• Santé - Enzyme, Mesure, Protocole

Dosage de la catalase

je suis toute nouvelle sur ce forum et j'ai besoin d'aide, je travaille sur le dosage d 'une enzyme la catalase théoriquement cette enzyme est sensée décliner au fur et à mesure durant 3 minutes alors j'ai essayé un protocole pas de diminution, j'ai ensuite testé un autre protocole ça a marché une fois et ensuite plus du tout.  [...] Est ce que vous auriez une idée pourquoi ça coince éclairez moi s'il vous plait.   [...]

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase.  [...] j'ai besoin énormément d'un protocole de dosage de l'enzyme glycosyltrasferase.  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

La semaine prochaine, je vais tester un protocole bien expliqué et réalisé sur la meme enzyme mais provenant de végétaux (mais, pomme de terre..) j'espère obtenir des résultats car c'est une manip proposée pour des travaux pratiques d'étudiants.  [...] Cela coûte peut-être cher mais il n'y a pas meilleur moyen pour contrôler que le protocole et les réactifs sont bons pour mesurer cette activité enzymatique. Tâtonner et refaire plusieurs fois un protocole qui ne marche pas peu faire perdre au labo plus d'argent que ce qu'il en aurait été si tous les bons tests avaient été faits au début.  [...]

mesure activité enzymatique bacterienne

J'ai beaucoup chercher sur internet une explication de la méthode de SOMOGY et NELSON pour la mesure de l'activité enzymatique d'une suspenion bactérienne, et j'ai rien trouvé.Est ce que quelqu'un connait le principe ou le protocole ou un site où la méthode est détaillée Merci.  [...] Il s'agit d'une vielle méthode que plus personne n'utilise pour mesurer la présence de sucre réducteurs dans une suspension.  [...]

[Biochimie] Protocole de mesure de l'activité de l'Acétylcholineestérase de Ellman et al (1961).

Bonjour, j'aimerais avoir si l'un de vous avait un lien vers une publication (de préférence gratuite) ou est décrit, en détail, le protocole de mesure de l'activité de l'acétylcholine estérase de Ellman et al datant de 1961.  [...] D'accord je pense savoir ce que tu veux dire. tu as été confronté à des articles utilisant la méthode mais ils ne la décrivent pas en détail. Tous les articles scientifiques ne donnent pas les détails des méthodes employées. Pour avoir un protocole détaillé, il faut aller sur les sites des fournisseurs des produits utilisés dans la méthode, ou directement demander à une équipe ayant publié en utilisant cette méthode.  [...]

[Biochimie] Sollution tampon votre avis

Est-ce que les composantes de ce tampon ne risque pas de réagir avec celle du tampon que je vais utiliser pour le dosage de l'enzyme (le tampon que dicte le protocole du dosage de l'acétylcholéstérase, destiné à offrir un pH idéal pour la réaction). Ne risque t'il pas de réagir aussi avec la acétylcholine que je vais préparer et le DTNB (l'enzyme doit dégrader l'acétylcholine pour donne du thiocholine qui va ce lier au DTNB et le spectrophotometre va mesurer l'absorpition du produit thicholine-DTNB).  [...] Ensuite concernant ta seconde question. Difficile a répondre sans connaitre ton protocole expérimental (composition tampon, volume tp vs volume extrait enzymatique,...). Peux tu me donner quelques élements de réponses si ce n'ai pas trop confidentiel Mais sache qu'il existe des méthodes pour changer de tampon après ton extraction pour conditionner ta protéine dans un autre tampon... (Dialyse, unité de concentration,...).  [...]

[Microbiologie] digestion de plasmide

Il n'est écrit nul part que mkh utilise l'enzyme de proméga. Plus, elle utilise le buffer one phor all (pharmacia/GE healthcare. je ne suis même pas certain que ce soit encore commercialisé). Et d'ailleurs, je pense que si mhk avait des stocks de buffer à disposition, elle l'utiliserait.  [...] Pas faux piwi. Maintenant comme tu l'as dit, le buffer est spécifique de firme alors je sais pas si c'est une meilleure idée de le faire soi-même. En pratique, l'enzyme est normalement la même, donc le tampon devrait l'être aussi. Je crois qu'il est possible de trouver un tableau de comparaison entre les buffers des différentes firmes (sur biolabs je crois).  [...]

clonage qui ne fonctionne pas ? ratio ?

Voici brievement le protocole, digestion du plasmide par une enzyme qui génere des extrémités cohésives (pacI), puis purification des deux fragments à partir d'un gel d'agarose QIAEXII.  [...] Aujourd'hui je refait le clonage, en tentant de placer l'enzyme 1H30 à 25°C (est-ce peu assez ), précédemment la ligation se faisait 1H à 16°C (protocole établit par mon encadrant).  [...]

[Biochimie] Purification cellulase

j aimerai avoir un protocole détaillé concernant la purification de l enzyme cellulase.  [...]

Mesure de la température chez la souris in vivo

Du coup je reviens sur ma première idée. est-ce que faire exprimer le système de modification métabolique dans les cellules de l'épiderme (en délivrant les transgènes in vivo via un vecteur viral par exemple) pourrait permettre de détecter une éventuelle augmentation de température par mesure infrarouge externe.  [...] Concernant la mesure par infrarouge depuis l'extérieur, c'est moins simple, c'est-à-dire que je risquerai de ne pas détecter l'augmentation de température.  [...]