• Santé - Expression, Promoteur, Glucose

[Biologie Cellulaire] gal4

Vous avez des systèmes double hybride avec une complémentation gal4-VP16 pour trouver des protéines interagissantes entre elles. Vous avez aussi des tests en culture cellulaire avec des fusions Gal4-protX sur constructions 17m-rapporteur. Elles permettent de tester l'activité activatrice ou répressive sur la transcription.   [...] il y a aussi tout simplement toute une série de plasmide d'expression posssedant le promoteur GAL4, qui permet d'induire l'expression du gene cloné qu'en absence de glucose (en presence de galactose par expl).  [...]

Promoteur Gal

je voudrais savoir à quelle concentration faut il mettre du galactose dans un milieu de culture de levures pour induire une surexpression d'un gène sous promoteur GAL.  [...] Pour induire l'expression de ton promoteur GAl il te faut aucune trace de glucose. Car ce n'est pas une induction sous gal mais une repression par le glucose.  [...]

cre lox et recombinaison homologue

Euuuh, pour moi le système Cre/Lox servait a exprimer/inhiber un gène a un instant t déterminé par l'expérimentateur.. Le gène Cre code pour une enzyme recombinante, qui est flanqué d'un promoteur inductible (Inductible par n'importe quoi, aux choix, température, concentration de glucose, expression d'un facteur particulier...).  [...] Une fois que ce promoteur est activé, l'enzyme est synthétisée et va reconnaître les sites Lox sur le génome. Le gène a réprimer a été préalablement encadré des séquences Lox et l'enzyme Cre nouvellement exprimée va exciser la partie entre les deux sites Lox.  [...]

[Biologie Cellulaire] Comment, après transgenèse à l'aide d'un adénovirus, le gène épisomal, non réplicatif est répliqu...

MAIS, dans l'article ils précisent avoir construit le transgène de telle façon que l'expression du transgène (et non pas sa présence ou son absence) sera contrôlée, entre autre, par un promoteur spécifique des cônes (je cite l'article. Serotype 2/5 recombinant adeno-associated virus (rAAV) containing a human L-opsin gene under the control of the L/M-opsin enhancer and promoter [.  [...] Je dirais que sans promoteur, et ceci est valable pour tout gène (ou presque, comme toujours en biologie), l'expression du gène, donc les niveaux d'ARN sont quasi nuls, et les niveaux protéiques en conséquence encore plus faibles. Un promoteur est indispensable à l'expression d'un gène pour avoir un effet physiologique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Modification d'hépatocytes.

Donc mon idée était de créer un vecteur IRES contenant le gène de l'insuline, une gène protéase thiol (pour cliver la pré-insuline en insuline). Mon problème est que je ne sais pas quel promoteur choisir. En effet si je choisi un promoteur fort type CMV ou SV40 comment vais-je pouvoir contrôler la quantité d'insuline produite L'idéal serait de trouver un opéron ou un promoteur glucose dépendant mais je ne sais pas du tout si ça existe.  [...] les constructions qui répondent au glucose existent (par exemple le ChoRE du promoteur de la L-PK ou le promoteur de n'importe quel gène qui répond au glucose dans l'hépatocyte, comme l'ACC, FAS, etc.).  [...]

Différence shARN, miARN et siARN

shARN = transfection stable, ils s'intègrent dans le génome de la cellule hôte (avec possibilité de le mettre sous le contrôle d'un promoteur donné pour réguler son expression).  [...] mais je ne vois pas le lien entre la pol. de l'Aquaporine et celle du sh, a moins que tu parles d'exprimer un sh sous le contrôle du promoteur de l'aquaporine Il n'y a pas de raison que ça ne soit pas possible, j'ai juste eu quelques lectures précisant que l'expression d'un sh est plus performante avec un promoteur polIII que polII (mais ça fonctionne avec un promoteur polII, comme le CMV par exemple, donc pas de raison).  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions sur clonage

2/Comment peut-on obtenir une forte expression des gènes insérés dans un vecteur de clonage est ce en insérant plusieurs fragments.  [...] 2/si vous voulez obtenir une forte expression du gène il suffit de mettre un promoteur a forte expression (pCMV (promoteur du cytomegalo virus) par exemple).  [...]

système Cre-ER(T2)

Tout n'est qu'une question de promoteur. En plus claire, le promoteur qui sera utilisé pour conduire l'expression de ta fusion Cre-ER peut etre constitutif, dans ce cas Cre-ER sera exprimé dans tous les tissus mais défloxera que si l'animal recoit l'agoniste de ER.  [...] ou bien le promoteur est tissu-spécifique et c'est là ou les choses se compliquent car en réalité il faut parler de promoteur tissu-sélectif et non plus de tissu-spécificité. En plus claire, un promoteur qui est censé entrainé l'expression du transgene dans le muscle squelettique uniquement (car c'est ce qu'il fait naturellement lorsqu'il est dans le genome à son locus), présentera des fuites transcriptionelles plus ou moins négligeable cad suivit ou non de la synthese de Cre-ER (ou de tout autre transgene).  [...]

[Biologie Cellulaire] Receptor Binding Domain dans une experience de signalisation cellulaire

Une des expériences de l'article, visant à demontrer que l'expression de FT est induite directement depuis les feuilles, est basée sur l'utilisation du Receptor Binding Domain du glucocorticoide du rat... j'avoue avoir du mal à comprendre exactement comment cela fonctionne.  [...] En fait c'est simple quand on connait le truc, ils ont utilisé pour exprimer leur gène un promoteur inductible et non un promoteur constitutif (genre 35 S). Le promoteur est inductible à la dexaméthazone (DEX. corticoïde), donc pour induire l'expression de ton gène il faut activer le promoteur par du DEX.  [...]

[biologie moléculaire] opéron lactose

l'expression des trois genes de l'operon lacZ, lacY et lacA s'effectue par une fuite du promoteur qui assure un niveau d'expression de base.  [...] transformation de bactéries lac- avec un plasmide codant pour le promoteur de l'operon lactose couplé au gène lacz ou CAT et vous regardez le niveau d'expression basal du gène par spéctrométrie après révélation de la présence de l'enzyme que vous aurez choisi (pour le lacz j'utilise le x-gal, pour CAT j'utilise plutôt un test elisa).  [...]