• Santé - Densité, Constituants, Séparation

[Biologie Cellulaire] Ultracentrifugation

Bonjour, j'aimerais une petite précision sur l'ultracentrifugation. Je voudrais savoir sur quel paramètre s'appuie cette méthode C'est-à-dire qu'il y a séparation en fonction de la masse, ou de la densité, ou quel paramètre.  [...] C'est une séparation en fonction de la densité. C'est un genre de décantation accélérée en quelque sorte. Le fait de centrifuger exacerbe les différence de densité des différents constituants d'un mélange et permet leur séparation rapide. Par exemple, lorsque dans un tube tu mets un liquide qui formera un gradient de densité, du plus dense au fond au moins dense en surface, tu pourras séparer par exemple les constituants d'une cellule qui iront se placer au cours de la centrifugation à l'endroit ou leur densité est égale à celle de ton support.  [...]

Biologie

gradient un peu plus de contexte aiderait, mais en général quand on veut séparer des constituants cellulaires, on centrifuge sur gradient, c'st à dire que le tube contient une solution dont la densité n'est pas homogène. plus on va au fond, plus c'est dense.  [...] L'avantage est de pouvoir séparer les constituants cellulaires justement selon leur densité. ils se placeront dans la solution là ou la densité du gradient est égale a la leur.  [...]

chromatographiesur papier

je ne comprends comment on peut effectuer des chromatographies avec des mélanges de sovants car, si j'utilise des solvants différents la séparation des molécules du mélange que je souhaite analyser ne va pas s'effectuer en fonction de la solubilité des constituants vis à vis d'un même solvant.  [...] A l'inverse, si on ne prend qu'un solvant très polaire, il entraînera toutes les molécules, mais le problème est qu'on aura une mauvaise séparation des constituants du mélange.  [...]

[Divers] comment extraire l ADN,?

Il existe de nombreux protocoles mais cela dépend principalement du type de cellules dont tu veux extraire l'ADN ou de ton échantillon.   [...] 2°/ Séparation de l'ADN des autres constituants cellulaires (par précipitations, traitements diverse ou colonne de silices...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Manipulation de laboratoire - Extraction d'ARN

Voilà les détails. Maintenant, en pratique, j'extrais l'ARN en utilisant le protocole du Tri-Réagent (par Sigma-aldrich). Mon problème est tout à la base de la manipulation. je n'arrive pas à transformer les ménisques en solutions. J'ai tenté de les mettre dans l'azote liquide et de les broyer avec un pilon mais ils sont tellement dur que ça durcit encore plus mais ça ne se casse pas en poudre.   [...] En théorie oui, il y a des cellules (en faible densité) qui produisent toutes sortes de constituants de la matrice extracellulaire à l'intérieur (comme par exemple le collagène).  [...]

densité optique et bactérie

bonsoir, s'il vous plait quelqu'un pourrait bien m'expliquer c'est quoi la densité optique qu'est ce su'elle a a avoir avec la mesure de la croissance bactérienne autrement dit par quel phénomène se reproduit-il.  [...] La densité optique est un synonyme d'absorbance. L'absorbance augmente avec la concentration en bactérie dans le milieu parce que les constituants des bactéries absorbent/diffractent la lumière. Des profils de croissance de population bactérienne ont été déterminés empiriquement, et une DO de 0.  [...]

[Biochimie] Licence1 biochimie - bio cellulaire

On centrifugue l'échantillon dans un gradient de densité plus important (saccahose avec c. 20% ou CsCl). Les éléments ne se séparent pas en fonction de leur vitesse de sédimentation car on prolonge la vitesse de centrifugation jusqu'à ce que les divers constituants atteignent leur situation d'équilibre (d=dsol).  [...] Ce type de centrifugation est utilisé pour faire du fractionnement cellulaire ou sub-cellulaire, et utilise la plupart du temps un gradient de sucrose qui permet en effet de séparer les différents organites (membrane, noyau, cytosol, endosome, mitochondries,...).   [...]

La protéine du cancer du sein, BRCA2, est enfin purifiée

Le cancer du sein est favorisé par des mutations de la protéine BRCA2. La purification de cette protéine, attendue depuis 15 ans, permettra certainement d'accélérer la lutte contre ce fléau. Crédits DR.   [...] Mais la purification d'une protéine est un chemin semé d'embûches. Chaque étape peut vite devenir un problème. le clonage du gène, l'expression de la protéine dans des cellules (spécialement modifiées pour sécréter en grande quantité le produit du gène inséré), la séparation de la protéine de tous les autres constituants de la cellule, sa solubilisation.  [...]

[Immunologie] séparation des leucocytes à partir du sang de boeuf

j'ai quelques petits points non claires concernant mon tp portant sur la séparation des leucocytes à partir d'un sang de boeuf,on a mélangé 5 ml de sang avec 3 ml de glycérol (pourquoi),d'aprés mes connaiscences il joue le rôle d'anti-coagulant et sert à séparer les leucocytes (je sais pas si c'est juste ou pas),ensuite on procéde à une centrifugation à 200rpm pendants 10min,on résupère l'anneau de leucocytes puis on laves avec du PBS NH4CL (quel est son rôle) je ne sais pas si c'est parceque c'est un sel donc il va lyser les GR par éclatement de ces cellules ou alors il a un autre rôle.  [...] Le glycérol ou le ficoll sert à séparer les différents constituants du sang grâce à la centrifugation. Cette technique repose sur les densités du glycérol et des cellules sanguines qui sont différentes. Après centrifugation, suivant un gradient de densité, le plasma se retrouve en haut du tube puis à l'interface avec le glycérol se trouve les leucocytes, arrive ensuite le glycérol et enfin tout au fond du tube on y trouve les hématies.  [...]

[Biochimie] Peut-on colorer la cholophylle artificiellement ?

Je suis pas sur d'avoir tout compris, mais logiquement oui. La chlorophylle est verte, car ça permet à la plante d'absorber le maximum d'énergie de la lumière. Si tu modifies sa couleur, tu modifieras le spectre d'absorption et donc l'efficacité de la photosynthèse.   [...] La chlorophylle est verte, mais tout est relatif. En séparant les différents constituants, il y a moyen de passer du jaune orangé au bleu.  [...]