• Santé - Extraction, ADN, Lame

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN sur lame de paraffine

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN sur lame de paraffine.  [...] Je suis à la recherche d'infos pour optimiser mon extraction ADN à partir de lame tumorale incluse en paraffine. j'utilise un kit Qiagen. J'ai peu de tissu donc un rendement très faible ADN. 10 ug/ml. Ensuite la PCR de mon gène cible ne donne rien. Avez vous des trucs et astuce depuis le moment ou j'extrait de la lame jusqu'au moment ou j'élue pour augmenter ma quantité d'ADN purifié finale.  [...]

DNAchip

puces à ADN ou l'on dépose sur une lame de verre de style lame de microscope des produits PCR (faits à partir de banques cDNA ou autres) ou des oligonucléotides synthétisés individuellement. On hybride alors sur ces lames 2 conditions à la fois, voire 3. Les marquages se font avec des molécules fluorescentes donc plusieurs longueurs d'ondes disponibles sur la même lame.  [...] Et en ce qui concerne la technique SSH(suppressive substractive Hybridation), quel en est l'interet par rapport à une puce Affymetrix.   [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 12

coco, (si tu ne sais vraiment pas ce que c'est) le peignage moléculaire de l'adn est en gros une technique permettant d'obtenir des fragments linéaires et parallèles d'adn pour faciliter leur étude. On fixe l'un des bouts sur une lame spéciale puis l'on retire le liquide.  [...] En fait on utilise beaucoup cette technique pour étudier la réplication de l'ADN en visualisant les origines de réplication. Tu étires ton DNA sur une lame, ensuite tu fais une première hybridation avec un analogue du BrDU (le iodoDu par exemple) marqué en vert, pui dans un second temps tu marques avec un deuxième analogue différent (Chloro DU) lui marqué en rouge.  [...]

detection de germes pathogènes

Ensuite il reste a faire baigner cette lamelle de verre dans un bain contenant une sonde correspondante a un gene specifique de l'organisme. ainsi en fonction des signaux détectees on est capables de dire si les genes de l'organisme considérée était présent dans l'échantillon analysé.  [...] -Les salmonelles sont des entérobactéries (donc même principe que le cas général). On peut les dépister facilement grâce à des milieux contenant un substrat particulier mettant en évidence la production d'H2S par les salmonelles. colonies à centre noir (milieux SS, Hektoen).   [...]

[Biologie Moléculaire] Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

En gros, les puces à ADN sont des petites lame de verre ou de nylon (comme celle de microscopie habituelle) sur lequel des milliers de fragments d'ADN son disposés de façon géométrique.  [...] le contact puce-cible entraine donc l'hybridation de la double hélice d'adn, cela peut être mis en evidence par des techniques optique sous eclairage fluorecent ou par radioactivité. Un systeme de marquage via des traceurs fluorescent ayant été realisé prealablement.  [...]

[Génétique] Petite question sur la CGH

Autre petite question. toujours dans la CGH, on utilise de l'ADN contrôle avec l'ADN à analyser. Apparemment les deux vont s'hybrider ( de façon compétitive d'après Wikipédia... ) ensemble. Mais comment C'est un point que j'ai mal compris ^^.  [...] Non, l'hybridation ne se fait pas entre l'ADN du témoin et du patient mais avec les sondes fixées au fond de chaque puit qui sont synthétisées de façon à être complémentaires au fragment d'ADN en question (du témoin et du patient mais plus ou moins bien selon qu'il y a des duplications ou des délétions).  [...]

extraction de gel

je dois faire une extraction d un plasmide qui a migre sur gel d agarose donc je dois faire une extraction sur gel est ce que auelau un peut il m expliquer le concept je dois utiliser le kit de biolabs de monarch.  [...] Le concept est tres simple dans ton tube ou tu récolte ton plasmide il peut y avoir plusieurs longueur d'ADN (ton plasmide avec insert, mais pourquoi pas ton plasmide vide, ou autre...) ducoup tu dois séléctionner uniquement ce qui t'interesse, tu les sépare donc par electrophorèse sur gel, et ensuite puisque tu visualise ou se trouve ton ADN sur ton gel, il suffit d'extraire (physiquement, avec une lame de rasoir par exemple)le petit carré ou se trouve la bande d'ADN qui t'interesse, ensuite le gel va etre fondu et purifié afin de retirer l'agarose et ne récupérer que l'ADN.  [...]

Des nanopinces pour manipuler les gènes !

La pince possède vraiment la structure d'une paire de ciseaux et des molécules d'azobenzène et de ferrocène y sont utilisées. Sous l'action de la lumière, en particulier des UV, la forme longue de l'azobenzène se transforme en sa forme courte. Inversement, sous l'action de la lumière visible, la forme courte s'allonge.   [...] La partie constituant la lame d'un ciseau porte une molécule organométallique appelée porphyrine de Zinc. Lorsque l' atome de Zinc entre en contact avec l' azote d'une molécule, comme de l' ADN, tout se passe comme si une connexion magnétique solide se mettait en place.  [...]

[Biologie Moléculaire] détection de gènes multicopies

Tout d'abord j'avais penser faire une digestion de mon adn, puis faire migrer, suivi d'une hybridation avec une sonde radioactive et j'aurais alors pu voir si une ou plusieurs bandes s'allumaient. Malheureusement cette technique nécessite une grande quantité d'adn que je n'ai pas.  [...] Pour le principe de la FISH interphasique et bien déjà on peut la faire sur n'importe quel tissu. On dénature la lame avec le matériel génétique et les sondes puis il y a hybridation des sondes spécifiques du gène en question (locus spécifique) sur l'ADN simple brin (en parallèle on contrôle les conditions dénaturantes et la température).  [...]

[Biotechnologie] Hybridation genomique comparative

la CGH ca se fait sur chromosome entier sur lame de microscope, la CGH array, ce sont des puces à ADN.  [...] Brievement, de la cas des CGH array, tu as une lame de verre sur laquelle sont déposés des séquences correspondant à des zones connues des chromosomes, qui sont déposés sous forme d'une matrice (un peu comme pour le jeu de toucher couler A1, A2, A3,... B1, B2, B3 etc.  [...]