• Santé - Digestion, Sonde, ADN

Problème de biologie moléculaire

C'est une question théorique sur laquelle je suis tombé pour un exercice. L'énoncé ne précise pas l'organisme, toutefois il précise la présence d'un noyau. L'énoncé ne dit rien non plus à propos du gène. Il est dit qu'après avoir fait un screen aux RNAi pour des mutants dont l'intégrité de la membrane est réduite, un mutant est sélectionné et le produit du gène touché par le RNAi est taggé à la GFP.   [...] Encore une fois, oui tout à fait. Je me suis rendu compte après avoir posté que EMSA ne jouerait pas. En effet, on ne peut pas avoir de sonde ADN vu que l'on ne sait pas où s'attache notre prétendu TF. Du coup, j'ai pensé à l'expérience parallèle, celle du footprint, avec la digestion à la DNase I.  [...]

[Biologie Moléculaire] révélation RFLP

concernant l'utilisation des RFLP dans le diagnostic génotypique cette methode necessite le couple sonde/ enzyme de restriction, cela réfère a la technique southern blot, mais cette technique est très lourde. est ce qu'il ya un autre moyen pour rééler les RFLP.  [...] SI c'est une simple RFLP, je ne vois pas l'intérêt de la sonde. Une fois la digestion par l'enzyme effectuée, une simple migration sur gel d'agarose avec un argent marquant l'ADN devrait suffire à visualiser les fragments et à donner une bonne idée de leur taille.  [...]

Génie génétique

Le Southern-blot correspondant est hybridé avec la sonde M13Hol76 correspondant à un fragment cloné d une portion de l opéron Histidine.  [...] ta sonde radioactive est ton M13Hol76. Il s'agit surement de portion d'ADN radioactif purifié. Elle est sans doute introduit dans ton produit de digestion avant de le faire migrer. Dans la logique, cette sonde se liera uniquement à ta souche sauvage.  [...]

[Biologie Moléculaire] détection de gènes multicopies

Tout d'abord j'avais penser faire une digestion de mon adn, puis faire migrer, suivi d'une hybridation avec une sonde radioactive et j'aurais alors pu voir si une ou plusieurs bandes s'allumaient. Malheureusement cette technique nécessite une grande quantité d'adn que je n'ai pas.  [...] Pour le principe de la FISH interphasique et bien déjà on peut la faire sur n'importe quel tissu. On dénature la lame avec le matériel génétique et les sondes puis il y a hybridation des sondes spécifiques du gène en question (locus spécifique) sur l'ADN simple brin (en parallèle on contrôle les conditions dénaturantes et la température).  [...]

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN !

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...] Quelle est la différence entre une puce à ADN et sonde à ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

Une sonde est une séquence d'acides nucléiques qui est complémentaire à un brin d'ADN mono-caténaire que tu souhaites marquer. C'est à dire que les bases nucléiques de la sonde et celle de ton ADN d'intérêt sont complémentaires. (par exemple, chaque fois qu'il y aura un C dans ton ADN, il y aura un G dans ta sonde, et inversement...).  [...] Cependant, si tu as marqué la sonde sonde, par exemple à l'aide d'une molécule fluorescente, tu peux alors la visualiser (avec un microscope à fluorescence par exemple). Par ailleurs, étant donné que la sonde est fixée sur ton ADN d'intérêt, le fait de visualiser ta sonde te permet de visualiser ton ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN.  [...] Ma question est a propos du marquage directe et indirecte dune sonde ADN. Le prof nous a dit que le marquage indirecte est utilise pour amplifer le signal mais je n'ai pas compri pourquoi une necessité d'amplifier le signal.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercices important!!

ce fragement est utilisé comme sonde ds une expérience de southern blot sur l'ADN génomique totale a partir duquel cette sonde avait été générée.  [...] question. sachant que vous souhaitez obtenir 80 colonies par boite, expliquez comment vous réaliser cette expérience (protocole de dilution utilisé, volume déposé sur la boite de petripour l'étalement).   [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

L'ADN de sperme de saumon permet, pendant le southern blot (et d'autres techniques comme le gel shift (EMSA)), d'empêcher les interactions non spécifiques avec la sonde (un peu comme la BSA ou le lait dans les western blot ou en immunohistochimie).  [...] le but de la sonde est de detecter l'adn d'interet, alors pourquoi la préhybridation vu qu'elle va s'hybrider avec notre adn recherché.  [...]

Sequence 5' pour un ADNc en Southern Blot

Et deuxieme question. Comment expliquer les differences de kb entre la sonde extremité 5 ' pour l'adn c et la sonde extremité 5' pour l'ADNg.  [...] Pour la diférence de taille de l'ADNc par rapport à l'ADNg je pense que justement ce dernier contient à la fois des exons et des introns, donc après la digestion les fragments d'ADNg seront plus longs.  [...]