• Santé - Extraction, ADN, Résine

[Génétique] Extraction de l'ADN au Chelex 100

J'étudie actuellement les différentes méthodes d'extraction de l'ADN et je ne parviens pas à comprendre la méthode d'extraction au moyen de la résine Chelex 100. Est-ce-que quelqu'un qui s'y connait plus que moi pourrait me l'expliquer en termes simples.  [...]

[Biologie Moléculaire] Utilisation de la résine Chelex pour reverse crosslink de l'adn

Je recherche quelqu'un qui utiliserait du Chelex pour reverse crosslink des protéines sur l'adn et qui pourrait m'expliquer comment cela fonctionne.  [...] en tout cas le 4ème lien google est http.//bpi.sophia.inra.fr/docs/Extraction_chelex.pdf, certes cela me dit que les billes captent les impuretés protéiques, mais comment quel est le rapport avec le fait que le chelex soit une résine échangeuse d'ions est-ce que les protéines sont détachées par la température, puis captées par le chélex et la question au sujet des sels reste entière.  [...]

[botanique] Chanvre

C'est quand même la même plante mais avec d'autres caractères sélectionnés que le chanvre textile. En fait il paraîtrait que la sélection du caractère richesse en fibre contre-sélectionnerait la richesse en THC mais ce taux est tout de même contrôlé dans les variétés à fibre cultivées pour vérifier qu'il est le plus bas possible.   [...] Tu fais bien de mettre paraîtrait, car si la production de THC est provoquée en réaction à un stress hydrique par manque d'humité et d'excès de soleil, le même stress inhibera la pousse de la plante et le besoin de sécréter de la fibre par la même occase.   [...]

Optimisation d'extraction d'ADN

Donc ceci je connais pas ton kit mais par expérience j'ai remarqué que si tu double tout les temps (temps de centri, temps d'incubation) t'améliore le rendement de purif. Moi même je laisse au moins 10 min pour la première incubation ou l'ADN entre en contact avec la résine (si c'est un kit avec des petite colonne que tu utilise).  [...] 5 ml puis je commence l'extraction par l'ajout de tampon de lyse et la proteinase K, je vortex puis je les incube pendant 15 min dans le bain mari à 56°C... puis j'ajoute RNase et je centifuge, puis l'éthanol et je vortex et je déplace la solution lysée au colonnes de résines je centrifuge 10.  [...]

chaine alimentaire...

A notre mort nous serons petit à petit minéralisés... la matière organique sous l'action des décomposeurs devient de la matière minérale. CO2, sels minéraux.   [...] Dans le bouquin de SF, Vers la révolution, de Philip Goy (un français malgré le nom), il y a une nouvelle sur le sujet. le personnage principal se pose le problème comment garder sa dépouille intacte le plus longtemps possible. Solution adoptée. rayon gamma forte dose pour casser tous les ADN des bactéries et autre décomposeurs, emballage dans de la résine (plastique durcissable), puis envoi en dehors du système solaire.  [...]

dégradation de protéine recombinante

Si tu fais une gel filtration, c'est simple, tu concentres ta protéine autant que tu peux (dans un volume inférieur à 100 µl de preference). Tu fais ensuite circuler dans la colonne ton tampon A, tu injectes la protéine et les protéines se séparent toutes seules en fonction de la taille (les plus grosses d'abord, les plus petites après), il n'y a plus qu'a recuperer les fractions et trouver dans lesquelles se trouve la protéine.   [...] Tu peux aussi faire un SDS-PAGE sur un extrait de résine incubée avec ton extraction protéique (sans laver), ça te dirais si les contaminants apparaissent au moment des lavages, à cause des protéases ou avant.  [...]

[Biologie Moléculaire] Aide pour devoir sur chromatographie

Vous faites une filtration C'est l'adsorption sur la résine C'est une résine échangeuse d'anion ou de cation (pk ça change tout).  [...] Il faut bien que tu comprenne le principe d'une résine échangeuse d'ions et tu pourra répondre a toutes les question suivante.  [...]

[Biochimie] Quelle résine Nickel pour purifier mes protéines?

Je m'y perd un peu avec tous les fournisseurs (GE, Thermo, Qiagen...). Y a t-il des résines mieux que d'autres.  [...] Ta pas que cette étape de purification pour ta prot de toute façon j'imagine Sinon une ionique et une GF derrière et ta prot sera 100% pure.   [...]

[Immunologie] Immunoprecpitation: liaison de la resine protG avec l'anticorps qui marche pas

Bonjour tous le monde. Je suis entrain de faire la mise au point d'une IP. pour se faire j'ai voulu juste tester le rendement de la résine protG avec l'anticorps sans rajouter la protéine d'intérêt. la résine ne capte même pas le 1/10 de la quantité de l'anticorps de départ qui est de 1µg dans 500µl de PBS avec 50µl de la résine.  [...] C'est peut-être à cause des charges Avez-vous essayé de laver au tampon Tris-EDTA ou phosphate sans NaCl Quelle résine utilisez-vous.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification Protéines Tag 6His

2) J'ai fait un suivi de la protéine en prenant des aliquots à chaque étape de purif. Je retrouve ma protéine dans le surnageant, des traces minimes dans les lavages et elle est à la bonne taille. En revanche la fraction purifiée (éluat) donne une bande légèrement en dessous des autres.   [...] - J'utilise déjà de l'imidazole pour empêcher les collages non spécifiques. Je fais aussi une ultracentrifugation avant la purif pour enlever tous les résidus, à mon avis, une ligation non spécifique diminuerait mon rendement sans le sapper à ce point. Je retiens la suggestion au cas ou.  [...]