• Santé - Expression, Enzymes, Phase

[Biochimie] nouvelle sur le forum et besoin de vs pour du clonage, help

J'imagine que vous êtes bien conscient(e) que l'intérêt de ce plasmide est de faire de l'expression dans des cellules eucaryotes.  [...] Sinon, oui c'est possible mais ce sera un peu plus compliqué. Ce qui change c'est que vous n'êtes plus en AT ou GC cloning ce qui signifie qu'il va vous falloir faire des digestions de restriction (bon choix des enzymes, quelques tests et purifs en plus) et surtout tenir compte de la phase (si vous souhaitez réellement faire de l'expression).  [...]

[Biologie Moléculaire] Facteurs de transcription

1) Je ne comprends pas comment un facteur de transcription peut activer l'expression d'un gène de manière spécifique. Par exemple le facteur E2F n'active que l'expression de gènes codant pour les enzymes de la phase S et pas celui du gène (ou des gènes, bref) codant pour la myosine.  [...] 2) Les facteurs généraux de transcription (les TFIIX) si j'ai bien compris sont toujours présents lors de l'initiation de la transcription de n'importe quel gène alors que les facteurs de transcription spécifiques n'agissent que sur les gènes dont ils sont spécifiques (par exemple E2F sur les gènes codant les enzymes de la phase S), est-ce bien ça.  [...]

[Biologie Moléculaire] Site de restriction

Je vais cloner un gène dans un vecteur (pET21a et pGEX 4-T-2) et je vais ajouter des sites de restrictions dans mes primers avant de lancer la PCR. Quels procédures peut-on suivre pour faire introduire des sites de restrictions dans les séquences de nos oligonucléotides dans le but d'une expression dans Ecoli par exemple le sens de lecture du vecteur/lecture en phase, présence de ces enzymes dans polylinker, enzymes ne coupent notre gène.  [...] j'ai trouvé deux enzymes (BamHI et SalI) qui sont présents dans le polylinker de mes deux vecteurs d'expression et qui ne coupent pas mon gènes comment je peux introduire ces deux site dans mes amorces pourque je puisse transférer après mon gène c'est à dire BamHI position 5' ou 3' de mes amorces et comment vérifier que mes amorces sont en phase.  [...]

Facteur sigma

L'ARN polymérase procaryote est composée d'une enzyme-cSur (E) et d'une sous-unité sigma. Chez Escherichia coli, il existe 7 facteurs sigma qui permettent la reconnaissance spécifique d'une classe de promoteurs. Le facteur sigma70, protéine indispensable, contrôle l'expression de la majorité des gènes au cours de la phase de croissance.  [...] L'entrée en phase stationnaire ainsi que certaines conditions de stress permettent l'induction du facteur sigmaS qui contrôle alors l'expression de nombreux gènes impliqués dans des fonctions comme la résistance aux stress, la réparation de l'ADN ou la virulence.  [...]

[Microbiologie] phages à ADN et ARN

Une fois l'ADN dans la bactérie il se réplique de nombreuses fois. En même temps il y a une transcription en ARNm viral, qui à son tour utilise les ribosomes de la bactérie pour fabriquer des protéines de la capside et des enzymes, c'est la phase éclipse.  [...] Les phages à ARN ont uniquement une capside cubique. Ces phages ne peuvent contaminer que des bactéries ayant un pillus sexuel, car elles s'attachent dessus et envoient leur ARN dans la bactérie. La phase d'éclipse commence (environs 15'). Donc expression de l'ARN, production de protéines de structure et d'assemblage et une enzyme (réplicase).  [...]

[Biologie Cellulaire] Séquence nucléotidique des protéines.

On raboute suggère plutôt que l'on est en train de parler de clonage. Il s'agirait donc de l'ADNc que l'on insert dans un vecteur (vecteur d'expression) en phase avec la séquence codante pour une enzyme (betagalactosidase, lucide case, chloramphénicol acétyle transférase, etc).  [...] L'idée peut être ici de suivre l'expression protéique de la protéine d'intérêt en suivant l'activité de l'enzyme rapportrice.  [...]

Photosynthèse

Je commencerai par dire que l'expression phase claire n'est plus admise (de même que phase sombre ). On parle maintenant de phase photochimique et de phase non-photochimique.  [...] Les complexe PSII et PS I sont situés sur la membrane du thylacoïde et cette membrane est simple, donc pas d'interne-externe.   [...]

[Biologie Cellulaire] enzyme phase 1 et 2

J'ai lu dans quelques publications des références à des enzymes phase 1 et phase 2.  [...]

Les légumes surgelés

Etant donné que le blanchiment est utilisé pour dénaturer les enzymes présentes naturellement dans le légume (et éviter des changements de goût, couleur ou texture durant la congélation), d'autres substances intéressantes peuvent être perdues comme le sulforaphane du brocoli (libérée par l'enzyme myrosinase lorsqu'on croque ou qu'on coupe du chou) qui augmente fortement l'activité des enzymes de phase 2 anti-cancer.  [...] d'autres substances intéressantes peuvent être perdues comme le sulforaphane du brocoli (libérée par l'enzyme myrosinase lorsqu'on croque ou qu'on coupe du chou) qui augmente fortement l'activité des enzymes de phase 2 anti-cancer.  [...]

Inhibiteur et inducteur enzymatique (pharmacologie)

D'après ce que j'ai compris c'est quand un médicament A issus du métabolisme et prit simultanément avec un médicament B et ce médicament B va augmenter la synthèse des enzymes par exemple le CYP3A4 du coup la réaction va être rapide et alors on aura un risque de moindre efficacité thérapeutique.  [...] Autre exemple, le paracétamol est métabolisé majoritairement par glucuronoconjugaison(60%) et sulfoconjugaison(30%)(donc des enzymes de phase II) et de manière minoritaire par les enzymes de phase I. CYP 2E1, CYP 1A2 et CYP 3A4. Mais la métabolisation par CYP 3A4 est négligeable donc un inhibiteur de CYP 3A4 ne causera pas d'interaction médicamenteuse significative avec le paracétamol.  [...]