• Santé - Dosage, Protéines, Quantité

[Biologie Cellulaire] etude du niveau de phosphorylation d'une protéine en WB

Pensez vous qu'il soit nécessaire de réaliser un dosage des protéines afin de déposer précisement la mm quantité de protéines.  [...] Il est toujours mieux de réaliser un dosage de protéines avant un western blot, cela permet d'être bien sûr de ce qu'on dépose.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western blot + extraction proteine

Je suis d'accord avec Vinc, mais si je me trompe il est impossible de doser ces protéines dans le laemlli... Alors si on veut faire un dépot avec une quantité précise, je préconiserai le RIPA-N, puis un dosage protéique, et enfin la reprise du volume nécessaire de protéines avec un volume équivalent de laemlli 2X.  [...] Oui le dosage dans le Laemli n'est pas possible en effet, mais il n'est pas forcément necessaire de doser les protéines. L'expérience du manipulateur ainsi qu'un contrôle adapté en western permettent d'obtenir un résultat impeccable (je ne fais que des western et j'ai arrêté de doser mes protéines assez rapidement).  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines totales méthode de Bradford.

Tu lit l'absorbance de ta gamme étalon et trace ta courbe tu auras un courbe de l'absorbance en fonction de la quantité de protéine présente dans tes tubes.  [...] Dans les deux cas quand tu testeras ton tube contenant ta protéine et le colorant, tu va obtenir une DO que tu repporte sur le graphe que tu a tracer manuellement ou c'est le spectro qui le fait automatiquement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot sur des echantillons de foie murins

oui, je me ferai aider. Mais avant j ai quand meme besoin d un protocole.Le probleme c'est que je pars de rien. Dans le labo, ils ont dosè d autres proteines, pas celles la. De plus, ils le font souvent sur des cellules en culture. Cest pour cela que je suis un peu perdue. J'attens ton message demain.  [...] Ton protocol m'abeaucoup aidé. J'ai extrait mes proteines et fais mon dosage de Bradford. Par contre, jai un soucis, mes proteines sont très concentrées. Du coup, pour avoir les 20µg qu'il faut pour le gel, j'ai des valeurs negatives. Que faire dans ces conditions Estce que je peux diluer mes ech Et si oui, comment pourrais-je les quantifier a la fin.  [...]

[Identification] IPG strip gel combiner a une extraction au PBS

question bête mais vous êtes-vous assuré que l'extraction avait bien marché Avez-vous fait un dosage et déposé suffisamment de protéines pour l'IPG.  [...] Un dosage de type Lowri est effectuer avant chaque loading, car la quantite optimal de load pour l'IPG est 500ug il me semble, donc nous loadons 400ug pour etre sur de ne pas saturer le strip et un max de proteine sur le gel.  [...]

[Biologie végétale] la mobilisation des réserves protéiques

bonjour je suis chercheuse en biophysiologie végétale..jai fais des études sur des graines de petit pois et plus précisément jétudie la mobilisation des réserves protéiques (les fractions majeures. les albumines et les globulines) mais jai trouvé après extraction et dosage que la quantité des globulines est très faible par rapport à celle des albumines (normalement les globulines sont les majeures).  [...] .jne sais pas si le problème vient du protocole d'extraction( parce que jutilise le 2mercaptoethanol) ou il y a une explication plus scientifique..jattends avec impatience vos réponses..merci )).   [...]

[Biochimie] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification

l'huile étant insoluble dans l'eau il m'est impossible de solubiliser le peu de protéines présents, (je tiens à préciser que le dosage est réalisé sur des quantités exprimées en ng de protéines/mg d'échantillon) donc j'ai très peu de matière.  [...] Après centrifugation (quelles sont les paramètres optimums pour former le culot) je suppose devoir faire une dialyse pour supprimer cette forte quantité de sel dans ma solution. pouvez vous me conseiller du matériel ou autre je n'en ai jamais réalisé.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

faire un dosage de proteine par la methode lowry ou autre methode de dosage.  [...] Pensez-vous que cela pose problème de resuspendre le culot de protéines dans de l'acide (sulfosalicilique 1.3%) avant d'effectuer le dosage.  [...]

[Biochimie] électrophorèse

le mieux serait que vous nous donniez le protocole que vous avez utilisé en précisant effectivement quelle quantité de protéines vous avez déposée.  [...] Question bête mais bon. concernant votre échantillon. êtes-vous sûr qu'il y avait des protéines Avez-vous fait un dosage Peut être que l'élution sur la colonne chromatographique n'a rien donnée.  [...]

[Biochimie] NanoDrop

Tu peux lire la DO proteine pareil, il va mesurer 260/280 et 230 ou 330 je sais plus, il a meme des proteines preintegree comme la BSA pour la quantif, sinon tu rentre toi meme ton coef et il te donne la concentration.  [...] donc à priori pas de problème pour doser des protéines à 480nm. Il faut juste paramétrer le soft vu que ça ne doit pas être dans les programmes de dosage classique.  [...]