• Santé - Digestion, Produit, Enzyme, Restriction

test de paternité

Amplification du locus par PCR (à priori par l'enzyme taq polymérase,les amorces étant le plus important pour cibler la séquence intéressante).  [...] Digestion du produit par l'enzyme de restriction (qui varie suivant la squence qui nous intéresse).  [...]

[Biologie Moléculaire] pcr sur colonies clonage

As-tu fait migrer ton premier produit de PCR, celui qui t'a servi à faire le clonage est-ce qu'il est de 1500 ou 200 pb l'as-tu séquencé.  [...] -digestion du produit de PCR et du vecteur par les deux enzymes de restriction.  [...]

[Biologie Moléculaire] éléctrophorèse d'ADN

1- On fait cela pour les ARN, pour éviter que le gel ne présente des formes structurées des ARN et non les formes linéaires que l'on recherche pour déterminer la taille de chaque bande. Sans dénaturer, le profil de migration ressemble pratiquement à un marqueur de PM.   [...] Ceci dit, il est possible que tu es fait migrer des produits de digestion. dans ce cas, l'incubation à 65°C était destiné à inactiver l'enzyme de restriction, pour éviter qu'elle ne continue de couper (spécifiquement puis beaucoup moins) le temps de la migration.  [...]

électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai eu un TP de biotechnologie où on a fait une électrophorèse sur gel d'un plasmide purifié non digéré et d'un plasmide purifié dirigé par deux enzymes de restriction.  [...] Ta première enzyme ouvre le plasmide en coupant à un premier endroit. La seconde coupe à un autre site, et produit 2 morceaux de tailles différentes. d'où les 2 bandes.  [...]

microbiologie - CARTE DE RESTRICTION

prends ton plasmide et effectue des digestions avec une enzyme de restriction particulière (eco R1 par exemple) ensuite fait ton gel et fait migrer ton produit de digestions.  [...] digestion de restriction. certaines protéines sont capables de couper l'ADN à des endroits bien précis (par exemple. gaa. ttc). Ce sont les enzymes de restriction. Dès que l'enzyme trouve son site, elle coupe l'ADN comme tu couperais un bout de ficelle avec un ciseau.  [...]

[Biochimie] enzyme de digestion-restriction

q'elle est la difference entre l'enzyme de digestion ( utilisé avant la technique PFGE) et l'enzyme de restriction.  [...] nb. dans mon travail l'enzyme de digestion est I-CeuI,  [...]

Banque d'ADN

Pour faire des banques de gènes, il faut passer par une banque d'ADNc (extraction d'ARN puis Retro Transcription). Cette technique a par contre le désavantage de sur-représenter les gènes très exprimés dans la banque, et de posséder seulement certains patterns d'épissages (en particulier les patterns cellule-spécifiques).   [...] Suite à la digestion par l'enzyme de restriction, nous obtenons ces fragments.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage orienté, design d'amorces

Pour qu'une bonne digestion se fasse sur un produit pcr, il faut généralement que ton site de restriction soit entouré de nucléotides de part et d'autre. Donc il ne faut pas juste rajouter ton site de restriction à ton primer, mais aussi des nucléotides supplémentaires.  [...] @malesore. une fois ton produit PCR obtenu, tu le purifies avant de digérer par les enzymes de restriction ou tu purifies après l'étape de digestion.  [...]

[Génétique] Systeme GAL4/UAS

1/Insertion du GAL4 avec un promoteur GMR en amont de ce gène dans l'élément P à l'aide d'enzyme de restriction pour retirer le gène dont le produit conduit à la transposase (enzyme). on obtient donc un élément P modifié.  [...] 5/Insertion de LacZ avec un promoteur UAS en amont de ce gène dans l'élément P à l'aide d'enzyme de restriction pour retirer le gène dont le produit conduit à la transposase (enzyme). on obtient donc un élément P modifié.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

L'interêt d'une banque de cDNA comme son nom l'indique c'est de représenter un capital de gènes connus ou inconnus. La fabrication peut se gfaire soit en utilisant comme amorces des hexamers aléatoires ou bien des polyT ce qui permet en théorie de recopier tous les ARN messager possédant une queue 3' polyA.   [...] (Il est a noté qu'il peut être nécessaire de recommencer une seconde fois l'opération pour maximiser la diminution de la redondance). Enfin, nous convertirons ces ADNc simple brin en double brin partiel, en réalisant une polymérisation ménagée à l'aide de la même amorce que précédemment, mais non biotinylé.   [...]