• Santé - échantillon, Quantité, Plasmide, Solution

[Biochimie] Calcul d'une concentration en ADN

Que souhaitez vous faire exactement Trouver la masse d'ADN présent dans l'échantillon initialement Trouver la quantité d'un plasmide présent initialement dans la solution.  [...] Pour la quantité de plasmide, vous avez la taille du plasmide. A partir de là, toujours en utilisant la masse molaire moyenne d'un dNTP et en vous rappelant que l'ADN est double brin, vous retrouvez la masse molaire du plasmide. Comme vous connaissez déjà la masse de plasmide dans l'échantillon, vous retrouvez le nombre de moles (la quantité) de plasmides dans l'échantillon.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression d'un gène d'enzyme !

un viel homme a isolé une petite quantité d'attractase,une enzyme produisant une phéromone humaine puissante,à partir d'echantillon de cheveux de célébrités hollywoodiennes.Pour produire de l'attractase à son usage personnel,il a obtenu un clone génomique complet du gène de l'attractase,l'a connecté à un promoteur bactérien puissant dans un plasmide d'expression et a introduit le plasmide dans des cellules d'E coli.  [...] il a été anéanti de découvrir qu'aucune attractase n'etait produite par les cellules.Quelle est 'explication de son echec.   [...]

[Microbiologie] Correction Dilution en cascade (solution plasmidique)

Quand je calcule la concentration je trouve 10ng.µL ce qui correspond bien à 200ng dans 20µL. Donc l'échantillon total présente 200ng de plasmide. Ensuite on prélève 10µL de solution à 10ng/µL soit 10*10 = 100ng que l'on dilue dans 10µL d'eau (Vt = 20µL) on obtiens une solution de 5ng/µL.  [...] En fait je me suis trompé au départ ce n'est pas une solution de 200ng/µL mais une solution contenant 200ng de plasmide. Pourquoi d'ailleurs partons nous de cette solution et pas directement de la solution contenant 100ng de plasmide (ce qui reviendrait à mélanger 2µL de la solution de départ avec 18µL d'eau).  [...]

[Immunologie] Test elisa

Est-ce suffisant cela peut aussi poser problème si je fais un autre test elisa dans le but et de doser un antigène puisque si ma concentration en antigène et très forte la quantité d'ac sera inférieur a la quantité d'AG. quel est la solution dans ce cas on procède a des dilutions de l'échantillon d'antigène.  [...] oui je pense que tu as répondus au moins en partie à ma question. Pour les expérience de type western pas de soucis l'important et d'avoir un signal donc on se fiche que les antigenes soit partiellement ou tous marquer. Mais dans une expérience quantitative comme le test elisa ( dans le cas ou on cherche a doser un AG) et que la quantité d'AG est supérieur à la quantité d'AC, on est bien embêté puisque si on prend une dilution moins grande que le titre pour comblé cette différence on risque de ce retrouver dans les limite de beer lambert lors de la lecture.  [...]

[Biochimie] Role de la BSA dans une extraction protéique ??

une solution serait de faire une extraction témoin sans échantillon que tu utiliserais pour faire la gamme, mais je n'ai aucune idée de si la quantité qui sera présente aura un impact sur le dosage.  [...] Et un dosage des protéines extraites avec un Bradford modifié (RC DC biorad) à 750 pour pouvoir exprimer mes activités par quantité de prot extraites.  [...]

dosage immunologique compétitif

est-ce que quelqu'un saurait me renseigner sur les dosages immunologiques compétitifs.   [...] je ne comprends pas comment on arrive à quantifier la quantité d'antigène présent dans un échantillon l'incubant sur une solution d'anticorps et d'antigène marqué. je suppose que le fait que ce soit un antigène marqué ou pas qui se fixe sur l'épitope de l'anticorps est purement aléatoire alors j'ai un peu du mal à comprendre.  [...]

[Biochimie] detection de l'epo

j'ai un dossier à faire sur le dopage sportif à l'EPO et j'aimerai savoir comment on détermine quantitativement l'EPO recombinante après l'électrophorèse sur gel.  [...] Une solution éventuelle et de faire co-migrer sur le gel de l'EPO recombinante, à différentes concentrations connues pour chaque piste. Après quantification de l'intensité des bandes (si vos bandes sont quantifiables) vous tracez une droite Intensité = f(concentration) et ainsi vous connaissez la concentration en EPO de votre échantillon, en la ramenant sur la quantité déposée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Plan de plaque, validation de méthode...

Alors voilà, j'ai une petite question à vous poser. Dans le cadre de la validation d'une méthode de PCR, je dois mettre en place des plans de plaque de 96 puits avec comme références, un solution de plasmide, une lignée cellulaire et des échantillons cliniques. Tous positif au gène en question.  [...] Explication rapide (et fais un peu de recherches la dessus par toi meme pour plus de précision). tu dois introduire dans un échantillon biologique (appelons le X) une quantité connue (Y) de matériel (dans ce cas, ton plasmide). Tu run X tout seul, Y tout seul et (X+Y).  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR quantitative

Car moi ce qui m'intéresserait si c'est possible c'est de savoir au final dans mon échantillon, quel est la quantité en ng de mon gène d'intérêt. Es ce que cela est possible et si oui comment on peut le faire.  [...] Une solution Utiliser ton échantillon pour faire une gamme standard pour vérifier l'efficacité d'amplification, mais dans ce cas tu n'auras bien évidement pas de quantification absolue, tu ne pourras faire que du relatif par rapport à un gène de ménage, sans compter l'augmentation des coûts due au fait que théoriquement il faudrait faire une gamme pour chaque échantillon.  [...]

Définition | Charge virale | Futura Santé

Le terme charge virale fait référence à la quantité de molécules virales présentes dans un échantillon de plasma sanguin.  [...]