• Santé - Contrôles, échantillons, Intérêt

applications de la PCR

Le problème des échantillons étudiés dans le médical est qu'on peut retrouver des inhibiteurs de PCR dans les prélevements. faux négatifs. D'où l'intérêt du développement de contrôles internes.  [...] En cherchant un peu plus, j'ai également découvert que la PCR sert également à provoquer des mutations... très interessant. Avez-vous des cas concrets à m'évoquer.  [...]

[Immunologie] Immunologie, Treg, FoxP3, Navios!!

Ce qui est très important c'est de faire subir le même traitement aux vrais contrôles, c'est à dire les échantillons marquées avec isotype contrôle et les marquages contrôle fmo (fluorescence minus one). Et surtout choisis les bons fluorochromes (ie ceux avec une intensité forte) pour foxp3 et CD25 vu que les marquages peuvent être faibles et pas définir des populations très claires, respectivement PE et APC c'est ce qui marche le mieux à ma connaissance.  [...] dans ce cas, je n'aurai pas de problème de taille/structure lorsque je passe mes contrôles et mes échantillons d'intérêt je peux être complètement à côté de la plaque.  [...]

Jeux olympiques d'hiver et dopage : comment sont contrôlés les athlètes ?

Le Code donne d'abord une liste des produits dopants et des méthodes interdites. Ainsi, des agents anabolisants, des hormones peptiques ou facteurs de croissance, des diurétiques ou agents masquants ou encore, des narcotiques font partie des interdits. Il définit ensuite un standard international pour les contrôles et les enquêtes (SICE) destiné à planifier des contrôles efficaces - contrôles urinaires ou sanguins -, qui permettent de préserver l' intégrité et l'identité des échantillons prélevés, du moment de la notification du sportif jusqu'à l'arrivée au laboratoire.  [...] C'est grâce à la spectrométrie de masse que les laboratoires accrédités étudient les échantillons qui leur sont confiés. Elle permet en effet de déterminer la masse d'une molécule avec une très grande précision. Et ainsi de remonter à la composition de la molécule en question.  [...]

Signal de western-blot plus fort a 1 minute que sur la nuit

Mes échantillons contrôles, qui me donnent un très fort signal après 1 seconde d'exposition d'habitude, n'ont plus donné signe de vie.  [...] J'ai tenté de charger un peu plus mon gel, et j'ai eu un faible signal au bout d'une minute. Ceci étant mes échantillons contrôles, je ne voyait pas encore mes échantillons a analyser, j'ai donc laissé sur la nuit.  [...]

Définition | Dopage | Futura Santé

D'autres méthodes sont interdites, comme la transfusion sanguine, qui consiste à injecter un sang plus riche en globules rouges, ou le dopage génétique. Un sportif ne peut pas refuser de se soumettre à un contrôle anti-dopage. Les contrôles utilisent des échantillons de sang ou d'urine.  [...] Le Tour de France et les Jeux olympiques ont été le théâtre de nombreux événements liés au dopage. Ainsi, en 1967, le champion du monde Tom Simpson est décédé au mont Ventoux. il prenait des amphétamines. Les premiers contrôles anti-dopage aux Jeux olympiques ont démarré en 1968 à Mexico.  [...]

[Biologie Moléculaire] Interprétation PCRq en temps réel (SYBER Green)

Le problème c'est pour la suite, on doit rendre un résultat scientifique (j'ai déjà calculé le % de contamination et je suppose que je doit utiliser les données fournies mais à part la concentration en ADN total, je ne vois pas ce que je dois faire des autres ) et un autre que même l'agriculteur producteur des échantillons est capable de comprendre (importance des dégâts, traitement possible si oui lequel...).  [...] Tu dis avoir fait une régression avec le résultat de tes échantillons...qui devaient être des contrôles avec des concentrations d'ADNc connus afin de réaliser une gamme et de venir placer le résultats de ton échantillons test dessus, n'est ce pas.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment analyser les résultats de PCR quantitative???

En quantité constante dans tous les échantillons, il normalisera les biais d'extraction ou de contamination et les variations d'efficacité éventuelles de la transcription inverse. Il donnera ainsi en quelque sorte une image de la quantité de matrice apporté (ADNc).  [...] Je viens de faire ma première PCR sur des échantillons avec une melt curve pour vérifier la spécificité de l'amplification. Mon problème est avec le seuil du melt peak car je n'arrive pas à comprendre ni à trouver sa signification dans l'analyse. J'ai des puits qui sont en dessous de ce seuil mais qui ont une courbe d'ampli normale, un seul pic au bon Tm. Que dois je en déduire.  [...]

[Microbiologie] Viabilité d'une bactérie et ARN

Ton meilleur controle est définitivement un control dans lequel tu traites ton echantillons a la RNAse...car si dans ce cas le signal disparait alors c'est que ton produit d'ampli venait des ARN, en revanche si il y a quelquechose, c'est que tu as toujours de l'ADN contaminant.  [...] Ce que tu proposes (enlever l'enzyme RT), ne resoud pas le problème si ta Taq-polymerase possede une activité reverse transcriptase, dans tes témoins tu auras toujours une ampli...tu en conclueras que ton echantillon est contaminé par de l'ADN, alors qu'en réalité il n'en n'est rien.  [...]

[Biologie Cellulaire] etude du niveau de phosphorylation d'une protéine en WB

je souhaite étudier l'état de phosphorylation de la protéine FAK, dans des cellules surexprimant une protéine d'intérêt par rapport a des cellules contrôles.  [...] Pour l'extraction, si tu veux conserver les phosphorylations de ta protéine, il faut de l'orthovanadate de sodium (inhibiteur de phosphatase) dans le tampon et éventuellement d'autres inhibiteurs. Mais surtout garder les échantillons dans la glace le plus possible une fois l'extraction faite, cela limite d'autant plus les déphosphorylations.  [...]

Traitements des données en QPCR

Dans une première manip, je vais faire deux courbes standart (une pour le gène de référence et une pour le gène d'intérêt) et je vais mettre tous mes échantillons (ADN immunoprécipité, plus le tube sans anticorps ) avec chacun des deux couples de primers.  [...] Elle s'assurait juste que les valeurs Ac/Sans Ac pour le gène de référence et pour le gène d'intérêt étaient similaires dans ses cellules contrôles (non traitées).  [...]