• Santé - Cultures, Primaires, Neurones

[Biologie Cellulaire] Neurone sans glie

je projette de travailler sur des cultures primaires de neurones. Le problème dans cette configuration c'est que l'on se retrouve avec une population hétérogène (neurones et cellules gliales). Il existe pour cela un produit (cytarabine) utilisé en chimiothérapie qui joue sur le fait que contrairement aux cellules nerveuses, les cellules gliales se multiplient et sont sensibles à ce composé (meurent) On se retrouve donc avec des cultures neuronales purifiées sans glie, par contre ces mêmes neurones n'ont plus d'activité.  [...] J'utilise ce proto pour du patch-clamp et cela marche très bien, les neurones sont bien fonctionnels. C'est un protocole assez bateau que tu peux retrouver facilement sur pubmed avec les mots clés rat hippocampal culture.  [...]

[Biologie Cellulaire] Recherche type cellulaire fragile à la congélation

Je sais que dans mon labo on a du mal à congeler les cultures primaires de neurones. Quand on essaye de les congeler, on perd environs 70% des cellules, et encore, les cellules restantes ne sont souvent pas des neurones.  [...] Mais si tu est interessée, par ces cellules, je suis pratiquement sur qu'il y a un centre de recherche de neurologie près de ton labo qui pourrait t'en donner.  [...]

[Biologie Cellulaire] cultures cellulaires primaires

Si tu ne précises pas un minimum ta question, personne ne pourra te répondre. Quels réactifs utilises-tu pour faire tes cultures primaires Car selon les types cellulaires, la composition du milieu change.  [...] Les besoins varient en fonction des cellules. De plus, certaines cellules, en particulier les cultures primaires, ont parfois besoin d'un substrat pour adhérer (collagène, fibronectine,...).  [...]

culture cellulaire de cellules souches

Vous voulez maintenir les cultures longtemps à l'état indifférencié, ou vous voulez faire une culture de neurones différenciés.  [...] SI vous désirez maintenir une culture de neurones primaires, il faut les sélectionner à partir de l'état de stem cell, et donc coater les boïtes à la laminine (pour avoir une substrat orientant) ou à la poly lysine ou à la poly ornithine pour avoir un substrat neutre, et ajouter dans le milieu de base neurobasal de l'acide rétinoïque, du sérum, et des facteurs mitogènes à très basse concentration, en ajoutant biensur B27 et glutamine.  [...]

Culture cellulaire primaire

Avant d'être mis en culture, ce prélèvement doit être au préalable traité. il faut dissocier et isoler les cellules (dissociation chimique avec par exemple du SDS, de l'EDTA).  [...] Mais du coup, une fois tous les traitements effectués, notre culture cellulaire contient un peu de tout les types de cellules. Comment fait-on pour n'obtenir qu'un seul type de cellule par la suite.  [...]

Regarder à droite et à gauche en même temps

On me dit que l'oeil n'est pas fait pour cela, qu'il ne peut pas faire autrement que de fixer un point en particulier, mais ça ne me dit pas ce qui est en cause de ça, ça me dit simplement que les choses sont ainsi et que c'est naturel, mais quel est la cause qui nous empêche de voir deux parties de notre environnement simultanément Musculaire Neurologique Autre.  [...] La vision stéréoscopique est due, en grande partie, aux neurones binoculaires situés dans le cortex cérébral au niveau des zones spécifiques et primaires du traitement de la vision (Aire V1). Ces neurones binoculaires sont les seuls neurones à recevoir l'influx nerveux de deux neurones homonymes de la rétine via la chaîne neuronale.  [...]

télomère et prolifération

C'est faux. Les cellules primaires sont synonymes de cultures primaires. Elles ont été prélevées depuis un organisme et ont une capacité de division limitée (limite de Hayflick = limite de divisions). Cela s'oppose aux lignées cellulaires et aux cellules souches qui sont immortelles, c'est-à-dire qui n'ont plus cette limite et peuvent se diviser virtuellement indéfiniment.  [...] C'est pour ça que ton cours parle de télomères pour les cultures primaires car ils vont jouer un rôle dans l'arrêt des divisions (sénescence cellulaire).  [...]

[Biochimie] matrigel et Cellules satellites

je réalise des cultures primaires de cellules satellites de souris sur du matrigel.  [...] Si tu utilises la collagénase tu vas détacher tes cellules. C'est curieux que le matrigel interfère avec le tampon de lyse. As tu essayé d'autres tampons de lyse Le coating matrigel est indispensable Tu ne peux pas faire la culture sur un coating plus simple.  [...]

[Biologie Cellulaire] Immunocytolocalisation - Anticorps primaire 3-4h ?

Je dois faire des immunolocalisations sur cultures cellulaires. Mon anticorps primaires fonctionnent vraiment très bien (anti-FLAG M2).  [...] PS. j'ai toujours pour ma part fixer mes cellules, 15 minutes de fixation, 1H de marquage primaire, une heure de secondaire, en commencant le matin tu peux meme allez observer tes cellules l'apres midi.  [...]

[Biotechnologie] le cartilage peut se dédifférencier?

Contrairement à ce qu'on pourrait croire, nous possédons des cellules souches dans tous nos tissus, même des cellules souches neuronales, et il existe bien une neurogénèse adulte. Donc là, on parle bien de différentiation de cellules souches. Et effectivment, c'est un grand enjeu pour la recherche de réussir in vitro à orienter des cellules souches vers telle ou telle voie de différentation, grace à des cocktails de facteurs de croissance, cytokines.  [...] C'est tout le souci des cultures primaires, parvenir à les établir et à les maintenir le plus longtemps possible, tout un art.  [...]