• Santé - Extraction, ADN, Transformation

L'extraction d'ADN génomique et transformation de levure

Bonsoir, je suis en master pro et je recherche le rôle de certain tampons présents lors de l'extraction d'ADN génomque et lors de la transformation de S.cerevisiae.  [...] Alors j'ai du PEG (complexant des molécules H2O je crois) Mais je vois pas trop à quoi ça sert dans la transformation de cellules, de l'acétate de lithium (pour créer des pores) et de l'ADN de sperle de Hrang dénaturé (là je vois pas...) tout ça c'est pour le protocole de trasnfo.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

contrôle-qualité de l'ADN recombinant. transformation dans E. coli, sélection des clones recombinants et extraction du vecteur d'expression.  [...] Ensuite, une fois que tu as tout ça, tu transformes pour voir des phénotypes associés à des mutations, des sauvetages de phénotypes ou ce que tu cherches De toute façon, tu conserveras ton ADN en tube après son extraction, pas dans des cellules.  [...]

bactéries (reproduction)

La conjugaison est un phénomène permettant l'échange d'information génétique entre une bactérie donneuse et une bactérie reçeveuse, qui devient donc modifiée. Elle est assimilée à une reproduction sexuée car on peut y voir une analogie avec la reproduction des Eucaryotes.   [...] La transduction n'est pas un mode de reproduction bactérien. C'est un phénomène lié à l'attaque d'un bactériophage. ce dernier ayant encapsidé de l'ADN du génôme de la bactérien précédemment infectée à la place d'ADN viral. La bactérie infectée par ce phage particulier peut être ainsi modifiée génétiquement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contrôle négatif clonage

La seule chose que je peux te dire c'est que la manip de transformation des bactéries par le vecteur seul a raté, et qu'un très faible nombre de colonies a donc pu se développer. Par curiosité, combien de colonies par µg d'ADN as tu obtenu dans le contrôle et dans la transformation avec vecteur + insert.  [...] En ce qui concerne l'efficacité de ta transformation (vecteur+insert) elle n'est que de 13.10^3 bactéries transformées/µg d'ADN ce qui est faible (une valeur de 10^6 est en général souhaitable).  [...]

sequencage du genome humain

Les bactéries de la meme espece peuvent en effet ne pas présenté le meme patron génétique à cause notament de la transformation via le facteur K, mais elles ont globalement les mêmes gènes. Sinon on ne parle plus de la même espece. En plus les bactéries possédent de l'ADN extrachromosique qui fait qu'une bactérie peut posséder des propriétés que d'autres souches de la même espece ne possédent pas.  [...] autre question, basique. on ne detecte donc qu'il y a un gene a un endroit lors d'un sequencage simplement via des sequences bien définies (comme initiation de la transcription, terminaison, promoteurs,...).   [...]

[Microbiologie] Transfert de gènes par conjugaison/transformation

L'ADN transformant et l'ADN de la bactérie réceptrice doivent être similaires et la transformation n'est possible qu'entre bactéries d'une même espèce ou qu'entre bactéries appartenant à des espèces voisines.  [...] Mais il n'y a pas de contact direct entre ces deux bactéries et le mécanisme de transformation en lui même correspond bien à ce que j'ai dit même si avant d'être dans le milieu extérieur, l'ADN appartenait à une autre bactérie.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfert des gènes de résistances

Transformation bactérienne. Une bactérie meurt, son ADN est relarguer dans le milieu et une autre bactérie adsorbe cette ADN puis l'intégre a son génome. ADN portant potentiellement de tel génes de résistances.  [...] Transduction. Un phage s'excise mal et emporte un morceaux du chromosome de la bactérie dans lequel il était intégrer. Morceaux pouvant comporter un géne de résistance. Puis ce phage va infecter une autre bactérie et cette bactérie intégre l'ADN du virus au sien et devient ainsi résistante.  [...]

[Evolution] Evolution de la reproduction aséxuée

Et je suis même persuadé qu'au début ça devait échanger des gènes dans tous les sens. La reproduction asexuée aura été une sorte de holà mis aux transferts.   [...] Je suis d'accord avec Alphreta. d'une part sexualité c'est bien la reproduction entre 2 êtres de sexe différents, et de 2 si tu parles d'echange de gènes entre 2 entités, c'est un transfert horizontal.   [...]

Des bactéries recyclent de l'ADN de mammouth vieux de 43.000 ans !

Découverte en 1928 par le médecin Frederick Griffith, la transformation génétique, c'est-à-dire l' absorption et l'intégration d' ADN étranger par les bactéries, est un phénomène bien connu des bactériologistes et est régulièrement utilisée dans les laboratoires de génie génétique.  [...] Pour cette étude, les chercheurs ont étudié la transformation génétique chez Acinetobacter baylyi, une espèce bactérienne capable d'absorber naturellement et facilement de l'ADN. Ils ont montré qu'elle pouvait attraper et insérer dans son génome des séquences d'ADN très abîmées.  [...]

[Biologie Cellulaire] gène qui s'intégre au chromosome

Rarement peut-être, mais dans le cas de la transformation, l'ADN bicaténaire est dégradé par un exonucléase. Un unique brin pénètre le cytoplasme et s'intègre au chromosome bactérien (si les bactéries sont d'espéces proches).  [...] Je veux dire par là, qu'il est dit que les bactéries peuvent acquérir de nouveaux gènes de résistance lors de la transformation. Or, le problème énoncé plus haut m'amène à me demander qu'est-ce qui rajoute des nucléotides complémentaires au gène rajouté ou est-ce que ça ne pose aucun problème qu'il y ait un trou dans la séquence d'ADN.  [...]