• Santé - Enzymes, Restrictions, Séquences

[biologie moleculaire] Cartographie du genome

dans la catographie physique du genome humain je ne comprend pas comment les clones s ordonnent le long du chromosome et comment peut on grace a cela connaitre la sequence exacte est ce qu on doit faire un sequencage avant c pas clair dutout merci pour votre aide.  [...] Pour realiser une cartographie physique on sequence les différents clones, ces clones possèdent des fragments du chromosome a cartographier et ses fragments sont chevauchant (car digestion partielle par des enzymes de restrictions) donc les sequences des différents fragment sont ensuite alignées par ordinateur grace aux sequences chevauchante.  [...]

[Biologie Moléculaire] Site de restriction

Je vais cloner un gène dans un vecteur (pET21a et pGEX 4-T-2) et je vais ajouter des sites de restrictions dans mes primers avant de lancer la PCR. Quels procédures peut-on suivre pour faire introduire des sites de restrictions dans les séquences de nos oligonucléotides dans le but d'une expression dans Ecoli par exemple le sens de lecture du vecteur/lecture en phase, présence de ces enzymes dans polylinker, enzymes ne coupent notre gène.  [...] Ce n'est pas bien compliqué dans le principe, il s'agit simplement de designer, disons les 20 premières bases de votre séquence et de coller un site de restriction devant. Comme les enzymes de restrictions sont des endonucléases, il faudra aussi bien penser à mettre 6 bases en amont.  [...]

[Génétique] Question qui me tracasse beaucoup ( information génétique )

L'ADN recombinant le but est de prendre un gène (ou une version-. allèle) et de le multiplier afin de pouvoir dans un second temps travailler dessus (séquencage par exemple). Donc à l'aide d'enzymes de restrictions qui reconnaisses certains sites (suite de nucléotides) on va couper le plasmide afin d'insérer notre gène.  [...] Il faudra bien choisir les enzymes de restrictions selon le plasmide mais également leurs séquences (par rapport à notre gène) car on va l'insérer grâce à la complémentarité des bases.  [...]

Sequences répétées

Les séquences palindromiques existent chez les procaryotes et eucaryotes, je ne peux pas trop t'avancer sur leurs rôles, je pense que c'est des séquences qui sont reconnues par des enzymes de réstrictions par contre pour moi SSR ce sont des produits synthétisés qui ont pour nom les initiales d'un labo, donc peux tu developper ta question s'il te plait.  [...] des SSRs sont des Simple Sequence Repeats, ou microsatellites, elles sont utilisées comme marqueurs génétiques d'identification d'individus, dans l'étude du polymorphisme.  [...]

[Biotechnologie] An efficient TALEN mutagenesis system in rice

Je suppose que les séquences ciblées par les enzymes de restrictions participent du transgènes, auquel cas on digère la séquence ADN et on regarde ce que ça donne par PCR pour détecter les inserts.  [...] Oui, carrément Surtout que la séquence insert est ici connue pour ne pas être sensible aux enzymes de restriction, donc à la digestion elle apparaîtra clairement.  [...]

Enzymes de restriction

Bonsoir, lorsque l'on veut étudier les ARN ribosomaux, ou d'autres séquences, pourquoi utilise t-on plusieurs enzymes de restrictions Je sais que chaque enzyme a un site de restriction spécifique mais je n'arrive pas à comprendre l'utilité de cette technique.  [...] J'ai effectué des recherches sur internet mais je ne vois ce que l'on veut nous faire dire... En espérant que ce soit plus clair pour vous, car pour moi, c'est toujours le flou complet.   [...]

biologie moléculaire - enzymes de restrictions

est ce que les enzymes de restrictions de type 2 ne reconnaissent que les séquences génique prodromiques.  [...] Que Non. Certaines de type 2 reconnaissent des sites asymétriques, et sont classées dans des sous famille (type IIS et IIT par exemple). Cependant, à part ses sous familles, les enzymes de types 2 reconnaissent des sites palyndromiques (même si elles peuvent couper parfois loin de leur site de reconnaissance).  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Faire une électrophorèse seule ne permet pas de différencier un ADN A d'un ADN B (même si c'est l'ADN humain et l'ADN d'une fougère...). il faut soit digérer l'ADN à l'aide d'enzyme de restriction (comme l'a dit noir-ecaille), soit utilisé la PCR pour amplifier certaine séquence (comme l'a dit TanguyE).  [...] Pour les enzymes de restrictions, on sait qu'elles sont les séquences qu'elles reconnaissent. Pas forcément celle qu'elle coupe. Il y a une petite nuance, mais qui existe, certaine enzyme de restriction étant capable de couper l'ADN à plusieurs dizaines paires de bases de leur lieu de reconnaissance.  [...]

[Biotechnologie] Que veut dire ... ?

Seulement j'ai un peu de mal à comprendre une chose, comment des amorces peuvent digérer le produit de la PCR Puisqu'on intègre les séquences de AgeI et NcoI (et pas les enzymes elles-mêmes).  [...] grace a ces séquences de restriction, et sous l'actions d'enzymes de restrictions ou de ligases, tu pourras intégrer la sequence que tu as amplifié, à l'interieur d'un vecteur, ou au contraire l'en extraire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

Les sites de restrictions sont en fait des séquences consensus dites palindromiques qui sont donc identiques dans le sens 3'-5' et 5'-3'. Ces séquences soont reconnues par des enzymes particulières très souvent d'origine bactériennes (EcoR1, EcoR5, BamH1...).  [...] 1. identifier votre fragment (si l'organisme a déjà été séquencé, voir la carte de restriction et repérer les sites de restrictions absents du fragment).  [...]