• Santé - Courbe, Anticorps, Bruit

Cytométrie en flux

ma figure est en PJ. la courbe grise est l'anticorps anti-clip, la courbe grise l'anticorps anti-DR et la courbe blanche le bruit de fond.  [...] C'est bien, mais je pense que justement les deux lignées se distinguent par le marquage CLIP. la M10.D n'en n'exprime quasiment pas (et est en effet superposable au bruit de fond), alors que pour l'autre les signaux ne sont pas superposables (vu l'échelle logarithmique tu as quasiment un facteur 10).  [...]

[Immunologie] Lire une courbe de cytométrie de flux

(un avis quand même. la superposition de la courbe en fond blanc et de la courbe en fond gris signifie que la cellule n'exprime pas les CDs, alors que lorsque la courbe a fond gris s'exprime en dehors de la courbe a fond blanc, il y a bien présence de Cds a la surface cellulaire.  [...] En effet, les histogrammes (et non les courbes) sur fond blanc sont obtenus avec les anticorps isotypiques couplés au même fluorochrome que pour le réel anticorps, ça permet de définir le bruit de fond.  [...]

[Biochimie] Western Blot

Pour certains anticorps on recommande le TBS plutot que le PBS. J'ai notamment vu cela pour des anticorps anti-phospho.  [...] En ce qui concerne les temps de lavage, 3x10 min en 1ere intention est une bonne stratégie. Tu peux ensuite adapter en fonction de ton anticorps. Plus de lavage s'il y a des fixation aspécifiques, et du bruit de fond sur la membrane. Moins de lavage (en durée) si l'anticorps est très spécifique, que ton signal est fort, et donc que tu fais des expositions courtes.  [...]

[Méthode d'étude] Immunochimie : Etape de contrôle.

L'anticorps non immun est un contrôle qui est parfois fait et qui permet de détecter le bruit de fond généré par le type d'anticorps primaire utilisé.  [...] Pour la bruit de fond, il s'agit du signal aspécifique observé, c'est une propriété du signal, c'est ce que j'ai appelé le bruit du signal. L'anticorps non immun est supposé se fixer nul part. Sa fixation est toujours considéré comme aspécifique. Ainsi, en utilisant le même isotype que l'anticorps primaire, on suppose que l'on va reproduire le bruit de fond généré par l'anticorps primaire (personnellement je trouve ce contrôle assez aléatoire et plutôt trompeur au final.  [...]

Conservation des anticorps précédent immunofluorescence

Rassure moi. ce sont les dilutions de tes anticorps PRIMAIRES... Pas secondaire j'espère sinon tu dois exploser le bruit de fond.  [...] PRIMAIRE et SECONDAIRE, et pas de bruit de fond. Mes primaires vont de 1/500 pour un anticorps donné mais le max que j'utilise c'est 1/2000. Il s'agit surement d'anticorps très spécifique car j'ai mes structures très bien marquées. Pour le secondaire, j'utilise toujours 1/500 en dilutions quelque soit le primaire =).  [...]

[Biologie Cellulaire] PBS ou TBS

Tout d'abord à quoi cela sert d'avoir des tampons salins. Pour éviter l'agrégations des protéines et des anticorps sous l'effet des forces électrostatiques. Les ions de petites tailles viennent former un écran autour des protéines chargées. En cas de bruit de fond on peut augmenter la force ionique de la solution en poussant la concentration de NaCl jusqu'a 0,5M.  [...] Maintenant quand utilise t'on le PBS Tout le temps, (surtout en utilisant de Ac monoclonaux ou le TBS est moins bon) sauf quand on veut révéler un anticorps marqué à la phosphatase alcaline (car le PBS apporte une grande quantité de phosphate inorganique).  [...]

[Biochimie] Ihc

pouvez-vous m'expliquer ce qu'est un bruit de fond en IHC et l'effet fond noir, s'il vous plaît. on dit que lorsqu'on marque un antigène avec un anticorps couplé à un fluorochrome, il y a peu de bruit de fond, mais qu'il peut y avoir un effet fond noir au microscope. De plus à quoi est dû ce bruit de fond.  [...] Il me reste maintenant à comprendre ce qu'on veut dire par fond noir.   [...]

[Biochimie] Différence entre tween, triton x, NP ... ?

Voilà, je voudrai utiliser un detergent non ioniques (le moins dénaturant possible pour mes protéines) pour diminuer les adsorptions non specifiques d'anticorps ou autre protéines d'interet sur un test qui se rappoche de l'ELISA.  [...] Dans ton contexte (des cupules normalement en ELISA) tu prendrais un risque de conserver des agrégats et (1) de conserver des saloperies dans tes puits qui génereraient du bruit de fond en liguant les anticorps (2) de fausser tes DO du simple fait de leur présence.  [...]

Audiogramme

Dans un audiogramme si une personne a un probleme de transmission la courbe qui ce trouve abaissé est la courbe correspondant à une surdité de perception alors que la courbe liée a une surdité de transmission reste normal. Ce serait l'inverse normalement.  [...] La perte de transmission auditive, c'est quand le bruit n'atteint plus l'oreille interne à cause, par exemple, d'un bouchon de cérumen, d'un trou dans le tympan ou d'un dysfonctionnement des osselets. Je doute que cela puisse se traduire par une courbe sur un audiogramme mais je ne suis pas expert.  [...]

Immunohistochimie

Mais bon j'ai sois un trop faible marquage limite douteux soit trop de bruit de fond. Je ne sais plus quoi faire (passage des lames au microonde, utilisation d'un diluant dako pour l'anticorps primaire etc).  [...] C'est de la paraffine. Concernant l'Ig1, oui il reconnait bien la bonne protéine, mon positif est bien positif. Par contre je viens de l'acheter donc je sais pas si il est super spécifique, je fais encore la mise au point, et dans la biblio ils n'ont jamais essayé de trouver ce recepteur sur les cellules en gobelet, donc en fait j'ai même pas d'images ni rien pour sa oir si ma protéine est fortement exprimée.   [...]