• Santé - Expression, Protéine, Intérêt

[Biologie Cellulaire] Séquence nucléotidique des protéines.

Merci pour la reposes cest bien ce que je supposais. Ça me rassure. Ainsi que pensez vous alors de la citation On raboute a la séquence de nucléotide d'une protéine dite rapporteur. Une enzyme.  [...] L'idée peut être ici de suivre l'expression protéique de la protéine d'intérêt en suivant l'activité de l'enzyme rapportrice.  [...]

Sida : des vaccins limitent fortement la contamination des singes

Cette fois, des chercheurs de l' université d'Harvard se sont attaqués à des souches plus résistantes du VIS en tentant de mettre au point différents vaccins pour déterminer lesquels étaient les plus efficaces. Chez le macaque rhésus Macaca mulatta, une première injection d'un adénovirus modifié génétiquement pour synthétiser des protéines antigéniques du SIV (Gag, Pol et Env) était réalisée.  [...] Lors de l'analyse de la réponse immunitaire, ils se sont aperçus que les macaques qui avaient développé une immunité forte contre la protéine antigénique Env (celle de l'enveloppe externe du VIS) s'étaient montrés les plus imperméables à l'infection. Cela démontre donc l'intérêt de produire des vaccins favorisant l'expression d' anticorps ciblant cette protéine Env.  [...]

[Microbiologie] transformation bactérienne

On transforme avec un plasmide qui contient en général plusieurs gènes. Un gène de résistance pour sélectionner les bactéries transformantes, et un gène d'intérêt (pour l'expression d'une protéine par exemple).  [...] Rien ne nous empêche de transformer une cellule bactérienne avec plusieurs vecteurs, ou d'insérer sur un même vecteur plusieurs gènes d'intérêt. Mais votre question nécessite quelques précisions.  [...]

[Génétique] Transfection transitoire plasmide/siRNA

- la disparition progressive de la fluorescence est-elle due à la dilution de la population ou à la dégradation du plasmide et de la protéine exprimée. quelle cinétique.  [...] Et dans ce cas comment contourner l'extinction pour prouver la spécificité La surexpression de la protéine d'intérêt par un plamside d'expression contenant le gène d'in térêt est-il touché par le siRNA.  [...]

[Biochimie] Normalisation ChIP-chip/microarray

stress10 - no stress, mais l'instensite du signal entre les deux manip est differente. Ma question est donc, comment normaliser mon signal Est ce qu'il est correct de calculer la moyenne de mes signaux et d'appliquer un coef pour ramener cette moyenne a une valeur identique.   [...] Juste pour preciser, c'est une manip de ChIP-chip. Je ne cherche pas a connaitre le niveau d'expression de mon gene (comme en microarray classique) mais plutot savoir ou se situe ma proteine d'interet sur le chromosome.  [...]

[Biochimie] Biologie cellulaire proteine

Avec une fusion traductionnelle avec le GFP ou le (par création d'un gène chimère en association avec le gène codant pour la protéine d'intérêt.-D ).  [...] En première approche l'immunohisto est pas mal. Maintenant si cette protéine ne diffuse pas vous pouvez aussi faire de l'hybridation in situ des transcrits. Vous n'aurez pas la protéine proprement dite mais vous aurez le profil d'expression. L'intérêt est que vous pouvez toujours faire une hybridation in situ alors que vous êtes dépendant des anticorps pour l'immuno.  [...]

[Biotechnologie] Global Analysis of Protein Activities using proteome chips

Ils purifient ensuite la protéine d'intérêt (grâce à la séquence GST). Sur les 1152 protéines différentes produites en même temps par cette méthode, ils en sélectionne aléatoirement 60 pour les tester par WB (afin de vérifier l'expression de la protéine d'intérêt).  [...] Pourquoi pas Le métabolisme des lipides est (très) compliqué. savoir que telle protéine interagit avec telle lipide peut permettre d'améliorer la compréhension.  [...]

[Biologie Moléculaire] activité des protéines recombinantes

Je me demande si les protéines recombinantes fusionnées à la GST peuvent être active dans les cellules. D'autre part, est-ce qu'il est possible de couper la fusion GST de ces protéines.  [...] 2) Oui, il suffit d'insérer un site de clivage entre la GST et la protéine d'intérêt. Il existe des vecteurs contenant déjà ce site de clivage en amont du MCS, par exemple le Pgex6P1 pour l'expression en bactéries.  [...]

besoin d'aide pour technique direct blot and following immonoprecipitation

Le but est de rechercher une forme tronquée d'une protéine. le texte est en anglais et dit que la technique utilisé est. direct blot and following IP. Je préfère le mettre en anglais car je ne sais pas trop comment le traduire et je pense que c'est plus clair comme ça.  [...] Je pense qu'ils font d'abord une immunoprécipitation de la protéine d'intérêt puis un western blot pour séparer la forme sauvage d'une éventuelle forme tronquée. l'expression employée me fais plutôt penser que le marquage (blot) est fait en premier et l'IP ensuite.  [...]

[Biochimie] Quelques questions sur les OGM

-Si tu veux empêcher l'expression d'un gène, par exemple pour recréer chez l'animal une maladie génétique humaine, tu peux utiliser la technique du knock out. Il s'agit de supprimer le gène d'intérêt pour que la protéine(s) qu'il encode ne soit plus produite.  [...] - tu peux aussi faire d'une pierre deux coups. substituer un gène endogène avec un gène codant pour la protéine de ton choix. c'est le knock-in.  [...]