• Santé - Dépôts, Puits, Concentration

[Biologie Moléculaire] probleme de migration dans une electrophorese

donc on a produit la proteine et on a recolté plusieurs échantillons qu'on voulais faire migrer à la fin du cycle pour voir où il y en a le plus et où il est le plus pure.   [...] le problème est lors de la migration les dépôts dans les puits on commencé à migrer dans le gel de concentration mais au bout d'un moment la migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR: dépôts qui restent dans les puits lors de la migration

Le problème que j'ai est que je ne parviens pas à obtenir de bande à découper sur mes gels (1% agarose dans TAE). mes dépots semblent rester dans les puits, quelque soit la condition considérée.  [...] Piste 3. Controle positif (50ng du plasmide contenant le gène wt). On y devine bien une bande au bon PM, mais celle-ci reste bien trop faible pour être purifiée (et le but est de purifier la bande pour l'ADN patient).   [...]

[Biologie Moléculaire] Migration SDS page en "sourire"

si tu as des puits en rab de chaque coté, dépose du tampon sans protéines (genre laemmli dilué comme si il y avait des protéines) dans chacun des puits libres de chaque coté. Idéalement, il faut centrer les dépots et combler les puits vides de chaque coté.  [...] Cela cause une migration plus lente des échantillons des puits périphériques caractérisé par des bandes protéiques ayant migré plus rapidement au centre du gel, créant un patron ayant la forme d'un sourire... Pour assurer un refroidissement uniforme de tout le gel, diminuer le voltage et augmenter la durée de migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] les ARNs et extraction

Les échantillons sont déposés 2 fois mais à des quantité différente (les puits d'en haut contiennent moins de quantité d'ARN que les puits d'en bas). Je ne vois qu' un smear et dans tous les autres cas on ne distingue rien. Ceci est lié à une dégradation de l'ARN Peut-on dire qu'il y a contamination avec de l'ADN ou des protéines comment expliquer que dans un cas il y a un smear et que lorsque que l'on en dépose plus il n'y a rien merci de vos réponses.  [...] En fait dans les premiers puits en haut on a mis 1ug d'ARN après dilution (on le calcule a partir de la DO) et dans les puits d'en bas sont les mêmes échantillons avec 1µL de solution d'ARN (ça doit faire à peu près 10 µg). Il y a plusieurs puits car plusieurs dépôts on été fait à partir de plusieurs extraction (test de la répétabilité de la méthode).  [...]

Danger liés au BET : bromure d'ethydium

Voilà lors d'un séance de TP en génétique appliquée, nous devions faire des dépots dans les puits du gel qui contiennent du BET. Or un camarade pas très malin, a, après avoir fait son dépot dans le gel ac la micropipette, fait tombé le cone de celle-ci sr m basket, en fait je ne sais mm pas exactement où il est tombé.  [...] Un contact chronique est un contact répété. si vous vous badigeonnez le bras de BET concentré pendant un an tous les matins avec le café, il y a des risques. Mais pas si vous recevez quelques projections de BET super dilué dans de la flotte une fois dans votre vie.  [...]

Les origines de la maladie des corps de Lewy | Dossier

C'est une maladie récemment décrite, dont l'histoire a cependant débuté en 1912 dans un laboratoire alors peu connu, celui d'Alois Alzheimer, le découvreur de la maladie qui porte son nom. Un collègue d'Alzheimer, Frederic Lewy, met alors en évidence, dans le cerveau des patients atteints de la maladie de Parkinson, des dépôts protéiques arrondis, situés dans les cellules nerveuses de la substance noire, une zone du tronc cérébral qui participe au contrôle moteur en fabriquant un neurotransmetteur, la dopamine.  [...] Les dépôts provoquent la mort des neurones, et, par conséquent, une carence en molécules (surtout la dopamine et l' acétylcholine ) normalement fabriquées par ces neurones. C'est pourquoi on traite ces patients avec des médicaments qui augmentent la concentration de ces molécules dans le cerveau.  [...]

MCF7 cellules cancéreuses, 3 bandes ARN?

je travailles sur des cellules MCF7 de cancer mammaire humain donc eucaryote. après mon extraction d'ARN et migration sur gel j'observe 3 bandes or je n'attends que 2 bandes correspondant aux ARN r 18S et 28S.   [...] non ce que je ne comprend pas c'est la 3 ème bande obsérvé lors de mes dépots d'ARN extrait dans chacun de mes échantillons pour n'importe quel puit.  [...]

[Biologie Moléculaire] western blot "semi-quantitatif", pourquoi??

Elle serait quantitative si vous déposiez une gamme de concentration de la protéine que vous souhaitez quantifier. En général ce que l'on fait c'est que l'on utilise une protéine standard (l'actine) et on dilue les échantillons pour avoir la même quantité dans tous les puits.  [...] Il est possible en western blot d'observer des variations de quantité de protéines, mais il faut être prudent pour éviter les biais méthodologiques. par exemple quand j'en faisais, j'utilisais comme référence la quantification d'un de mes échantillons, le même tout au long de la manip, je déposais chaque échantillon en double avec 2 concentrations différentes (ce qui me permettait de vérifier la proportionnalité entre mes 2 dépôts.  [...]

[Biologie Cellulaire] Augmentation du nombre des cancers

Personnellement, j'ai comme un doute sur une relation entre l'augmentation des cancers au Mexique et les dépots radioactifs de Tchernobyl mais bon.  [...] On peut difficilement parler d'augmentation du nombre effectif de cancer, d'autant qu'on porte souvent de petites tumeurs bénignes - certaines deviendront malignes, d'autres pas, et on ignore encore beaucoup des mécanismes en jeu. Mais concernant les pathologies cancéreuses, le recul technologique est insuffisant, puisqu'on dépiste de mieux en mieux et de plus en plus de gens.   [...]

[Divers] Conseils pour un dépôt de brevet

Donc voilà, je suis un simple passionné de biologie qui a fait de très longs travaux et n'a ni les moyens ni la renommée (formation, antécédents, connaissances, etc...) nécessaire à en tirer les fruits. Je le répète, je ne fais pas ça sur un coup de tête et ai de bonnes raisons de penser que ce que je pense est juste.   [...] ..) et pour le fait que des années de manipulations sont nécessaires afin d'obtenir du concret, d'accord, mais à un moment vous évoquez les travaux portant sur des moyens plus simples de prolonger l'espérance de vie, comme une restriction calorique. Je trouve qu'il y a peu de points communs entre ce genre d'étude et la façon dont j'ai procédé.   [...]