• Santé - Enzymes, Restriction, Séquences

digestion enzymatique

Il existe des enzymes qui peuvent, de la même façon que les endonucléases (enzymes de restriction) le font sur les acides nucléiques, couper des séquences AA en des positions spécifiques qui dépendent de certaines propriétés d'une séquence en un endroit précis (pI, certains AA précis, etc.).  [...] Il faudrait que tu trouves la séquence de ta protéine, repère les endroits ou il faut couper et vérifie si certaines de ces enzymes (ou d'autres) sont susceptibles de cliver là ou tu en aurais besoin.  [...]

[Biologie Moléculaire] stratégie de clonage.

Je ne comprends pas trop comment choisir les amorces sens et anti sens,trouver la phase ouverte de lecture et les enzymes de restriction.  [...] il me semble que les enzymes de restriction reconnaissent les séquences palindromiques (ex. AAATTT).  [...]

[Biologie Moléculaire] marqueurs moléculaires

Alors évidemment dans la pratique on se sert d'enzymes de restriction pour utiliser ces outils mais à la base il s'agit de séquences génomiques.  [...] Je ne parlais pas des enzymes de restriction mais des marqueurs biochimiques en tant que tel. On dose par exemple le taux de certaines enzymes ou d'autres molécules qui sont associées à telle ou telle maladie.  [...]

[Microbiologie] Hybridation

Le site de reconnaissance est super long (je trouve que 27-28 nucléotides de détection, non dégénéré, c'est long - à comparer avec les 6-10 normalement), ce qui signifie une fréquence de coupe de l'ADN faible (donc de plus gros fragments).   [...] Homing endonucleases do not have stringently-defined recognition sequences in the way that restriction enzymes do. That is, single base changes do not abolish cleavage but reduce its efficiency to variable extents. The precise boundary of required bases is generally not known.  [...]

[Biologie Moléculaire] Connaitre séquence génomique....

digestion de restriction avec plusieurs enzymes dont les séquences ne reviennent pas trop souvent (digestions simples et doubles histoire d'avoir les fragments avec plusieurs origines et fins différentes.). Tu as une idée de la complexité du génome (tu peux faire des essais pour voir la taille moyenne des fragments que tu rammènes). Tu fais une banque avec tout cela.  [...] Cette solution est elle faisable Sur le papier elle est très attirant en effet, mais la ligase n'a t elle pas trop beaucoup de boulot Si quelqu'un a fait cela avec succès je veux bien qu'il se manifeste... Pour augmenter les chances de succés, il faudrait mieux le faire avec une plusieurs enzymes de restrictions.. Merci yoyo.  [...]

[Génétique] adn et police scientifique TPE help svp !

1) dans une PCR, on utilise des amorces ADN spécifique qui doivent délimiter les séquences du gènes (se placer à sa bordure). les TAQ polymérases copient l'ADN en partant de cette amorce, ce qui lui permet donc de copier que le gène qui a été délimité et non pas l'ADN en entier.  [...] 3) les enzymes de restriction ne sont pas spécifiques aux gènes mais à des séquences, si la séquence se trouve dans un intron, elle va couper quand même.  [...]

HOMME ARAIGNÉE POSSIBLE??!! Débats

Il faut déjà identifié le gène qui permet à l'araignée de produire de la soie puis l'isolé grâce a des enzymes de restrictions ( qu'il faut trouvé ) mais encore pire il faut déjà trouvé des séquences de reconnaissance ou spécifique qu'on appel palindrome pour que l'enzyme de restriction identifie le gène a clivé, au niveau de l'Homme on connait pas mal d'enzyme de restriction de type endonucléase de type 2 donc ça pourrait aller mais pour l'arraigner je pense pas.  [...] Azaar. tout est mélangé, c'est un peu le bazar dans cette réponse qui ne fait pas avancer le débat. Les enzymes de restriction c'est loin d'être un problème ici.  [...]

Enzyme de restriction

Les enzymes de restriction Bam HI et Pst I clivent respectivement les séquences suivantes. 5' G-GATCC 3' et 5' CTGCA-G 3' (- indique le lieu de coupure).  [...] Tu as oublié l'autre partie du site de restriction. De plus, La polymérase va remplir le site pas dégrader les nucleotides simple brin.  [...]

[Biologie Moléculaire] Selection de bactéries par Antibiotiques lors du clonage d'ADN

*Bref, le contexte est le suivant. on veut cloner un gène de l'ADN humain, pour ceci on utilise les plasmides des bactéries d'E.Coli qui contiennent entre autres des gènes de résistance à la tetracycline et l'ampicilline, grâce aux enzymes de restriction on peut incorporer le gène humain qu'on veut cloner dans le plasmide à un emplacement entre les séquences du gène qui code pour la résistance à la tetracycline.  [...] Reste à repérer les clones en question sur la première boîte et à les amplifier, avant de vérifier qu'on a bien le gène d'intérêt dans le plasmide (par un coup de séquence par exemple...).  [...]

Enzymes de restriction

Parce que l'ADN de la bactérie est méthylée au niveau de certaines séquences bien spécifiques (plus particulièrement sur les adénines et les cytosines), ce qui permet aux enzymes de restriction de reconnaître l'ADN bactérien et donc de ne pas le couper.  [...] j'ai bien suivis votre discussion et comme vous avez l'air d'en savoir plus que moi est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer quelle est la différence entre des enzymes de restriction sensible à la méthylation et les enzyme de restriction qui ne le sont pas en d'autre termes pourquoi certaines enzymes ne sont pas sensibles à la méthylation.  [...]