• Santé - Demande, Base, Plasmide

[Biologie Moléculaire] Enzyme de restriction

Alors j'ai un plasmide qui fait 5858 paires de base et on nous dit que l'enzyme de restriction EcoR1 coupe a 1,a 948 et a 1582.On me demande de calculer la taille des fragments obtenus apres digestion du plasmide par EcoR1.Je me demande s'il faut soustraire a chaque fois du nombre total de paires de base du plasmide,le nombre de paires de base que coupe EcoR1Sachant que j'obtiens 3 fragments pour ce plasmide si je ne me trompe pas.  [...] une derniere petite question parcontre,on me demande de calculer aussi les fragments attendus dans le cas ou ou il y a plusieurs sites EcoR1 et ou la digestion serait incomplete.Je ne trouve pas cette question tres claire,donc je ne vois pas trop comment faire.  [...]

[Génétique] ADN polymerase

Selon le cours, la plupart des polymérases utilisées en PCR ajoutent une base A en 3' du fragment à amplifier.  [...] Ensuite, les fragments PCR ainsi formés sont utilisés pour une intégration dans un plasmide ouvert qui porte une base U 3' sortants. Est-ce qu'une ligation est possible et spécifique losque la complémentarité entre l'insert et le plasmide vient seulement d'une seule base.  [...]

Y a-t-il une différence entre un spécimen ogm et un non ogm ?

Je ne sais pas pour le BT exactement comment ils on fait, mais si on se base sur les méthodes couramment utilisées, comme l'utilisation de T-DNA, plasmide Ti et agrobacterium, alors en assumant que ce peuple possède notre connaissance en biologie moléculaire, alors oui il pourra, ou du moins si ils étudient très précisement le génome, ils peuvent se demander pourquoi comme de par hasard on retrouve des clusters de sites de restriction qui encadrent la partie codante du gène, (qui sont souvent utilisés pour insérer le gène dans le plasmide afin que la bactérie transmette ce gène, les plasmides possèdent plusieurs sites pour laisser l'experimentateur choisir l'enzyme qu'il veut pour ouvrir le plasmide et insérer le gène dedans).  [...] donc oui ils pourraient car non il n'y a pas que le gène de la protéine en question qi est ajouté, mais tout ce qui se trouve dans la zone du plasmide Ti entre les deux sequences bordantes.  [...]

[Microbiologie] Conjugaison/transposition

Quelle est la différence entre les 2 Pour moi la conjugaison, c'est une bactérie (+) qui file une copie de son plasmide à une autre (-) et la transposition c'est un morceau de plasmide qui s'intègre dans le génome. Sauf que je ne sais pas d'où vient ce plasmide, d'une précédente conjugaison, ou est-il là de base.  [...] Merci de vos réponses et j'espère ne pas être trop à côté de la plaque.   [...]

[Biologie Moléculaire] Ligation ADN plasmidique insert

On me demande de préparer le protocole.nous avons un phage m13 en quantité de 20 à 50 ng que l'On fait digérer par une enzyme adéquate puis on traite à la phosphatase alcaline Pour éviter que le plasmide ne se referme sur lui même.  [...] et on l'a introduit dans une bactérie de souche E.Coli alors que dans tout les exercices fait en TD c'était des plasmides qui était modifié et intégré dans une bactérie.  [...]

Plasmide recombinant

c'est beau essayé de comprendre en lisant et relisant le cours et la correction mais il y apparemment un truc qui m'échappe, donc votre aide sera la bienvenue.   [...] Après ligation de ton plasmide, si tu le redigères, les fragments générés ne sont plus les mêmes qu'au départ. Tu as perdu un bout de plasmide, celui qui se trouvait entre les deux sites de restriction utilisés à la base, et ça a été remplacé par ton insert.  [...]

Vaccins antigrippaux : la génétique inverse et les cultures cellulaires | Dossier

un système à deux plasmides basé sur pol I. un plasmide contenant deux unités de transcription, une pour HA, une pour NA, selon le même schéma que ci-dessus. un second plasmide avec six unités de transcription correspondant aux six autres segments viraux (PB1, PB2, PA, NP, NS, M).  [...] en combinant ces unités de transcription, la génération de virus influenza A dans des cultures de cellules Vero est plus importante 48 heures après la transfection que dans les systèmes à 12 plasmides. L'utilisation d'un ou deux plasmides pour la synthèse des vARN en combinaison avec le plasmide codant pour le complexe polymérase basé sur pol II, donne des titres de l'ordre de 2.  [...]

Carte de restriction

La réponse se trouve dans l'explication juste au dessus. Essayez de réfléchir en quoi le changement d'une base dans le plasmide pourrait créer un nouveau site de restriction surnuméraire.  [...] Les fragments de 1000pb et 2000pb forment le grand fragment de 3000pb chez le plasmide A. Il y a donc eu une mutation dans le fragment de 3000pb. Donc je peux emettre l'hypothese d'une substitution de paire de base dans ce fragment (3000pb)qui entrainerait une mutation du plasmide A en B.  [...]

[Biologie Moléculaire] insertion d'un tag HA au milieu d'une sequence.

J'ai un plasmide contenant la sequence codante d'un recepteur. Mon encadrant me demande de mettre un Tag HA au sein de cette sequence.  [...] Si vous voulez reproduire exactement la construction qu'ils ont réalisé, le mieux est de leur demander carrément qu'ils vous en envoient un échantillon. Cela évite de refaire des manips inutilement et de leur côté, ça leur assure de figurer dans les remerciements de la publication que vous ferez avec leur construction.  [...]

[Biologie Cellulaire] genetique extrachromosomique

un plasmide est un ADNcirculaire extrachromosomique portant peu d'informations genetiques par rapport au chromosome et ne code pas pour des informations d'ordre vitale.  [...] alors le plasmide contient un nombre de gene entre 30 et 300 paire de base. et aussi les informations qui portées par le plasmide sont suplimentair et donnent bcp d'avantages au cellules.  [...]