• Santé - Extraction, ADN, Tissus

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ADN tissus formolés et non inclus en parffine

on me demande pour un cas particulier (nécropsie) dont l'ADN est surement dégradé, de tester une extraction d'ADN sur un tissus fixé au formol 10% et non inclus en paraffine.  [...] Pour les manips de ChIP, on extrait de l'ADN de cellules crosslinkées au formaldéhyde (formol si tu veux) donc ce genre de protocole pourrait coller. Si jamais tu t'orientes vers ce genre de protocole, attention à bien digérer à la protéinase K avant extraction de l'ADN.  [...]

[Génétique] meilleur conservateur d'ADN

L'ethanol 70% à -20°C est très bien pour conserver l'ADN. Ceci dit, si tu ne conserves les tissus que pour en extraire l'ADN, à ta place, je ferais deja une extraction, je pelotterais l'ADN et je le conserverais ainsi à -20°C, flottant dans l'ethanol.  [...] (j 'utilise actuellement des tissus ages de 1 an pour faire des analyses d'ARN, ADN, proteines... et apres confirmation de la qualite, rien n'a bouge...).  [...]

Et revoilà le clonage de mammouth !

Il ne s'agit donc évidemment pas de cellules vivantes, ce qui serait tout de même étonnant dans les tissus d'un animal mort il y a de nombreux milliers d'années. Même la congélation dans le pergélisol (nous sommes au-delà du cercle polaire ) aurait du mal à conserver une cellule vivante intacte.  [...] Les membres de l'expédition ont, rapporte l'AFP, réussi à colorer les noyaux, probablement, peut-on en conclure, avec les réactifs utilisés pour mettre en évidence l' ADN. Les tissus seraient donc exceptionnellement bien conservés, laissant espérer l'extraction d'un matériel génétique de qualité.  [...]

Besoin d'avis pour optimiser extraction d'ADN à partir de tissu FFPE en vue d'une CGH

Dans le cadre de mon stage de Licence, je suis censé, dans un CHU, développer une méthode de CGH sur tissus FFPE (les profils, observés à l'aide du logiciel CytoGénomic, sont ininterprétables). Je dispose donc d'un protocole de base, mais, ayant commencé les manips cette semaine, malgré une extraction ayant conduit à une quantité plus que suffisante d'ADN (déterminée au nanodrop), notre marquage à la cyanine (random priming) à très mal fonctionné sur l'ADN du patient.  [...] J'ai donc fait pas mal de biblio et il semblerait (d'après Burcu Sengüven et al.. Comparison of Methods for the Extraction of DNA from Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Archival Tissues), que l'étape qui influence le plus la qualité de notre ADN est l'étape d'extraction.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

L'extraction d'ADN est au programme au lycée en seconde, et c'est une manip qui est faite à la fac donc si dans google tu tapes TP extraction ADN tu devrais trouver ce que tu veux.  [...] Tout dépend pour quoi tu veux réaliser une extraction d'ADN. Je vais essayer de l'expliquer dans le cadre d'une extraction d'ADN pour les bactéries.  [...]

[Biotechnologie] Déparaffinage !!

je voudrais savoir comment proceder pour extraire des tissues dans des block de paraffine afin de les conserver pour utilisation ulterieure (extraction d'adn).  [...] Je ne sais pas non plus si on peut utiliser l'adn après. Juste une précision cependant, les blocs de paraffine servent justement à la conservation des tissus... On extrait pas le tissu pour le conserver après quoi. Mais le paraffinage ca sert surtout à stocker des tissus pour étude au microscope.  [...]

protocole d'extraction d'ADN

je travail sur l'extraction de l'ADN à partir des bactéries (LES STREPROMYCES), je cherche des protocoles d'extraction d'adn pour les bacteries mais je n'trouve que mes noms mais pas de protocole s'il yas quelqu'un qui peut m'aider.  [...] oui j'ai essayé mais ce que je trouve c des these de doctorat et la partie qui m'interesse il parle brievement de l'extraction d'ADN on a utulisé pour l'extraction la methode X... et quand je cherche la methode je n'y trouve rien, je vais ressayer encore une fois si je tombe sur quelque chose.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

.. mais à mon avis le gros problème avec l'extraction d'ADN à la maison c'est les contaminations. Chez nous, malgré les précautions prises, ce n'est pas du tout rare alors dans une cuisine.  [...] Le plus long est l'étape d'extraction de l'ADN, car il faut un temps d'attente d'une nuit (environ 16h). Puis l'extraction en elle même n'est pas spécialement longue (2-3h). Dans mon ancien labo, on préférait que l'ADN se re-suspendre après purification sur la nuit également, à 4°C, mais cela n'est pas obligatoire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN

je test actuellement plusieurs kit d'extraction d'ADN dont TaKaRa DEXPAT et un kit similaire édité par Macherey-nagel. ces kit permettent d'extraire l'ADN de coupes de tissu paraffiné.  [...] en fait je compare plusieurs façons d'extraire l'ADN à partir de coupes de tissus paraffinés. et pour l'instant j'ai essayé la technique classique au phenol/chlo et les deux kit précédemment cité.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction adn phénol/chloroforme

j'aurais besoin de connaitre le role du phénol, du chloroforme et de l'éthanol lors d'une extraction d'ADN. car j'ai l'impression qu'ils font tous la même chose. débarassé l'adn des débris lipidiques et des protéines.  [...] Bonjour à tous.J'ai récemment fais un tp de biochimie (L2 SV),consistant a extraire l'adn a partir de cellules de foie de porc.Nous avons également utilisé de l'alcool a froid,du chloroforme et de l'isoamylalcool(qui favorise apparement la séparation des phases et la fomation de mousses).  [...]