• Santé - Entrain, Technique, Extraction, ADN

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN ( ADN simple brin)

je sollicite votre aide, je suis entrain de mettre en place une technique d'extraction qui au final me donne de l'ADN simple brin... j'aimerai faire une purification sur colonne de silice, malheureusement j'ai l'impression que mon ADN n'est pas élué il reste accroché à la silice, car après avoir fait plusieurs real time en comparant ma technique avec une technique classique sur colonne de type Qiagen, les Cp sont très différent j'obtiens un Cp de l'ordre de 13 pour Qiagen et d'environ 20 pour ma technique.  [...] je pense que j'ai pas donné assez d'informations, ma technique d'extraction est différente de celle de Qiagen ( protéinase K, sels chaotropique...), en tout point, sauf que j'utilise les différentes solutions ( AW1,AW2) de la compagnie Quiagen pour les différents lavages, et je dépose mon extrait( non purifié, extraction de type alcool et sels) sur une colonne de silice pour purifier, on utilise la solution de Qiagen le AE pour l'élution.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon d'extraction d'ADN

ces jours ci nous sommes entrain de faire un TP sur la préparation de solutions Tampon pour extraction d'ADN, le probléme c'est que on nous a donnés un exercice que j'avoue j'ai pas compris bon. on nous a donnés.  [...] Tu peux facilement remonter à la quantité de matière ajoutée en chaque soluté. MgCl2, NaCl etc. grâce au volume et à la concentration.  [...]

[Biochimie] dosage et extraction des hormones

bonjour à tout le monde, je suis entrain de travailler sur les nouvelles méthodes d'extraction et de dosages des hormones principalement les glucostéroïdes (au niveau du plasma, urine et la salive). je voudrais savoir si quelqu'un a une petite idée sur l'extraction du cortisol et de la DHAE salivaires.  [...] merci katie je connais tt ca mais je cherche surtt le point technique c'est à dire comment extraire l'hormone en question. mode opératoire.  [...]

Autoradigraphie

Je suis entrain d'étudier la technique d'autoradiographie pour la cytologie.  [...] Pour ce qui est de son principe, je comprends qu'on doit incorporer un radio-isotope dans un échantillon, puis couler une émulsion directement sur la coupe, et après fixation on laisse le tout dans l'obscurité. L'émulsion les rayonnement vont impressionner l'émulsion mais comment fait-on pour avoir l'image de la cellule avec des tortillons noir par microscopie électronique.   [...]

[Biologie végétale] Qu'elle est la quantité d'huiles de certaines herbes??

Je suis entrain de faire l'étude d'un projet d'extraction et de distillation d'huiles et j'aimerai savoir la quantité d'huiles à ces plantes.  [...] En ce qui concerne le bois de santal, je pense que c'est une idée à abandonner, en raison de la rareté et du prix de ce bois, ainsi et surtout à cause de la façon souvent illégale dont ce bois est exploité.   [...]

[Biologie Moléculaire] Taq DNA polymerase et Go taq DNA polymerase

GoTaq est la désignation commerciale d'une Taq polymérase finalement assez classique en terme des principales propriétés. Bien sûr, la société qui la fabrique vous dira qu'elle est mieux que les autres en terme de rapidité et fidélité mais globalement ça reste une Taq.   [...] La particularité de ce tampon est d'être un tampon de réaction ET un tampon de chargement (tu charges directement sur gel après la PCR).   [...]

[Immunologie] Interprétation des résultats de cytométrie de flux

Je ne garantis pas que je pourrai répondre à ta question (mon expérience en cytométrie en flux est assez limitée) mais sûrement que des personnes fréquentant le forum le pourront.   [...] En fait, je n'ai jamais utilisé la technique, je suis juste entrain de m'exercer à l'analyse et aux commentaires des résultats. c'est un TD.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique Laurière et Western Blot

Je suis actuellement entrain de tester la technique de Laurière en Western Blot, pour transférer des protéines d'un gel de polyacrylamide sur une membrane de nitrocellulose.  [...] Il vous faut optimiser votre ampérage/temps de migration afin d'avoir un équilibre grosse protéines transférées/petites protéines perdues.   [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme PCR ,la technique inverse-shifting PCR ,génotypage de l’inversion 22 hémophilie A

Bonsoir, Je suis entrain de galérer avec la mise au point de la technique IS PCR (inverse shifting PCR ) pour le génotypage de l'inversion 22 chez les hémophiles A sévères.  [...] Cette technique comporte 3 etapes ( digestion enzymatique de l adn, ligation et PCR multiplex ), nous avons un profile attendu qu'on doit retrouver chez un patient qui porte l'inversion 22 qui est la présence de 2 bandes avec des tailles bien précises mais malheureusement on n'arrive pas à.  [...]

[Biochimie] pectinase

je sais pas qu'est ce qu'il me faut reformuler,bref la pectinase c'est un enzyme utiliser dans l'industrie et exactement dans l'extraction des jus de fruit,c'est une enzyme qui dégrade la pctine,mais j'ai pas trouver des bons articles concernant cette enzyme.  [...] je suis entrain de préparer mon sujet,malgré mes recherches sur l'internet j'ai pas arrivée de trouver une methode de production de cette enzyme par les champignons ou les bactéries,et méme la methode de l'extraction,en attendance de votre réponce je vous remercie.  [...]