• Santé - Expression, Bactéries, Cellules

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

Je cherche actuellement à extraire les ARN totaux de cellules de bactéries lactiques dans le but de faire de la RT-PCR quantitative (mesure de l'expression d'un gène dans différentes conditions).  [...] On utilise ca pour extraire les ARN totaux de cerveaux de souris et de nos cultures cellulaires (=. et donc pourquoi pas bactéries..).  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de detection de ma protéine par immunofluorescence

voila j'ai transfecté mes cellules (HepaRG) avec un plasmide pcDNA3.1 Directional TOPO (Invitrogen) contenant mon insert d'intérêt (la protéase NS3 du virus de l'hépatite C). Ce plasmide contient aussi une tag V5, qui me permet (normalement ^^) de detecter ma protéine une fois exprimée dans mes cellules (grace à un anticorps anti-V5, Invitrogen).  [...] J'ai une question un peu bête mais as-tu vérifié que ta protéine de fusion NS3-V5 est bien exprimée dans tes cellules après transfection avec un simple SDS-PAGE Je n'ai jamais fait d'expression en cellules eucaryotes mais je suppose que c'est un peu comme pour les bactéries.  [...]

Des prisons à bactéries pour mieux comprendre les infections

Dans cette animation, on peut observer en accéléré des bactéries qui se multiplient dans une cage microscopique. En fonction de sa taille, les chercheurs peuvent connaître assez précisément le nombre de cellules présentes à la fin de l'expérience. Il est ensuite possible de récupérer ces bactéries et d'étudier l'expression des gènes dans différentes conditions. Connell et al, Pnas.  [...] Il est par exemple possible d'arrêter la croissance des bactéries à n'importe quel moment et de mesurer leur expression génétique.  [...]

Faire suivre une promoteur eucaryote et procaryote

Dans la construction du plasmide il est précédé du promoteur du CaMV 35S. Cependant pour réaliser la selection des bactéries transformé puis des cellules végétales transformé, on a besoin de l'expression de NPTII à la fois dans les bactéries et les cellules eucaryotes.  [...] Ma question est donc a-t'on pu laisser le promoteur procaryote initiale de NPTII, précédé du promoteur eucaryote 35S pour avoir une expression dans les deux situation, cela fonctionnerai t'il d'avoir deux promoteur qui se suivent Où a t'on simplement fait deux copies du gène NPTII, un avec son promoteur initiale l'autre avec le 35S.  [...]

Des bactéries bioluminescentes pour voir in situ les tumeurs en 3D

Chez des souris, d es chercheurs ont réussi à visualiser in situ des tumeurs en 3 dimensions en utilisant des bactéries bioluminescentes ciblant les cellules cancéreuses. Une première qui pourrait aboutir sur des applications aussi bien dans l'imagerie médicale que dans le domaine thérapeutique.  [...] L'imagerie 3D à base de bactéries bioluminescentes pourrait être utilisée pour détecter des cancers à des stades précoces et fournir des informations sur la taille et la croissance de la tumeur. Mais la recherche va un peu plus loin en démontrant l'expression du gène Lux, confirmant l'intérêt d'introduire dans les cellules tumorales des fragments d' ADN capables de détruire les tumeurs.  [...]

Le plus gros virus marin jamais découvert

La partie centrale du génome, selon les estimations des chercheurs de l' université du Nebraska, code pour 544 protéines. Des séquences régulatrices repérées sur l'ADN laissent penser que l'expression des protéines est très complexe car temporelle et adaptée au stade d'infection (précoce, tardif) de l' hôte.  [...] En effet les virus sont, par définition, des parasites obligatoires de cellules, souvent considérés comme étant à la limite du vivant. Le fait de posséder une partie de la machinerie requise pour l'expression des gènes place donc ces virus un peu plus près des bactéries et du monde vivant en général.  [...]

En bref : le stratagème de la légionelle pour infecter les cellules

Une équipe de recherche du CNRS vient de mettre au jour un mécanisme inédit qui permet à l'agent de la légionellose de modifier l'expression des gènes des cellules hôtes afin de faciliter son propre développement. Ces recherches sont publiées dans la revue Cell Host & Microbe.  [...] Cette manipulation génétique de l'hôte pourrait aider Legionella à échapper au système immunitaire et à persister dans l'organisme. Ces travaux apportent de précieuses informations sur la régulation de l'expression des gènes, ainsi qu'un éclairage important sur les tactiques employées par les bactéries pour manipuler les cellules hôtes.  [...]

Du sang obtenu à partir de cellules de peau

L'expression conjointe de certains gènes et de milieux de culture appropriés leur permet de redevenir immature, puis de gagner une nouvelle spécialisation. L'utilisation de cette méthode crée beaucoup moins de problèmes bioéthiques mais les résultats obtenus sont moins bons qu'avec les cellules souches embryonnaires.  [...] La protéine correspondante OCT4 est un facteur de transcription connu pour être exprimé précocement dans les cellules embryonnaires. Suivant son niveau d'expression, il permet d'établir et de conserver une pluripotence, ce qui fait de lui un des acteurs majeurs dans la création de cellules souches pluripotentes induites.  [...]

[Biotechnologie] Une application biotechnologique de la transgénèse

Dans un premier temps, des chercheurs ont réussi à extraire de cellules humaines le gène de l'hormone de croissance puis à l'intégrer dans l'ADN des bactéries de l'espèce Escheridia coli. La production industrielle d'hormone humaine se fait alors dans de grandes cuves où l'on cultive ces bactéries génétiquement modifiées.  [...] 3-tu doit integrer ta construction dans la bacterie amplification de l'expression du gene puis selectionner les cellules qui on reçues la construction.  [...]

Vers un nouvel antibiotique qui pousse les bactéries au suicide ?

Ils se sont intéressés à un mécanisme particulier de suicide bactérien, induit en conditions de stress, un peu comme le font les cellules humaines par apoptose pour protéger le reste de l'organisme d'un possible cancer. Ce mécanisme, observé chez la majorité des bactéries, est régulé par un système toxine-antitoxine.  [...] Les chercheurs ont remarqué que l'induction de l'expression d'une protéine PezT légèrement mutée (tronquée des onze derniers acides aminés ), de façon à la rendre moins toxique, induit un défaut de division cellulaire menant au bout d'une heure à une mort massive des bactéries.  [...]