utilise dans une solution de lavage, mais parmi d'autres composants.   [...] Application Anionic detergent. useful for extraction of membrane receptors and other plasma membrane proteins and for nuclei isolation.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN

Je viens de m'inscrire sur ce forum qui m'a l'air tout à fait intéressant. Ma question est la suivante. en fait je travaille actuellement sur des algues brunes et je réalise pas mal d'extraction d'ARN avec le kit Picopure RNA Isolation de chez Arcturus. Mais le problème c'est que l'ARN est souvent assez sale à la fin, donc je voudrai savoir si quelqu'un a déjà utilisé le Kit Rneasy Micro de chez Qiagen sur les plantes, et si vos résultats étaient meilleurs ou pas (car il possède un cleanup en plus). Merci d'avance et bonne journée.  [...] D'après ce tableau, le kit RNeasy Micro que tu t'apprête à utiliser convient uniquement aux petits échantillons de cellules ou de tissus. J'ai bien peur que ton kit Picopure RNA Isolation de chez Arcturus soit également optimisé pour les tissus animaux.  [...]