• Santé - Détermination, Action, Enzyme

Détermination du pH optimum d'action d'une enzyme

Bonjour, j'étais entrain de faire ma préparation de TP et après l'avoir presque terminé je me suis rendu que je bloquais sur ces 2 questions, les voici.   [...] - Quelle est la réaction catalysée par l'alpha-amylase sur l'amidon (la formule semi développée de l'amidon est exigée). Préciser la nature des produits obtenus.  [...]

[Biochimie] détermination de l'activité d'une enzyme

Je dois déterminer l'activité d'une enzyme. Le produit formé est des sucres réducteurs qui réagit avec le 3,5-DNS, qui donne du ANS qui absorbe à 530 nm.  [...] £. coefficient d'extinction moléculaire (de la solution qui te donne la coloration et qui te permet de lire l'absorbance), on doit sûrement te la donner si tu dois utiliser cette méthode.   [...]

Origine de la vie : nouvelle preuve de l'apparition spontanée des acides aminés

Les briques de la vie se seraient bel et bien formées il y a 4 milliards d'années dans un environnement gazeux et électrique. Les volcans, notamment grâce à l'émission de sulfure d'hydrogène, auraient permis la fabrication d'acides aminés soufrés, dont le rôle est nécessaire aux organismes vivants.   [...] Des critiques avaient au départ remis en cause cette jolie théorie, argumentant que les acides aminés observés auraient pu provenir d'une contamination de l'expérimentation ou que les conditions dans lesquelles l'expérience avait été réalisée étaient trop formatées.   [...]

[Biochimie] Problème d'enzymologie

Je rencontre un petit problème quant à la détermination des constantes d'un enzyme. Je m'explique. il s'agit d'un enzyme avec intermédiaire covalent ES' qui répond parfaitement à la loi de Michaelis.  [...] On me dit aussi que la fraction d'enzyme sous forme ES' est de 0,41 lorsqu'on est en présence de concentrations saturantes de substrat. Donc cela signifie que [ES'] / [E0] = 0,41 et donc ([E] + [ES]) / [E0] = 0,59 (dites moi si je me trompe).  [...]

Une bactérie s'attaque aux agrumes du Brésil

Seul l'avènement des techniques moléculaires a permis sa caractérisation. Dès 1994, les chercheurs de l'INRA de Bordeaux avaient identifié les deux espèces bactériennes responsables de la maladie en Asie et en Afrique. Candidatus Liberibacter asiaticus et Candidatus Liberibacter africanus.   [...] Les travaux d'analyse génétique sur la nouvelle espèce bactérienne se poursuivent pour faciliter les tests de détection de la bactérie et les rendre plus sensibles. La lutte contre cette maladie nécessite en effet de bien connaître les zones infestées. Or la maladie progresse rapidement puisque le psylle vecteur a déjà été détecté en Floride et dans les Caraïbes.   [...]

[Biochimie] pH optimal et Stabilité d'une enzyme

je dois déterminer le pH et la température optimaux de mon enzyme et je voudrais comprendre la différence entre la détermination du pH optimal et la stabilité de l'enzyme à différent pH (de même pour la température).  [...] je te remercie énormément d'avoir répondu à mes questions et j'en ai d'autres. C'est que la biochimie n'est pas vraiment mon domaine et j'ai parfois des petits casse-têtes. Pour déterminer le pH optimal de mon enzyme, faut-il incuber l'enzyme et le substrat à un pH donné pendant un certain temps et effectuer le dosage.  [...]

[Génétique] Gènes DAX1

je voudrais avoir plus de précision sur le rôle du gène DAX1 dans le determinisme sexuel. Je sais qu'il permait la différenciation ovarienne dons l'appareil généitale femelle mais je ne sais pas comment donc si quelqu'un peut m'aider ça serai cool.  [...] Donc il est peut être nécessaire mais pas suffisant ( Swain A, Narvaez V, Burgoyne P, Camerino G, Lovell-Badge R. Dax1 antagonizes Sry action in mammalian sex determination. Nature. 1998.391.761–767. ).  [...]

[Biologie Moléculaire] Tester la force d'un promoteur

Plus un promoteur est fort, plus le nombre d'enzymes codant le gène de résistance est important et la CMI sera élevée. La CMI est une information qui intéresse généralement les biologistes (jusqu'à quel dose d'antibio est résistante ma souche etc) et son amplitude de variabilité dépend du mode d'action du produit du gène (pompe à efflux inactivation de l'antibio etc.).  [...] Ouais enfin doser l'activite d'un promoteur via une difference de CMI, faut vraiment pas vouloir etre precis. Il est tres nettement plus precis de doser láctivite enzymatique, et pas le phenotype. De plus determiner la CMI d'une souche est une manip assez lourde, en tout cas bien plus que lacZ, Luc ou un autre du meme style et pas vraiment plus legere que la determination de l'activite CAT.  [...]

[Biochimie] Site web interactif de modélisation des cinétiques enzymatiques et détermination des constantes

Les cinétiques enzymatiques ne suivent pas toujours le modèle de Michaelis-Menten. Les modèles cinétiques sont parfois très complexes avec des interactions multiples entre enzymes, substrats, inhibiteurs, modulateurs, à tel point qu'il n'est pas toujours possible de trouver les solutions analytiques décrivant l'évolution des composants du système.  [...] Je ne l'ai pas encore testé mais j'ai utilisé la version standalone très frustre qui m'a rendu bien des services, notamment pour des inhibiteurs nM avec des constantes de dissociation très faibles. On peut directement calculer le kon et koff en se plaçant dans des conditions de second ordre (concentration en enzyme proche de celle en inhibiteur).  [...]

Développement du modèle | Dossier

Comme cela a été vu en introduction, la COX-2 est induite dans de nombreux tissus par divers stimulants comme les antigènes, les cytokines, les facteurs de croissance ou le LPS. Une inflammation aiguë implique différentes réponses comme l'augmentation de la perméabilité vasculaire, l'infiltration des neutrophiles, l'activation des macrophages et la douleur.  [...] Le modèle a été développé dans le but de tester des molécules originales provenant de l'équipe du Professeur Daniel Lesieur de l'Institut de Chimie Pharmaceutique Albert Lespagnol (ICPAL). Le cahier des charges pour élaborer ce modèle a été le suivant. utiliser un modèle cellulaire afin de prendre en compte le transport des molécules testées à travers les membranes, un système cohérent pour la détermination des CI50 pour la COX-1 et pour la COX-2 c'est à dire le même type de matériel cellulaire et des conditions d'activation permettant de stimuler spécifiquement les deux enzymes.  [...]