• Santé - Expression, Localisation, Protéine

[Biologie Cellulaire] extraction protéique (ERK1/2) à partir de cellules U2OS

Merci c'est très gentil et ta réponse était rapide, effectivement j'ai utilisé une résine talon mais j'ai pas pu avoir cette protéine en blot sachant que je l'ai pas encore eluer.  [...] quelles cellules, quelle protéine (localisation, type, expression..).  [...]

[Biologie Cellulaire] Transfection stable et fonctionnalité proteique

Niveau expression et localisation de la proteine pas de problème (verif faite en imagerie et biotinylation de surface).  [...] Je ne pense pas que ceci proviennent de clones multiples car si j'isole quelques clones et verifie l'expression celle ci ne change pas. J'ai essayé de diminuer l'AB et ça ne change rien.  [...]

Les mécanismes d'expression des gènes | Dossier

La traduction est un point de régulation important de l'expression des gènes (1). Il a été montré que ces régulations pouvaient se dérouler au niveau de l'initiation de la traduction, de l'élongation (2, 3), mais aussi au niveau de la terminaison et ceci aussi bien chez les eucaryotes que les procaryotes (4, 5).  [...] modifier la stabilité de la protéine, modifier son activité, ou la localisation de la protéine dans la cellule. Il est aussi possible que cette extension possède une nouvelle activité enzymatique. Ce dernier cas est fréquemment retrouvé dans l'expression de gènes viraux qui utilisent un mécanisme de translecture pour exprimer deux protéines à partir du même ARNm.  [...]

Généralités sur la protéine Kinase C | Dossier

Il est à noter que la régulation de ces différentes kinases montre également peu de variations. Les régulations possibles sont au nombre de cinq. la première est faite par ajout d'un domaine ou d'une sous-unité en réponse à un second messager (AMP cyclique se liant au domaine régulateur de la protéine kinase AMP cyclique dépendante PKA), la deuxième peut être une liaison à une sous unité dont le niveau d' expression varie avec l'état physiologique de la cellule (régulation des protéines kinases cycline-dépendante par la cycline ), la troisième se fait par reconnaissance d'un domaine en fonction de la localisation subcellulaire de l'enzyme (liaison des domaines SH2  [...] la quatrième se fait par addition d'un domaine qui inhibe l'activité enzymatique par un processus de rétrocontrôle (cas de la kinase à chaîne légère de myosine), la dernière méthode de régulation se fait par phosphorylation ou déphosphorylation de résidus d'acides aminés localisés sur des segments particuliers de la kinase (cas de la kinase calmoduline dépendante II) (Johnson L.N. et al., 1996).  [...] Ces isoformes sont différenciées par leur expression tissulaire, leur localisation et les facteurs capables de les activer (fig. 1). Toutefois, il est à remarquer que les mécanismes d'activation semblent similaires pour l'ensemble des isoenzymes malgré des activateurs différents.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéine Iba-1: localisation intracellulaire ou membranaire chez la microglie?

Depuis un moment maintenant, je me pose la question de la localisation de cette protéine Iba1 (ionized calcium binding adaptor molecule 1) au niveau des cellules microgliales. Connu pour être l'un des marqueurs spécifiques de ces cellules et des macrophages, j'aimerai vraiment savoir dans quel compartiment elle se trouve.  [...] En dehors de la localisation de son gène, je n'ai pu trouver aucune information concernant la protéine. Je n'ai également rien trouvé sur des publications.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène Rapporteur

Je ne comprends pas aussi comment la localisation de la protéine peut elle débuter dans une cellule et se propager à l'organisme entier, c'est à dire que si on injecte le transgène dans une cellule donnée de l'embryon,comment va t il alors se retrouver dans une partie de ce dernier (serait ce due à la mitose asymétrique).  [...] si je comprends bien, si l'on veut connaitre la localisation de la protéine d'intérêt avec une séquence régulatrice(recombinaison homologue), il faut forcément que le transgène possède une séquence d 'ADN de localisation (ex.NLS qui soit identique à la séquence d'ADN de localisation de la protéine d'intérêt) et le gène rapporteur.  [...]

Code génétique : nous ne connaissons pas toutes les lettres...

Depuis quelque temps, il est admis que l'expression des gènes est également contrôlée par des modifications de l'ARN. Ainsi, la méthylation d'une adénosine en position 6 (m6A) affecte la localisation, la stabilité, la traduction et l' épissage des ARNm. Cette modification spécifique de certaines régions de l'ARNm peut être lue par certaines protéines.  [...] La modification m1A a été localisée à une position proche du début de la traduction (près du codon start ), liée à une augmentation de la synthèse protéique. Présente chez les eucaryotes, des levures aux mammifères, cette modification aurait une proportion de l'ordre de 20 % chez les humains.  [...]

[Biologie Moléculaire] Turn over protéique

Pas forcément. C'est souvent l'expression différentielle ou la localisation de l'E3 ligase qui permet de réguler la stabilité du substrat (pour les protéines dégradées après ubiquitination).  [...] Et surtout, si c'était possible, parce qu'au moment de présenter notre article, quand sera venu le temps de la discussion, on va essayé d'emmettre des hypothèses sur le phénomène de dégradation protéasome dépendante, ubiquitine indépendante, et donc on se refèrera à l'article sur la pupylation, mais j'aurais aimé pouvoir encore compléter en expliquant une expérience pour mettre en évidence une protéine ubiquitine like intervenant dans la dégradation.  [...]

[Biochimie] Etude des partenaires protéiques : Co-Immunoprécipitation, Tap-Tag et double hybride

La protéine dont je devrait étudier les partenaires provient d'un procaryote et possède un signal peptide de localisation périplasmique. Je dois donc faire une protéine recombinante du côté C-Terminal, puisque la séquence sera clivée. Cela est-il possible.  [...] Pour le double hybride, est-il possible de l'effectuer avec une protéine possédant un signal peptide de localisation périplasmique Celui-ci ne sera pas coupé.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage par Ac-FITC : du solide ?

Après la période d'incubation, j'aurais ajouté un anticorps anti-[protéine récherchée]. puis un second anticorps marqué au FITC et dirigé contre l'anticorps du complexe précédent.  [...] je ne pense pas que tu aies le choix. Quelle est la localisation cellulaire de ta protéine En immuno généralement on fixe les cellules puis on les perméabilise pour donner accès aux anticorps. Autre chose. ce type d'approche n'est que peu quantitatif.  [...]