• Santé - Enzyme, Couleur, Substrat

Le test Elisa, célèbre méthode pour détecter le VIH | Dossier

Si les anticorps correspondants sont présents dans le sang, ils s'y fixent (2). L'ajout d'un nouvel anticorps, spécifique à une région de celui déjà présent, est alors effectué (3). Il est pourvu d'une enzyme qui change la couleur du milieu quand on dépose son substrat (4).  [...] La phase suivante consiste à apporter un troisième anticorps, là encore équipé d'une enzyme, spécifique au deuxième anticorps (4). L'ajout du substrat de l'enzyme dans le milieu permet de colorer le puits (5). Si p24 est absent, alors toutes les étapes suivantes sont impossibles et le milieu ne change pas de couleur.  [...]

Méthode Elisa

5) détection finale des anticorps secondaires par l'ajout d'un substrat. ce substrat chromogène va être métabolisé par l'enzyme accrochée à l'Ac secondaire et donner une couleur.  [...] généralement, dans un test ELISA, plus la couleur est foncée, plus il y a d'antigène dans le puits et donc dans l'échantillon analysé.  [...]

[Immunologie] Elisa

salut à tous, quels sont les couples enzyme/substrat à utiliser pour un ELISevec formation d'un précipité de couleur et donc mesure de la DO.  [...]

dosage immunologique

Dans le premier cas, tu coates tes puits avec un anticorps dirigés contre la substance à détecter, par exemple anti IL2. Ensuite tu incubes ton échantillon (sérum, surnageant de culture,...) et tu révèles avec un deuxième anticorps couplés à une enzyme. Cette enzyme ve dégrader son substrat qui a été choisi pour changer de couleur lorsqu'il est hydrolysé.  [...] Je permets donc juste une dernière question, plus pratique. Il y a donc au moins deux étapes avant la révelation (1/ incubation de l'échantillon biologique à tester et 2/ dépôt du 2ème anticorps couplé à l'enzyme). mais en pratique lorsqu'une femme fait un test de grossesse par exemple, elle ne dépose que de l'urine sur le test et pas d'anticorps secondaire couplés avec une enzyme, donc comment se fait la détection pour ce genre de test fait à la maison.  [...]

[Génétique] Pigmentation des yeux de drosophiles

comment est déterminée la couleur des yeux chez les drosophiles telle est la question. Pour nous aider on a un tableau représentant les chaines de biosynthèses des pigments des yeux de drosophiles.  [...] oui, c'est ça, si une enzyme ne fonctionne pas, le substrat sur lequel elle devait agir n'est pas modifié, ce qui arrête la chaîne. Il manque donc un pigment, et les yeux de la drosophile n'ont pas la couleur rouge habituelle.  [...]

[Génétique] Groupe sanguin et parentalité

un gène 1F de maman et un gène 2B de papa. les deux enzymes sont fonctionnelles, la chaîne de réaction peut se dérouler jusqu'à la fixation du marqueur B. Le bébé sera donc du groupe B.  [...] Oui... mais un peu moins bon en médecine. Les personnes qui ont un phénotype Bombay le savent ainsi que leur médecin. Elles ne sont pas lâchées comme ça dans la nature. elles sont bien informées sur leur groupe particulier et elles ont des cartes de groupe bien particulières (cf transfusion à risque).   [...]

[Identification] taxonomie moléculaire

pour revenir au sujet, voici une technique de microbiologie qui permet une classification des bacteries. c'est ce que l'on appelle la 'gallerie API', on test les bacteries sur different puits avec differents substrats, et selon la couleur du puit on peut determiner si la bacterie est capable d'utiliser ou non un substrat, entre autre si elle possede tel enzyme ou pas.  [...] selon les resultats obtenus il existe une sorte d'annuaire des bacteries qui permet de classer ou de determiner quelle est la bacterie sur laquelle tu travailles. l'explication en detail de chaque manip est longue a expliquer mais le mot cle c'est 'gallerie API'.   [...]

[Biochimie] Biochimie > Enzymologie > constante de Michaelis (Km)

Euh... En fait, Km represente l' INVERSE de l'affinite de l'enzyme pour le substrat, cette constante pourrait etre assimile a la constante de dissociation de l'enzyme avec son substrat.  [...] Euh... En fait, Km represente l' INVERSE de l'affinite de l'enzyme pour le substrat, cette constante pourrait etre assimile a la constante de dissociation de l'enzyme avec son substrat... ( SPILLOU ).  [...]

[Biochimie] Dosage de la phosohatase alcaline d'un sérum

Je fais un laboratoire sur le dosage de la phosphatase alcaline. Le substrat de cette réaction est le para-nitrophényl phosphate qui se fait hydrolyser par l'enzyme en para-nitrophénol qui est de couleur jaune, qui se fait doser par spectrophotométrie.  [...] Dans deux tubes différents nous mettons du substrat alcalin en excès. On les incube 5 mins à 37oC. Ensuite, dans le tube blanc, on ajoute de l'eau et dans le tube test du sérum, qui contient l'enzyme à doser.  [...]

Les inhibiteurs

- l'inhibiteur non compétitifs va se fixer sur un site, et va empêcher par exemple le recrutement de cofacteurs essentiels à la réaction enzymatique. Dans ce cas-là, il ne modifie pas l'affinité de l'enzyme pour son substrat.  [...] - l'inhibiteur se fixe sur des domaines indispensables à la stabilité du complexe enzyme-substrat. dans ce cas il modifie l'affinité de l'enzyme pour le substrat.  [...]