• Santé - Extraction, ADN, Protéines

[Microbiologie] extraction d'ADN

j'ai fait l'extraction d'ADN au phénol chloroforme je me suis rendue compte à la fin de la manipulation que le culot est chargé également en protéines pourrais je me rattraper.  [...] pour extraire t adn t peux faire une chromatographie avec une hydorxyapatite avec la forme minerale de phosphate en partant au depart par une cncentration faible puis pr eluer tn adn au augmente la concentration mais bon ça depnde aussi de la charge des autre proteines.  [...]

expérience Meselson et Sthal

dans cette expérience le suivi d'ADN après centrifugation sur gradient de ClCs,par spéctrophotmétrie d'absoption dans l'uv.  [...] Mais souvent on mesure également la DO à 280 également pour pouvoir estimer la contamination par les protéines (c'est valable lorsque l'on fait une extraction d'ADN par exemple).  [...]

extraction phénol chloroforme

L'extraction phenol/chloroforme (ou old school ) ne permet pas à elle seule de faire une extraction d'ADN. Il faut faire une lyse des cellules (lyse alcaline ou pk ou...) et d'autres étapes d'extraction/purification/précipitation/lavages peuvent être ajoutées.  [...] L'extraction phénol ne permet que de laver ton ADN préparé en le débarassant des protéines (jusqu'à un certain point)... reste plus qu'a faire une extraction chloroforme pour enlever le phenol qui est dissout dans la phase acqueuse.  [...]

Extraction de l'ADN

[COLOR= Plum ]Bonjours,je voudrais savroir pour quoi au cours de l'extraction de l'ADN génomique d'Arabidopsis thaliana.aprés broyage du tissu et la mises de la solution de lyse,pour précipitation des protéines,on doit incuber le mélange dans une étuve et pour quoi exactement à 65°C [/COLOR ].  [...] Peut-être est-ce une température suffisante pour dénaturer les protéines partiellement tout en restant inférieur au Tm de ton ADN.  [...]

Extraction simple des protéïnes végétales

Vous savez, le truc tout simple pour extraire l'ADN J'ai lu que ça brise les cellules y compris les cellules végétales. Si ça peut extraire l'ADN, pourquoi ça ne marcherait pas avec les protéïnes (a moins que l'un des produits nécéssaires à l'extraction n'altère celles-ci) Je voudrais aussi savoir si ça peut marcher avec du zeste d'orange ou du bois et si pour faire cette expérience il est impératif de mettre à tout prix les quantités de produits demandés. Merci de me donner votre avis.  [...] je ne comprends pas ta question. Ca fait longtemps qu'on sait extraire les protéines des végétaux ou autres formes de vie. C'est déjà dans les livres de chimie du XIXème siècle.  [...]

[Biochimie] extraction de l'adn

hum... on ne peux pas le dire car sa diffère beaucoup selon le type de molécule extracte, car les compositions des membranes sont différentes. Chez la cellule végétale tu as déjà la paroi cellulosique très contraignante où quand j'ai fait une extraction protéique à partir d'algue, il fallait que je fasse un traitement au sulfate ainsi qu'un passage à la sonication (onde de choc).  [...] Le problème est que j'avais une extraction foireuse car mes protéines étaient partiellement dénaturé, donc l'ADN, je ne sais pas si c'est aussi fragile.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN plasmidique

j'aurais une question a poser à ceux qui qui métrisent un peu les protocoles d'extraction d'ADN plasmidique.c'est la première fois que je manipule et et les bactéries sur lesquelles je travaille sont des lactobacilles et des lactocoques.  [...] Pour le phenol, il se trouve qu'avant il fallait le saturé soit même et maintenant il s'achète tout fait, enfin saturé quoi. Pour l'extraction d'ADN on utilise du phénol saturé avec du tris et pour l'extraction d'ARN avec de l'eau. A ce que l'on m'a dit, les ARN reste dans la phase aqueuse et les protéines resteraient dégradées à l'interphase.  [...]

Besoin d'aide pour compréhension d'un article

Genomic DNA was extracted from clipped toes or blood using the SDS-proteinase K/PhenolChloroform extraction method. The primer combination L-Pro-ML (5'-GGCACCCAAGGCCAAAATTCT 3') and H-12S1-ML (5'-CAAGGCCAGGACCAAACCTTTA 3') was used for amplifying the D-loop and sequencing.  [...] Methode d'extraction au phenol-chlorophorme au SDS-protéinase K. On veut extraire l'ADN. On va mettre du phénol chloroforme dans notre echantillon pour précipiter les protéines. L'ADN reste en solution dans la phase aqueuse qui est récupérée par centrifugation.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN DE SANG

Je suis à la recherche d'un protocole simple d'extraction d'ADN de sang sans utilisation de proteinase. du prelevement du sang à l'obtention de l'ADN.  [...] L'utilisatin de protéase irait Je connais que le kit Qiagen. QIemp DNA Blood Midi Kit pour extraire l'ADN à partir de sang, après il y en a d'autre.  [...]

extraction d'ADN

Generalement pou run extraction d'ADN on n'a pas besoin de proteinase K a moins que ca ne soit une spécificité des cellules sanguines.  [...] L'extraction phenol/chlorophorme permet en general de separer la phase acqueuse (ou se concentrent les acides nucleiques) et la phase organique (dans la quelle les proteines se solubilisent plus facilement que les acides nucleiques apres avoir ete denaturees par le phenol).  [...]