• Santé - Enzymes, Restriction, Mutations

[Biochimie] Enzymes de restriction pour détecter les mutations

Il faut prendre en compte toute la séquence reconnue par les enzymes de restriction. à part l'enzyme 4, les autres possèdent des séquences que l'on ne retrouve pas dans le gène, ni normal ni muté.  [...] enz5. GAGCTC, il y a bien un site de restriction de l'enzyme 5 dans les 2 séquences, mais pas au niveau de la mutation, donc elle ne sert à rien ici.  [...]

[Biotechnologie] Vecteur d'expression et enzymes de restriction

On utilise des enzymes de restrictions pour isoler le gène d'intérêt, son promoteur, etc... et en parallèle on a recours à d'autres enzymes de restriction pour couper le vecteur.  [...] De manière général tout est inclut dans le vecteur. promoteur, terminateur, eventuels tag et MCS (sites de restriction) Il ne reste qu'à cloner l'ORF du gène qui vous interesse. Que vous aurez extrait avec des enzymes de restrictions et en parallèles vous ouvrirez le vecteur à l'aide des mêmes enzymes de restriction au niveau du MCS afin de générer des extrémitée compatible.  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

* Dans l'analyse par électrophorèse, tu vois des choses différentes en fonction de la conformation de ton ADN. Ainsi, dans le cas simple où on utilise de l'ADN linéaire (ton plasmide en morceaux après la digestion par les enzymes de restriction), plus c'est bas, plus c'est petit.  [...] est ce que les enzymes de restriction vont decouper les plasmides de HRPN, PGAG, etc... de la meme facon Mais je ne pense pas en fait avec ce que vous m'avez expliqué avant, ca depend de la carte de restriction.Elles sont trouvables sur internet ces fameuses cartes Il parait qu'on connait parfaitement E.coli aujourd'hui.  [...]

Enzymes de restriction

non les enzymes de restrictions coupent l'ADN bactérien, sauf celui de la bactérie qui synthetise naturellement l'enzyme. Cette bactérie peut etre protégée de la digestion soit par méthylation (mais ca ne permet pas de tout expliquer car bcp d'enzymes ne sont pas sensibles a la methylation), soit tout simplement parceque le site n'existe pas dans le génome.  [...] ça grâce à l'activité des enzymes de modifications qui fait la méthylation au nivaux de ces sites de restriction c'est une mécanisme de protection contre l'autorestriction qu'il possèdent les microorganismes.  [...]

Gène Syncytine

Je peux cloner ce gène, l'introduire dans un vecteur ( enzymes de restriction, lygase...) + mutagenèse, j'en fait un autre témoin sans mutation, je regarde les protéines produites.  [...] Mais je vois plus l'intérêt de cloner un gène non mutée qu'on sait que s'il est mutée peut alors entrainait une surexpression et donc après en aval trop de protéines pouvant être pathogène, donc on pourra identifier selon les mutations qu'on fait les effets tu vois et identifier que c'est CETTE mutation à l'origine de la surpression.  [...]

mode action enzymes de restriction dans une cellule

Bonjour à tous, mon prof a dit en cours que certains polymorphisme se situaient dans des endroits où les enzymes de restriction coupaient. mais dans une cellule, quel est l'intêret du mode d'action d'une enzyme de restriction.  [...] c'est un moyen de défense pour les bactéries. les enzymes de restriction permettent de dégrader de l'ADN étranger. par exemple, on peut supposer qu'E.coli n'a pas de séquence cible à EcoRI dans son génome (EcoRI est une enzyme provenant d'E coli).  [...]

[Biologie Moléculaire] Réparation mutation, structure Holliday

La cartographie à l'aide d'enzymes de restriction est basée sur des sites de restriction sans variation, tandis que la cartographie à l'aide des RFLP est basée sur la variation des sites de restriction entre des chromosomes homologues.  [...] La plupart des cartes de restrictions sont de petite taille (haute résolution), même si l'on peut construire des cartes de grande taille à l'aide d'enzymes de restriction dont les sites de coupure sont rares.  [...]

[Biochimie] Petite interrogation sur les enzymes de restrictions

Il y aurait à priori une différence du nombres d'enzymes de restriction utilisé dans le PCR pour multiplier l'ADN. Celui de la France serait différent de celui des Etats-Unis par exemple.  [...] Excuse moi si je n'est pas utilisé le bon terme, j'ai écris ce message un peu rapidement, c'est vrai que c'est LA PCR et, vous avez raison, il n'y a pas d'enzyme de restriction mais ce sont les enzymes polymérase dont je parlais (ou TAQ polymérase). Voilà après cette correction pouvez vous répondre à ma question précedemment posé.  [...]

[Génétique] Thérapie génique: synthétiser le gène correcteur

Et le nombre et la taille des fragments d'ADN obtenus avec une enzymes de restriction dépendent du nombre de fois où la séquence reconnue par l'enzyme est répétée au sein de la molécule d'ADN. Et donc le choix d'une enzyme de restriction dépend de la taille des fragments que l'on désire.  [...] Merci beaucoup. J'ai une autre question. Comment fait-on pour insérer le fragment d'adn obtenu par les enzymes de restriction dans le vecteur.  [...]

enzymes de restriction

bjr a tous,voila j'ai un exposé sur les enzymes de restriction un sujet dont j'ai quelques notions mais pas assez pour mon exposé.si l'un de vous peut me passer quelques liens sur le net ou les noms des ouvrages sur les quels je pourai trouvé ce que je recherche ca serait sympa.merci d'avance.  [...] quelles sont les differentes utilisations pratiques en medecine ou en science par exemple des enzymes de restriction et quelles sont les methodes qui se fondent sur ces derniers.  [...]