• Santé - Extraction, ADN, échantillon

[Biochimie] Extraction ADN a partir d'un echantillon

Pensez-vous qu'il y ait des différences en extrayant l'ADN dans des échantillons d'une meme espece mais conservés différement (éthanol ou congelé).  [...] Pour l'ARN, comme selon les espèces et les types d'ARN, la demi vie peut être extrêmement varié mais peut n'être que de quelques minutes, oui la conservation aura une incidence. Je me suis jamais amusé à conservé des ARN dans de l'éthanol (sauf pour le précipiter) mais je ne suis pas sur que ce serait très efficace.   [...]

Détection bactériennes

Extraction de l'ADN de l'échantillon (il existe des kits pour ça).  [...] une bactérie par millilitre c'est très peu. Avec toutes les méthodes connues tu vas être dans le bruit de fond. La PCR par exemple amplifie toujours quelque-chose dans les témoins négatifs. Il y a de l'ADN bactérien dans la taq, c'est connu et publié. Il te faudrait concentrer tes échantillons.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN pour détection de Chlamydia

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN pour détection de Chlamydia.  [...] Quel procédé d'extraction d'ADN utilise-t-on pour détecter par PCR la présence éventuelle d'une bactérie telle que Chlamydia dans un échantillon d'urine.  [...]

[Biotechnologie] Principe de Test ADN en parenté et criminalité

D'après ce que je sais (= euh...) on réalise d'abord une extraction d'ADN depuis l'échantillon prélevé, puis si on a suffisamment d'acides nucléiques, je crois qu'on fait une empreinte (genre PCR dirigée puis restriction enzymatique puis électrophorèse) qu'on compare.  [...] Mais on ne peut pas imaginer qu'un individu présente de nombreuses mutations par rapport a ce qu'il a recu de ses parents et ainsi se rapproche plus d'une autre famille dans l'échantillon prélevé.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR quantitative

2. D'où 2ème problème. il peut arriver que l'efficacité de la PCR soit différente entre la PCR sur la gamme standard et la PCR sur l'échantillon. Notamment si les conditions/méthodes d'extraction d'ADN sont différentes, tu peux avoir des contaminants différents qui vont influer différement sur l'efficacité de PCR, et donc l'utilisation de la gamme standard sera un peu faussée.  [...] DONC. tout dépend de la précision requise, du type de matrice (ADNc, ADN génomique,...), de l'origine des échantillons (végétal, animal, bactérien) et de la qualité d'extraction des acides nucléiques.  [...]

calibration entre différents run en QPCR

Attention toute fois. Dans cette situation tu dois tout de même faire attention à avoir extrait ton ADN de façon comparable. En effet, certains produits chimiques contenu dans différents kits d' extraction d'ADN peuvent perturber la lecture de fluorescence de l' échantillon.  [...] Je te conseille donc de vérifier la source de tes échantillons si tu n'as pas effectué toi même l'extraction, afin d' être sur de la composition de ceux-ci.  [...]

[Biochimie] Extraction protéique au laemmli ?

Je me suis demandé si l'extraction au Ripa était la cause, et qu'il faudrait peut-être une extraction plus brute. Donc j'ai refait la manip et repris directement le culot de cellules dans du laemmli. Chauffé 5min à 90°C et centrifugé 1min.  [...] normalement il faut soniquer apres extraction au laemmli, sinon l'ADN rend l'echantillon visqueux et du coup il se sépare mal lors de l'électrophorèse.  [...]

Besoin d'aide pour compréhension d'un article

Genomic DNA was extracted from clipped toes or blood using the SDS-proteinase K/PhenolChloroform extraction method. The primer combination L-Pro-ML (5'-GGCACCCAAGGCCAAAATTCT 3') and H-12S1-ML (5'-CAAGGCCAGGACCAAACCTTTA 3') was used for amplifying the D-loop and sequencing.  [...] Methode d'extraction au phenol-chlorophorme au SDS-protéinase K. On veut extraire l'ADN. On va mettre du phénol chloroforme dans notre echantillon pour précipiter les protéines. L'ADN reste en solution dans la phase aqueuse qui est récupérée par centrifugation.  [...]

Pureté de l'ADN

Bonjour à vous tous. j aurais besoin d'un coup de main svp. voilà j'ai fait une extraction d'ADN en utilisant la méthode phenol.chlorophorme.isoamyl. En voulant vérifier la pureté de mon ADN par la spectro la do a 260 n'excède pas 0.5 et le rapport 260/280 me donne 1.  [...] Re, J ai refais mon extraction J ai même refais l'étape chlorophorm phenol 2fois et J ai changé d'eau distillée au final pour mesurer la do. Cette fois ci j'ai 0.07 pour la do de l'eau mais la do de mon échantillon d'ADN reste toujours faible 0.2 à 260.'(.  [...]

Conservation d'échantillons biologiques à t° ambiante

Sincèrement si c'est seulement pour de l'extraction d'ADN je ne pense pas qu'il y ai de problème. L'ADN est très résistant et pour preuve des test ADN effectué sur les cadavre sont possible... Faut pas t inquiéter pour tes échantillons ^^.  [...] Tout ca pour dire qu'il est plus simple de payer un peu plus cher et d'envoyer les echantillons proprements que de les perdre et de devoir les refaire les renvoyer une seconde fois. La solution la plus simple, la mieux et la moins chere etant de faire l'extraction d'ADN toi meme, et d'envoyer l'ADN par la poste.  [...]