• Santé - Dosage, Protéine, Méthode

[Biochimie] Dosage de protéine

Je voudrais savoir quelle méthode vous me proposez pour réaliser un dosage de protéine dans une dispersions de gomme arabique autre que le dosage de Bradford.  [...] Mon dosage de bradford m'a donné une concentration en protéine supérieure aprés centrifugation qu'avant ce qui n'est pas possible. C'est pour cela que je cherche quelle méthode je pourrais utiliser à la place.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

quel sont les points de comparaison eventuel,entre un dosage de proteine avec la methode de brad ford,et un dosage par elisa indirect,c'est pour une conclusion general.  [...] elisa. 1_sensibilisation des microplaque avec l'antigene,incubation une nuit a 4°c,2_lavage de l'excés non fixé au PBS...3_inoculation de l'anticorp(AC) a detecté,incubation a 37°c pendant 10mn...,4_lavage de l'excés non fixé,5_ajout de PBS 5% de lait ecremé pour saturer tout les sites libre.   [...]

[Biologie Moléculaire] Biochimie: méthode de Western Blot

Quand je fait une recherche sur internet à propos de la méthode de Western Blot qui sert à identifier et détecter des protéines je trouve qu'il faut réaliser un dosage avec la méthode de Biuret avant la manipulation. Je ne comprend pas pourquoi réaliser ce dosage vu qu'il sert seulement à connaitre la concentration en protéine d'une solution.  [...] Cependant, si c'est juste pour s'assurer de la présence (ou l'absence) d'une protéine, il n'y a théoriquement pas besoin de cette étape (même si c'est plus rigoureux de la faire).  [...]

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

Ce serait bien de décrire comment est mesurée l'activité, ainsi que la méthode de dosage de protéine. Et il faudrait mesurer l'activité et la quantité en protéine à chaque étape, avant le sulfate d'ammonium, après.  [...] Je ne connais pas ma quantité de protéine dois-je réaliser une gamme étalon pour déterminer les quantité de protéines de mes solutions.  [...]

[Biochimie] Dosage de protéine / méthode de lowry

je dois comparer la méthode de dosage directe avec la méthode de lowry. laquelle est plus précise et pourquoi (enfin si c'est valable dans tous les cas).  [...] La BSA est généralement la protéine standard qui possède tous les aa en quantité relativement représentative des autres protéines.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

faire un dosage de proteine par la methode lowry ou autre methode de dosage.  [...] Pensez-vous que cela pose problème de resuspendre le culot de protéines dans de l'acide (sulfosalicilique 1.3%) avant d'effectuer le dosage.  [...]

Pta

Je viens sur ce forum car j'ai comme projet l'étude de la dégradation des protéines par les bactéries. On pensait utilisé Escherichia coli comme bactérie et la bsa(Albumine de sérum bovin) comme protéine. On était partis sur un dosage par la méthode du biuret avec le réactif de Gornall.  [...] Le problème est que l'on ne sait pas du tout quelle quantité de Bsa mettre dans notre gamme étalon. Si quelqu'un a une idée merci de m'aider.   [...]

[Biochimie] B-Galactosidase d'origine vegetale

Mes excuses, j'ai peut etre mal formule ma question. Je n'ai pas de protocole a suivre. Au fait, c'est moi qui doit rediger le protocole.   [...] 2- dosage de protéine et courbe standard par méthode de lowry et la méthode d'estimation de la consentration en protéines par mesure d'absorbance en UV.  [...]

[Biologie Moléculaire] Resolubilisation des proteines aprés extraction au trizol

Je suis en stage pour le M1. On travaille sur l'hypophyse de rat et on a fait une technique d'extractin d'ARN et de proteines au trizol. Ensuite les proteines sont mises dans du SDS et stockés à moins 20°C. Sauf que quand on a fait un dosage proteique par la methode de lowry d'où on a obtenu des quantités trés faibles de proteine.  [...] Un autre problème peut être que le SDS induit quelques soucis dans les dosages de protéines par la méthode Lowry. Dans certains kits tu as un produit supplémentaire à inclure dans ta réaction si tes échantillons contiennent du SDS, je saurais pas t'en dire plus vu que j'ai toujours utilisé ce genre de kit en suivant bêtement le protocole fourni.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines totales méthode de Bradford.

Nous avons réalisé avec le sérum d'albumine bovine SBA comme protéine standard, une courbe étalon à six points de concentrations croissantes ( 0. 0,25. 0,5. 1. 1,4. 2 mg SBA/ml).  [...] Tu lit l'absorbance de ta gamme étalon et trace ta courbe tu auras un courbe de l'absorbance en fonction de la quantité de protéine présente dans tes tubes.  [...]