• Santé - Culture, Cellules, Lignée

[Biologie Moléculaire] Transfection Huv-ec-c

Depuis cette semaine, je tente un nouveau transfectant qui est le jet-PEI Huvec (normalement pour culture primaire mais je ne vois pas pourquoi cela ne marcherait pas en cellules en lignée) et rebelote. rien du tout.  [...] Est ce que vous avez fait varier la confluence de vos cellules La qualité de transfection est très confluence dépendante. Sinon, vous entretenez cette lignée depuis longtemps Parfois, en vieillissant les cellules se laissent moins transfecter. En général, on préfère faire les transfections sur des cellules récemment décongelées et remises en culture.  [...]

rats KO

Enfin certes la recombinaison homologue est théoriquement possible chez tous les mammifères mais à condition que l'on puisse maintenir les cellules ES de l'espece en culture, ce qui n'est pas le cas chez le rat il me semble...(car on transfecte les cellules ES par un vecteur contenant le marqueur, on selectionne les cellules ES ayant intégré le vecteur et on les réinjecte dans un blastocyte que l'on implante chez une mère porteuse).  [...] D'autre part, maintenir des cellules ES en culture ne pose pas de problème particulier, c'est de la culture cell classique. En ce qui concerne les cellules ES (Embryonic Stem Cell), ce sont des cellules d'embryon de souris et pas d'un autre organisme (la lignée ES est une lignée murine).  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture primaire de monocytes

Il est normal que des cellules issues de sang périphérique meurent pour la plupart dans un milieu de culture. Cela aurait été plus inattendu si les cellules était issu d'une lignée déjà établie en culture. La population cellulaire devrait se stabiliser à un moment donné puis augmenter.  [...] Des lignées de monocytes existent en culture cellulaire. Peut-être faut-il les transformer pour qu'ils puissent se diviser sans différenciation, je pensais qu'ils pouvaient spontanément proliférer en culture, d'où ma réponse, désolé.  [...]

[Biologie Cellulaire] les cellules souches hématopoiétiques

Si tu connais le nom exact de ta lignée cellulaire, tu peux regarder sur le site de l'ATCC pour connaitre les conditions de culture et sous-culture. Certaines cellules nécessitent des solutions spécifiques pour les décoller qui sont un peu moins aggressives que la trypsine.  [...] Tu peux aussi regarder la flasque au microscope, les cellules non adhérentes sont plutôt rondes ( et ont tendance à bouger si tu remue un peu la flasque ), alors que les cellules adhérentes prennent une forme plus allongée.  [...]

[Biologie Cellulaire] Question sur électroporateur NEON

De manière générale, je n'ai pas trouvé l'efficacité de transfection très impressionnante (cellules primaires), et la mortalité semble plus basse que dans les anciennes versions double plaque életrode.  [...] Pour finir, j'ai essayer la transfection avec des nanopeptides (Sigma) et cela fonctionne bien mieux (je parle de transfection sur cellules en culture primaire). Pour les cellules en lignée, la lipofectamine RNAiMax (Invitro) est impeccable.  [...]

[Biologie Cellulaire] gros besoin d'aide: toutes mes cellules C2C12 sont mortes!

Je viens de redémarrer un labo de culture cellulaire, et lundi, j'ai ensemencé mes premières cellules pour amplification.  [...] J'ai du mal à comprendre qu'on te laisse gérer tout cela toute seule. La culture cellulaire ne s'improvise pas et il faut bénéficier d'un bon encadrement lorsqu'on débute de nouvelles méthodologies appliquées à la culture cellulaire, surtout pour la congélation/décongélation de cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] identification de cellules en culture

Bonjour, je voudrais savoir comment je peux identifier les cellules que j'utilise en culture cellulaire, je voudrais etre sure que je travaille sur la bonne lignée.  [...] est-ce que tu as lu une revue lab time qui parlait de fausses lignées cellulaires je travaille sur des PC-3 et elles sont citées dans l'article mais je n'ai pas le matériel necessaire pour faire de la bio mol, qd tu parles de marquage, tu parles de quel type de marquege.  [...]

[Biologie Moléculaire] La culture cellulaire

SVP j'ai un problème de compréhension de cette méthode. la culture cellulaire je voudrais savoir les étapes suivies pour réaliser la culture cellulaire, j'essaye de chercher sur net mais les resultats me désappointent.  [...] En gros la culture cellulaire c'est une technique de diagnostic direct qui permet de mettre en évidence directement un agent infectueux en utilisant une lignée cellulaire bien définie qui lui est spécifique.Les conditions de culture sont un peu liées aux propriétés des cellules à savoir présence de CO2, température d'incubation, présence de certains sels dans le milieu deculture utilisée,  [...]

Décès dû à E. Coli : une nouvelle souche O145 en cause

Il s'agit donc d'une souche différente de celle (O104) qui a fait quarante-huit victimes en Allemagne et qui est responsable de l'infection de six des sept patients encore hospitalisés au CHU de Bordeaux à la suite d'une consommation de graines germées. Cette infection par la souche O145 reste un cas isolé, explique l'ARS Aquitaine interrogée par Futura-Sciences.   [...] coli ou E. coli productrice de vérotoxine), autrement appelées souches STEC ( shigatoxin-producing E. coli ou E. coli productrice de shigatoxine ), expriment des gènes stx codant des vérotoxines, toxiques pour certaines cellules, notamment pour les cellules Vero en culture (une lignée cellulaire issues de reins du singe vert africain), d'où elles tirent leur nom.  [...]

[Biologie Cellulaire] Expression des protéines

1. Quand les cellules commencent à exprimer les protéines dans un milieu de culture ( surtout les protéines mitochondriales et celles de la matrice extracellulaire pour les myotubes, lignée C2C12 ) je crois après 48h mais je voudrai confirmer cette infromation.  [...] Tu m'aurais parlé d'une simple transfection d'un plasmide codant un ADNc dans une cellule de mammifère, on pouvait avoir un ordre d'idée mais là c'est beaucoup trop compliqué pour avoir un a priori. Il faut que tu testes plusieurs conditions.  [...]