• Santé - Distance, Migration, ADN

[Biologie Moléculaire] l'électrophorèse

La distance de migration étant proportionnelle a la taille, on utilise ces brins d'ADN dont on connait la taille, pour former une gamme.  [...] La technique de l'électrophorèse en gel d'agarose est basée sur la séparation des acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique. Cette séparation s'effectue à travers la matrice du gel d'agarose. les molécules de plus petites tailles se déplacent plus rapidement et migreront plus loin que les molécules de tailles supérieures.   [...]

[Génétique] Notion de distance génétique

Je croyais que vous vouliez parler de la distance de migration de l'ADN lors d'une électrophorèse d'amplicons génétiques.  [...] Il s'agit d'une question de génétique formelle. Pour calculer la distance génétique entre deux gènes (deux marqueurs chromosomiques), il faut être en situation de pouvoir calculer la probabilité d'une recombinaison entre ces deux gènes. Chez différents modèles génétiques (drosophile, Arabidopsis, souris) on doit croiser des individus double-hétérozygotes (A/a B/b) (parent P) avec des individus double homozygotes récessifs (a/a b/b) (parent P') (situation appelée Test Cross).  [...]

[Biologie Cellulaire] Arn

bonjour jai deux petites question que je me pose par rapport à mon cour mais auxquelles je n'arrive pas à répondre de quel paramètre dépend la distance de migration des molécules d'ARN Et pourquoi les ARN migrent-ils vers l'anode.  [...] - la distance de migration de l'ADN ou l'ARN dépend de leur taille (plus il est gros, moins il migrera loin) et de la résolution des gels (la taille des trous à travers lesquels doivent passer les molécules).  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorese gel d'agarose

pour faire une electrophorese sur gel d agarose on prend du gel d agarose auquel tu rajoute du bet (bromur d ethidium) on fait un puit dns le gel (dans lequel on mettra l echantillon) on met l ensemble dans une solution (un tempon de migration).  [...] Après migration tu observe une ou plusieurs bandes, tu compare la distance puits/bande à celle de ton ADN à celui du marqueur et tu peu déterminer sa taille.  [...]

[Microbiologie] détermination nombre paires de bases en electrophorese

je voudrais savoir s'il existait une formule pour calcul le nombre de paires de bases des bandes de fragments électrophorétiques en fonction de la distance de migration.  [...] précision la distance tu peux l'exprimé en cm ou en mm sa na pas trop d'influence. il faut juste pensé à utilise la même unité dans la droite étalon et dans tes fragments d'adn. elle se lit du haut du gel vers le bas dans le sens de migration. le zéro étant le haut (endroit du dépôt).  [...]

[Biologie Moléculaire] pb dosage ARNtotal spectro

Oui je retrouve de l'ARN...mais je vois peu la bande qui correspond à l'ARN 28S. Je vois bien la bande qui correspond au 18S + smear = ARNm. (il faut dire aussi que je n'ai pas de marqueur de migration d'ARN, du coup je mets comme marqueur du marqueur 1kb ADN double brin alors les tailles les distances de migration de correspondent pas entre mes ARN et le marqueur).  [...] La dilution que tu utilises est trop forte. Pour ta migration avec l'ARN, laisse tomber le marqueur de taille car les tailles sont differentes entre ADN et ARN. Perso, dans ce cas la, je n'en mets pas de marqueurs de taille.  [...]

[Génétique] marqueur??

Le principe d'un marqueur de taille est assez simple. C'est un mélange avec plusieurs fragments de tailles précises connues. Tu déposes ce mélange sur un gel d'électrophorèse et connaissant la taille de chacun des fragments et sachant comment migrent les petits et les gros fragments sur ton gel tu peux estimer la taille des fragments de tailles inconnues.   [...] Pour avoir une estimation précise tu peux tracer une courbe sur papier semi log. log PM = f(Rf {distance de migration} ). En reportant la distance de migration de taille inconnue tu en déduis leur PM apparent.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de gel d'agarose

Mais là j'ai une migration qui ne ressemble vraiment a rien... j'aimerai donc des conseils sur comment mieux réaliser mes gels (surement un problème au moment de le couler selon ma maitre de stage) merci d'avance.  [...] tu dis que tu purif sur colonne avant de déposer. Tu le fais systématiquement Car ca ressemble à une migration d'ADN dans un tampon un peu spécial qui modifie la migration. Quand je dis tampon spécial c'est le conditionnement de ton ADN par rapport à de l'eau.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Le tampon de migration surtout est toxique. L'acrylamide, bah... c'est aussi toxique. Quant aux révélateurs, c'est pire. Même en essayant de faire plutôt avec la fluorescence de l'ADN sous lampe UV, ça reste du domaine de la fiction de séquencer de l'ADN chez soi.  [...] Quand au gel, un simple gel d'agarose fait l'affaire, le tampon de migration phosphate est bon aussi. je crois qu'il est également possible de marquer l'ADN à l'aide de nitrate d'argent (vieux matériel photographique). Bref, à part l'étape de PCR, tout est théoriquement faisable dans la cuisine (ultra-propre pour éviter les contaminations ).  [...]

[Biologie Moléculaire] Lysat et colonies directes

Quelle est la différence entre le lysat et les colonies directes Sur ma photo d'électrophoraise les tailles sont les mêmes. Peut être la distance de migration.  [...] Bonjour, il faut que j'interprète des résultats d'électophorèse par gel. Nous avons mis des ADN témoin pour identifier des lactobacilles. Nous les avons détecté grâce à des lysats et colonies directes. Je voudrais savoir quelle est la plus efficace des deux méthodes.  [...]