• Santé - Enzyme, Coupe, Franc

PCR et clonage

1- soit tu mets des sites de clonages en 5' dans tes oligos qui vont te permettre d'amplifier le fragment par PCR. Ensuite tu digeres le produit de PCR avec ces enzymes et tu le ligue dans ton vecteur coupé par les enzymes compatibles.  [...] 2- tu ouvres ton plasmide, soit avec une enzyme qui coupe franc, ou alors cohésive (et tu rempli le site avec la Klenow). puis tu clones directement le produit de PCR (qui est bout franc si tu as utilisé une enzyme fidele).  [...]

exercice de génomique assez complexe..

Bien séparer avec les Slashs. C'est normalement le site de coupure de l'enzyme (qui n'est pas à bout franc, sinon c'est trop facile, comme exercice.).  [...] Puis ensuite voir si tu peux mettre ta séquence d'ADN digéré, c'est à dire sans les morceaux sur les côtés, après (ou avant, suivant comment on se place) les /.   [...]

[Biochimie] nucléase

Dans mon cours les nucléases sont décrites comme étant des enzymes permettant de couper entre deux nucléotides seulement voila on distingue les nucléases a bout franc des nucléases a bout cohésifs en effet les nucléases a bout franc coupe sur les deux brins d'adn tandis que les nucléases a bout cohésifs coupent seulement sur 1 brin d'ADN.  [...] Ces courtes sections monobrins sont complémentaires l'une à l'autre. Les adénines peuvent s'apparier aux thymines avec la formation de 2 liaisons hydrogènes (c'est une renaturation en fait). Avec une coupure franche, pas de section monobrins générées, tu ne peux pas réapparier sur le principe de complémentarité.  [...]

Enzyme de restriction et activité étoile!

L'activité étoile survient lorsqu'une digestion ne se produit pas dans les conditions optimales de l'enzyme. L'enzyme se met à couper a peu près partout et son site de restriction, souvent, se raccourci et l'enzyme produit plus de fragments que supposé. Ma question est, disons qu'une enzyme produit des extrémités 5' cohésives théoriquement, est-ce qu'elle va continuer de produire des extrémités 5' cohésives même si elle est dans des conditions d'activité étoile.  [...] Sinon, pour s'assurer que tout les morceaux soit à bout franc, il suffit de rajouter une autre enzyme, comme la nucléase S1, par exemple (il y en a d'autre). Cela permet toujours de réaliser un clonage après purification et sélection du fragment désiré.  [...]

Vigne

J'ai acheté une petite ferme et m'occupe depuis trois ans d'une petite vigne. Je fais donc à titre personnel un vin naturel. (Pas terrible pour le moment).   [...] Les pieds de vigne ont 15 ans, après la taille, l'apparition des feuilles puis de la grappe, d'un coup juste avant ou pendant la floraison, le pied meurt.  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide ligature

ce qui m'étonne c'est que tu coupe ton ADN avec une enzyme et ton plasmide avec une autre. Normalement les bouts collants ne peuvent pas se linéariser comme cela.  [...] effectivement, certaines enzymes de restriction générant des extrémités protrusives (par franches = blunt) peuvent être cohésives. Dans ce cas, généralement on ne peut pas recouper avec les 2 enzymes utiliser au début. Si tu peut trouver un livre de NEB (New England Biolabs) ou peut être sur leur site, tu as un tableau qui récapitule tout.  [...]

Renseignement Maladies orphelines

je ne vois pourquoi cette femme, en france, au 21E siecles devrait continuer à souffrir le martyr, des blouses blanches de certains d'autres SONT DE NOS JOURS suppper pros tant dans le relation que dans la culture medicale.  [...] merci.du coup ca fait deux jours que j ai une crise je ne suis meme pas aller a l hopital j en ai ras la casquette je vais faire une pose de docteur ou je vais en frappe un avec leur secret de polichinelle je ne trouverais pas quelq un de franc et direct.  [...]

enzymologie- Liqueur de Fehling

Pour étudier l'activité enzymatique de l'invertase, nous avons réalisé un TP dont l'une des étapes était d'ajouter la solution d'invertase à pH assez acide soit 4.8 sur la liqueur de Fehling au bain- marie. Dés l'obtention d'une coloration jaune franc. nous notons le volume versé ainsi ensuite on trace la courbe 1/v=f(t).  [...] Normalement la liqueur permet de mettre en évidence les produits de l'enzyme et donc son activité. Rouge brique. Je ne vois pas d'ou peut venir la couleur jaune a part une dégradation de l'enzyme.  [...]

OGM : le principe de précaution | Dossier

Le 2 février 1995, la loi Barnier l'inscrit dans le droit français sur la protection de l'environnement. Elle le présente comme le principe selon lequel l'absence de certitudes compte-tenu des connaissances scientifiques et techniques du moment, ne doit pas retarder l'adoption de mesures effectives et proportionnées visant à prévenir un risque de dommages graves et irréversibles à l'environnement, à un coût économiquement acceptable.  [...] L'initiative de l'Office était donc excellente, mais on peut craindre que la procédure utilisée ne se retourne contre l'intention initiale, qu'il n'y ait là un empiètement nouveau de l' univers des médias et de la publicité sur le terrain politique. Pourquoi les représentants du peuple représenteraient-ils moins bien le peuple qu'un échantillon de citoyens panelistes (11) Les parlementaires français ont fait la preuve dans le passé qu'ils étaient capables de réaliser par eux-mêmes des travaux remarquables sur des questions très difficiles.  [...]

fistfuck et sida?

Le risque est diminué mais non nul et alors que la France connait cette épidémie (1) et que les traitements et les préservatifs sont déjà disponibles vous pensez améliorer les choses en supprimant une protection.  [...] Le concept qui consiste à utiliser les traitements antirétroviraux comme moyen de prévention n'est pas nouveau5. En 2002, Veslasco-Hernandez et coll. ont montré, en utilisant également des modèles mathématiques similaires, que l'utilisation des antirétroviraux pourrait conduire à l'éradication du VIH dans la communauté homosexuelle de San Francisco6.  [...]