• Santé - Enzyme, Courbe, Activité

[Biochimie] courbe chromatographique

ma question pourrait paraîtr bête mais en fait j'aurai aimé savoir comment lire une courbe chromatographique Je veu dir surtout par là que à quoi correspond réellement la partie activité enzymatique spécifique et quel rôle joue la courbe du profil du gradient.  [...] La courbe activité enzymatique spécifique est la courbe obtenue en divisant l'activité/ml par la concentration de protéine en mg/ml. Plus l'activité spécifique est élevée, plus l'enzyme est pure. Cette courbe est donc un bon moyen de visualiser dans quelles fractions se trouve l'enzyme la plus pure.  [...]

Temperature, pH et Enzymes...

L'effet de la température et du pH sur l'activité enzymatique est représenté par une courbe de type Gaussienne, chaque courbe est spécifique de l'enzyme étudié. Avec une telle courbe tu pourras savoir l'évolution de l'activité enzymatique en fonction de la modification.  [...] Bien qu'il ne s'agisse pas de la même enzyme dans les deux cas, cela te permet d'avoir une idée sur les gammes de pH et de température.  [...]

[Biochimie] energie d'activation enzyme

Je suis un peu bloquée dans des calculs. voilà, j'ai une enzyme recombinante pure pour laquelle je dois calculer l'energie d'activation. J'ai fait ma manip en mesurant l'actvité enzymatique pour différentes température d'incubation de l'enzyme toute les 5 min pendant une demi-heure et j'ai tracé pour chaque température la courbe Activité = f (temps).  [...] Et maintenant je sais d'après un article qu'il faut mesurer pour chaque température la constante k qui est le coefficient directeur d'une droite, mais laquelle.   [...]

[Biochimie] élution protéine

En parallèle de cette courbe il me faut tracer la courbe d'élution de l'enzyme (Activité fraction = f(volume élution))après avoir mesuré l'activité des fractions au spectro.  [...] Etant donné que tu mesures une activité après ta chromatographie, elle doit très certainement se faire en condition native. Je suppose que tu détectes l'activité phénoloxydase dans les deux pics Lorsque tu détermines l'activité spécifique de chacun des pics, qu'obtiens-tu As-tu à disposition une courbe d'étallonage pour cette colonne qui te permettes d'évaluer grossièrement les tailles des protéines en fonction de leur volume d'élution.  [...]

[Divers] Méthode de travail

- observation des résultats. pour l'instant tu n'interprètes rien. Tu décris ce que tu vois. ( si possibles en donnant des chiffres.) Exemple. on voit que la courbe A représentant l'activité de l'enzyme 1 diminue en presence de telle molécule. Cette étape doit te prendre du temps, tu analyses précisément tout ce que vois.  [...] - conclusion. tu fais un lien avec le document suivant ( généralement c'est une étude d'ensemble). Exemple. On peut supposer que la structure chimique de cette molécule influerait sur l'activité de cette enzyme ( ce qui est généralement l'objet du document suivant ).  [...]

Biochimie: Cinétique enzymatique

Dans la plupart des réactions du métabolisme, il y'as toujours une réaction de régulation, cette étape est trés importante et l'enzyme qui catalyse cette réaction clée est dites enzyme allostérique est comme une enzyme classique reconnu un substrat et le transfome en produit, mais ces enzymes en plus la capacité de reconnaitre une ou plusieurs molécules qui module leurs activités on les appelles les effecteurs allostériques qui peuvent étre positive ou négative.  [...] (L'enzyme allostérique a une courbe sigmoïde car la fixation d'un effecteur est requise avant que sont activité soit enclenchée. Les enzymes michaeliennes agissent sans activation préalable si le substrat est présent.).  [...]

enzymologie/courbe??

ton interprétation a l'air tout à fait bonne. à partir d'une certaine température, les liaisons faibles intervenant dans la structure tertiaire ou la structure quaternaire sont rompues en permanence, ce qui a pour effet de dénaturer ton enzyme et son activité baisse jusqu'à devenir nulle.  [...] Dans le second cas, l'enzyme est quasiment native quand tu fais ta mesure car tu viens de l'ajouter au milieu qui est déjà à t°, et alors, son activité initiale dépend surtout de l'agitation brownienne jusqu'à une certaine t°, beaucoup plus élevée que pour le premier cas.  [...]

[Biochimie] cinétique enzymatique

Ensuite, on me dit. sachant que la masse molaire de l'enzyme est de 250 000 g/mol, calculer l'activité spécifique de l'enzyme. Comment faut-il procédé merci d'avance.  [...] 2. Influence de la concentration en substrat. j'ai tracé la courbe 1/vi = f(1/S), j'ai dédui graphiquement Vmax et Km. on me demande alors quelle est l'activité de 1mL de la solution de l'enzyme utilisée, et de déterminer la concentration molaire de la solution d'enzyme utilisée.  [...]

[Biochimie] activité enzymatique

est-ce-que on doit effectué une courbe étalon pour le calcule de l'activité enzymatique ou bien il y a une autre méthode de calcule (sans courbe).  [...] Toutes tes réactions ont en commun la production d'H2O2 ou sa dégradation. Il suffit que tu trouve un réactif qui donne une couleur en présence d'H2O2 et tu peux ainsi connaitre tous les paramètres de tes enzymes (Activité, Km, Vmax,...). Après, c'est à toi de te creuser un peu la tête avec ce que je t'ai dit, sinon tu ne comprendras jamais l'enzymo.  [...]

[Biochimie] Confirmation (ou pas) activités enzymatiques

Il s'agit d'un TP d'écotox, on a exposé des organismes (poissons) à différents polluant dilués dans le milieu. Ensuite on a récupéré différents organes et on dose l'activité enzymatique. acétylcholinestérase et phosphatase acide. Il y a donc un protocole différent pour chaque enzyme.  [...] -J'obtiens donc une activité de mon milieu réactionnel en U/L. Après recherches et si j'ai bien compris U s'exprime en µmoles/min ( est-ce exacte car si je me plante déjà là... ). Donc l'activité en U/L équivaut à µmoles/min/L. De cette conclusion je ressorts que l'activité d'un L de milieu réactionnel et la même que n'importe quel volume de milieu réactionnel aux mêmes concentrations de chaque constituant (c'est là que change tout le temps d'avis, un coup je me dis oui c'est bon et la minute d'après je n'en suit plus du tout convaincus.  [...]