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[Biologie Moléculaire] Immunoprécipitation

Pour voir si l'étape d'incubation avec les billes de protéine A-Sépharose est efficace, après avoir incuber vos extraits et centrifuger, vous pouvez réaliser un WB sur les billes comme vous le faites actuellement, et en plus un WB sur le surnageant. Le WB sur le surnageant sera donc représentatif des protéines qui ne se sont pas liées aux billes.  [...] La protéine d'intérêt est-elle taggée L'anticorps utilisé pour l'IP est -il dirigé contre une étiquette Avez-vous essayé un WB sur le culot de billes après IP en procédant à une étape de dénaturation pour être sûr de dissocier la protéine des billes (parfois des anticorps se lie très fortement, dans ce cas il faut peut-être changer d'anticorps pour rester dans des conditions natives, ou alors tester avec des concentrations salines plus importantes).  [...]

Définition | Prime-boost - Vaccination prime-boost - Amorce-rappel | Futura Santé

Une des étapes est appelée ADN. elle consiste à injecter un fragment d' ADN, qui comporte un gène codant pour une protéine antigénique. L'organisme est capable de traduire l'ADN en antigène, et de fabriquer des anticorps correspondants.  [...] Une autre étape est appelée protéine. cette fois-ci, c'est l'antigène directement sous la forme de protéine qui est administré.  [...]

Cancer : un vaccin efficace pour les souris testé chez l'Homme dès 2013

La protéine antigénique MUC1, retrouvée dans trois-quarts des cancers mortels, est la cible d'un vaccin qui a réduit le volume des tumeurs de 80 % chez des souris. Prochaine étape. vérifier son efficacité chez l'Homme avec les premiers essais prévus en 2013.  [...] La piste n'est pas nouvelle mais révèle son efficacité. La protéine MUC1 appartient à la famille des mucines, retrouvées principalement dans les mucus (des sécrétions visqueuses comme les glaires ou la morve). Elle contribue à protéger et assurer le bon fonctionnement des épithéliums muqueux.  [...]

[Biotechnologie] purification d'une protéine

Je ne suis pas du tout experte en purification de protéines mais en lisant les différentes étapes de la manip je me dis qu'en insérant la séquence codante pour la ligase dans E. coli, ils ont peut être en même temps créé une protéine de fusion avec une étiquette (par exemple GST ou Tag) et ont pu ensuite purifier cette protéine de fusion sur une colonne d'affinité.  [...] Il semble que l'on a fait une étape ou l'on obtient la protéine un peu plus purifié de l'extrait cellulaire (la comparaison des deux nous donne quelques bandes en moins ) et dans le puit 4 une protéine purifié de façon plus nette (il ne reste que la bande de la protéine).  [...]

Interaction entrée viral protéine cellulaire

Quitte a synthetiser une proteine recombinante autant faire un pull-down avec une fusion GST-proteine X. Si tu utilises une etape anticorps, ne pas oublier de cross-linker l'anticorps avant l'IP... Un autre detail, identifier des proteines membranaires par mass spec n'est pas une partie de plaisir.  [...] .. des techniques specifiques sont requises puisque les proteines membranaires ont une facheuse tendance a ne pas se solubiliser facilement et a avoir un caractere hydrophobe. Enfin, l'etape 2D n'est pas forcement indispensable, tout depend de la technique de detection derriere.  [...]

Précipitation protéines au sulfate d'ammonium

Ma protéine a été exprimée chez S. cerevisiae. Les cellules vont être lysées mécaniquement. Puis une première étape de précipitation va être réalisée à l'aide du sulfate de protamine (stock à 3% w/v pour être à 0,07% final) pour je suppose éliminer les acides nucléiques,  [...] .. Après une étape de centrifugation, ma protéine va être précipité entre 35 et 45 % de sulfate d'ammonium (100%) puis on réalise une nouvelle étape de centrifugation et le culot est resolubilisé.  [...]

[Génétique] Production ARN polymérase et retour dans le noyau

Pour synthétiser une protéine la première étape est la transcription qui a besoin d'un protéine (ARN polymérase) pour s'effectuer.  [...] salut à tous, je me posais justement une question qui concerne l'entrée des ADN viraux dans le noyaux. Etant donné qu'il faut une protéine (qui fait office de mot de passe) pour franchir le port du noyaux pour les grosses molécules comme l'ADN ou ARN polymérase.  [...]

[Biochimie] Acide Aminé

En fait je suppose qu'ils recherchent l'épitope d'une protéine reconnu par ton IgE. Donc ils synthétisent des peptides de 10 acides aminés ici (c'est bien ça ) qui recouvrent toute la séquence de ta protéine (ou plutôt ici une région de ta protéine vu que ça semble être une étape d'affinage non ).  [...] C'est juste une technique de synthèse de tes peptides en phase solide. C'est à dire qu'ils sont synthétisés acide aminé par acide aminé avec des cycles de protection/déprotection directement sur une membrane de cellulose. Et tout ça est automatisé comme tu peux le voir ici, ce qui permet de tester plein de peptides en même temps.  [...]

[Biotechnologie] Ogm absorption

Comme vous le savez surement l'environnement cellulaire est indispensable à la production d'une protéine intègre. Prenez l'exemple du protocole de purification d'une protéine. La première étape est de cloner ce gène dans une souche type bactérie, levure ou cellule d'insecte.  [...] Bien souvent on observe de gros soucis d'expression type formation d'agrégat de protéine (ici on peut imaginer qu'étant dans des conditions de surexpression l'effet est exacerbé) Ou encore il impossible de former des ponts dissulfure dans le cytosol d'une souche de coli.  [...]

les proteines

est ce que quelqu un peut m expliquer clairement les etape de la digestion d une proteine merci beaucoup.  [...] les protéines (polymères d'acides aminés) sont digérées par des endopeptidases, qui coupent les liaisons peptidiques entre certains acides aminés dans la chaîne polypeptidique (la pepsine, une enzyme gastrique, la trypsine et la chymotrypsine, enzymes pancréatiques qui se déversent dans l'intestin grêle), par des exopeptidases, qui ôtent les acides aminés aux extrémités des polypeptides (amino- et carboxypeptidases), et par des dipeptidases (enzymes de la bordure en brosse) qui scindent les dipeptides.  [...]