• Santé - Dosage, Activité, Méthode

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

Moi je rajouterai juste une RNASe et DNAse à ton échantillon pour me débarassé de l'ADN et l'ARN. Si tu veux garder l'activité beta-gal il ne vaux mieux pas la précipiter sinon ca risque d'etre difficile.  [...] Ce serait bien de décrire comment est mesurée l'activité, ainsi que la méthode de dosage de protéine. Et il faudrait mesurer l'activité et la quantité en protéine à chaque étape, avant le sulfate d'ammonium, après.  [...]

proteinesdans le culot ou le surnageant

je prend un morceau de foie de poids = 35 mg, je le broie avec un tampon tris contenant le substrat de l'enzyme que je veux doser son activité. Le dosage d'activité se fait par une méthode colorimétrique.  [...] apres je prend le culot et j'ajoute 1 mL de triton 100x Hcl 0.1 M (0.4% v/w) puis je ferai une petite centrifigation a 10 000 g pendant 2 min et je dose la quantite des proteines par la methode BCA.  [...]

[Biochimie] pH optimal et Stabilité d'une enzyme

.. ou incuber l'enzyme seul au pH désiré pendant une certaine période puis, ajouter le substrat par la suite et effectuer immédiatement le dosage.  [...] Merci beaucoup, il ne me reste plus qu'à manipuler en espérant trouver de bons résultats. En fait, je dose les groupements reducteurs des acides galacturoniques formés par la dégradation du pectate sous l'effet de l'enzyme. Le dosage de l'activité enzymatique s'effectue au DNS (methode de Miller). Je pense que ça devrait aller.  [...]

[Biochimie] svp je veux la correction de ce tp

L'une des méthodes de dosage de l'activité polyphénol oxydase consiste à suivre au spectrophotomètre l'apparition des produits colorés.  [...] Parmi ces règles, toute nouvelle discussion doit avoir un titre explicite ce que tu n'as pas fait. Ensuite, un minimum de politesse est exigé sur le forum lors de l'ouverture d'une discussion, ce que tu n'as pas respecté puisqu'il n'y a aucune salutation ni aucun remerciement dans ton premier message.   [...]

[Biochimie] Dosage des protéines totales méthode de Bradford.

lorsque vous ajoutez un volume x de l'échantillon à un volume x de réactif de bradford, le mélange est agité à vortex ou à main.   [...] A mon avis, peu importe, si c'est en tube, cela revient au même, par contre pour une microplaque, je melange a la pipette, puis je met a agiter sur un agitateur, pour homogeneiser et pour retirer toute possible bulle.   [...]

[Biochimie] Dosage de protéine

Je ne connais pas les caractéristiques de la gomme arabique, en effet, certaines méthodes de dosage sont sensible à certains composants chimiques il faudra donc que tu t'adaptes. En méthode de dosage alternative à celle de Bradford, on a la méthode de lowry (dosage en présence de SDS) ou la méthode micro BCA.  [...] Mon dosage de bradford m'a donné une concentration en protéine supérieure aprés centrifugation qu'avant ce qui n'est pas possible. C'est pour cela que je cherche quelle méthode je pourrais utiliser à la place.  [...]

Second messagers

Bon très brièvement je t'ai dit le principal mais surtout n'hésite pas si tu veux plus de détail, nottament sur les méthode d'analyse et de dosage de ces seconds messager pour quantifier l'activation d'une voie de transduction.  [...] Pour ce qui est des phospho inositol, le DAG n'en fait pas partie car c'est du Di Acyl Glycérol.... L'IP3 se fixe sur un canal calcique du RE et permet l'augmentation du Ca2+ intracellulaire ce qui amène la PKC en position sous membranaire, le DAG produit parralèlement par la PKC permet ensuite l'activation de la PKC (en s'ouvrant l'enzyme permet au site pseudo-substrat inhibiteur du site catalytique de se détacher et on a une activité kinase.  [...]

[Biotechnologie] marquage radioactif

Concernant le marquage, on utilise la protéine A qui a une forte affinité pour les fragments Fc des Ig. On a couplé préalablement cette protéine A avec soit l'iode 125, soit la peroxydase quand on veut éviter d'utiliser la radioactivité.  [...] Pour ce qui est de la manière de purifier les anticorps, je pense qu'on utilise la méthode de radio-immunoessai, qui est une méthode de dosage d'anticorps, d'antigènes ou d'haptènes.  [...]

[Biochimie] methode de dosage de la catalase et du glutathion s transférase

[Biochimie] methode de dosage de la catalase et du glutathion s transférase.  [...] Est-ce que vous pouvait me dire où pourrais je trouver (sur internet) la description de la méthode de Clairbone (1985) et celle de Habig et Coll (1975).  [...]

[Biochimie] Conservation de ROS

Je cherche à quantifier un niveau relatif de production d'espèces réactive de l'oxygène pour un organisme. Pour cela je vais tester plusieurs méthodes et je voulais savoir si il existait un moyen de fixer ces réactifs oxygénés très instables ou si je devais absolument faire mes dosage dans la foulée.  [...] Okay c'est aussi simple que ça... Et, puis-je connaitre votre avis sur les méthodes de dosage... Je pense utiliser le nitro blue, et un kit amplex red. Puis, je ferais certainement un dosage de l'activité anti-ox à l'aide d'un kit commercial.  [...]