• Santé - Enzymes, Restriction, Cellules

Trisomie : la troisième copie du chromosome 21 réduite au silence

Leur premier défi était d'insérer un fragment aussi long (17 kb) dans des cellules issues d'un patient atteint d'une trisomie 21 et mises en culture. Après s'être fait la main sur le chromosome 19, ils ont utilisé des enzymes de restriction particulières, appelées nucléases à doigt de zinc, pour apporter Xist dans le noyau des cellules.  [...] Mais ce n'est pas tout. Car après cette réussite au niveau quantitatif, les auteurs ont voulu vérifier l'efficacité au niveau qualitatif. Leurs observations montrent que le traitement permet de corriger les profils anormaux de croissance et de différenciation cellulaires observés chez les cellules trisomiques.  [...]

[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

On pourrait même imaginer que se sont les virus eux même qui ont inventé les premiers génomes ADN. Pour quelle raison Peut etre pour se protéger des enzymes de restriction ARN-dépendante des cellules.  [...] Les virus utilise couramment des modifications chimiques de leurs acides nucléïque. Par exemple les bactériophages apparenté à T4 modifient leurs cytosines en hydroxymethylcytosine (HMC) pour se protéger des systèmes de restrictions de leurs hôtes. Beaucoup de virus Eucaryotes codent pour des fonctions de méthylation de leurs bases, toujours pour se protéger des enzymes de restriction des cellules.  [...]

amplification de l'ADN

moi, je veux savoir si, au moment de l'ajout de l'amorce, c'est possible de lier au bout de la sequence une suite de nucleotides qui auraient la meme fonction qu'une amorce...cela reviendrait a coller une suite de nucleotides a un brin d'ADN deja coupe. Etant donne que, in vivo, il existe des enzymes qui ont les proprietes de couper et coller des genes ou suites de nucleotides, je me demande si je peux les utiliser pour enchainer des bouts d'ADN.  [...] Et oui, il est également possible de faire des couper/coller de bouts d'ADN avec des enzymes de restriction. C'est comme ça qu'on fait des vecteurs pour transfecter des gènes dans des cellules. Mais c'est pas non plus de la PCR et on se sert pas d'amorces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

Y-a-t-il un moyen que je transfecte ca dans des cellules eucaryotyes Je pense que je connais la reponse mais je tente... Ou bien il me faudra sous-cloner ma sequence dans un autre plasmide genre pcDNA3 classique par exemple, n'est-ce pas (si j'arrive a connaitre les enzymes de restriction pour ce faire...).  [...] La BL21 est inactivee dans certaines proteases, mais pas toutes. E. coli a des tonnes de proteases. De memoire il y a Lon et peut etre une ou deux autres mais pas plus sinon la cellule ne serait pas viable.  [...]

mode action enzymes de restriction dans une cellule

mode action enzymes de restriction dans une cellule.  [...]

Enzymes de restriction

Pourquoi les enzymes de restriction découpent-elles n'importe quel ADN, sauf celui de la bactérie dont elle provient... qui est protégé.  [...] ça grâce à l'activité des enzymes de modifications qui fait la méthylation au nivaux de ces sites de restriction c'est une mécanisme de protection contre l'autorestriction qu'il possèdent les microorganismes.  [...]

[Biotechnologie] Vecteur d'expression et enzymes de restriction

On utilise des enzymes de restrictions pour isoler le gène d'intérêt, son promoteur, etc... et en parallèle on a recours à d'autres enzymes de restriction pour couper le vecteur.  [...] De manière général tout est inclut dans le vecteur. promoteur, terminateur, eventuels tag et MCS (sites de restriction) Il ne reste qu'à cloner l'ORF du gène qui vous interesse. Que vous aurez extrait avec des enzymes de restrictions et en parallèles vous ouvrirez le vecteur à l'aide des mêmes enzymes de restriction au niveau du MCS afin de générer des extrémitée compatible.  [...]

[Génétique] Clonage animal (question)

Pour le clonage thérapeutique, là, oui, il va falloir des enzymes de restriction et des plasmides pour sélectionner des gènes, les cloner, les introduire dans une cellule hôte, etc.  [...] Pour moi, à partir du moment où on parle de clonage (tout court) il n'y a pas d'utilisation d'enzyme de restriction. la technique de clonage, qu'il soit reproductif ou thérapeutique, est de transférer directement un noyau d'une cellule quelconque dans un ovule.  [...]

[Génétique] Réarrangements chromosomiques.

Par ailleurs, mettre la sauvegarde de la cellule via son ADN comme une priorité ne me semble pas réaliste. Car la mort cellulaire participe elle-même au fonctionnement de l'organisme et que par ailleurs, si une cassure intervient et que la cellule meurt, celle-ci est le plus souvent remplacé dans un organisme mature, sauf cas de vieillesse.  [...] -la première, c'est qu'il existe dans la cellule, des enzymes, nucléases je crois, qui coupent les deux brins de l'ADN... Quel avantage pour la cellule d'avoir des nucléases... pour des réparations de l'ADN ressemblent-elles aux enzymes de restriction.  [...]

[Biochimie] Enzymes de restriction pour détecter les mutations

Dans la correction seule l'enzyme 4 (CTAG) est valable.. comment ca se fait... normalement l'enz 1, 3, 4 et 5 peuvent etre utilisé (selon moi ) etant donné qu'on a GAG ou TAG dans la sequence de l'enzyme.  [...] Il faut retrouver, par exemple pour l'enzyme 1, la séquence ACTAGT en entier dans le gène (normal ou muté), or ici elle n'y est pas.  [...]