• Santé - Congélation, Techniques, Cellules

methodes de cryopreservation des cellules

la congélation lente et la vitrification sont les deux techniques employées pour cryoprésever les cellules.j'ai écris dans mon cours que pour conserver les cellules il faut descendre en température lentement par tranche de température de 20° à 0° PUIS FRANCHIR RAPIDEMENT 0° à-5° puis redescendre lentement de -5°à-156° POURQuOI spécialement ces paliers de température et pourquoi aller vite ou moin vite par foisque se passe t il à chaque étape ou k cherche t on à éviter par chaque étape.  [...] ET pour la vitrification on prend les cellules on les met ds quelle type de solution(tampon peut etre doit on rajouter du milieu de culture)on rajoute le melange de cryoprotecteurs en suite j'imagine qu' on met le tout dans un cryotube ou paillette puis on place ds la bonbonne d'azote liquide.  [...]

[Biochimie] Avatar - Le film

Un peu à la manière de quand on se jète d'un immeuble le plus dur n'est pas la chute mais l'atterrissage je crois que le plus dur n'est pas la congélation mais la décongélation durant laquelle les cellules éclates... Les avancées sont je pense nettement ralenties par l'éthique.  [...] La première, on arrive à préserver par congélation des cellules évidemment mais aussi des embryons. La difficulté n'est pas tellement de réussir à congeler et décongeler une cellule. Le fond du problème est que la congélation brute entraine la formation de cristaux de glace dans les cellules et ce sont ces cristaux de glace qui entraine la casse des cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

Une réfrigération brutale, par exemple en plongeant l'échantillon dans l'azote liquide les cristaux sont microscopiques et c'est la raison pour laquelle des cellules comme les spermatozoïdes supportent la congélation sans être détruits.  [...] La surgélation est une technique industrielle qui consiste à refroidir brutalement (quelques minutes à une heure) des aliments en les exposant intensément à des températures allant de -35 °C à -196 °C. Grâce à ce procédé, l'eau contenue dans les cellules se cristallise finement limitant ainsi la destruction cellulaire dixit wikipedia mais ils ont du la prendre d'ailleurs et elle correspond à la réalité.  [...]

Poumons artificiels : une transplantation réussie chez le cochon

Dans cette étude, ils avaient détruit les cellules d'un poumon de rat par plusieurs cycles de congélation-décongélation puis avaient utilisé cette carcasse pulmonaire comme support pour faire croître de nouvelles cellules. Cette fois-ci, ils ont atteint un stade supérieur jamais égalé en appliquant cette technique chez l'Homme.  [...] La greffe d'organe révolutionnée par les cellules souches Chaque année plus de 5.000 personnes bénéficient d'une greffe d'organe en France. Ces patients sont soumis à un lourd traitement pour empêcher le rejet suite à leur opération. Découvrez en vidéo et grâce à Discovery Science une technique basée sur les cellules souches qui pourrait permettre de contrer ce problème.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cryoconservation embryonnaire : comment les cellules repartent à la vie ?

ben à partir du moment ou on respecte l'intégrité physique des membranes et des acides nucléiques, entre autres, (et c'est le plus critique) la congélation arrête tout processus métabolique (comme sur pause ). Et cela fonctionne pour des cellules non embryonnaires aussi (des cellules primaires, immortalisées, tumorales, etc...).  [...] la congélation arrête tout processus métabolique (comme sur pause ). Et cela fonctionne pour des cellules non embryonnaires aussi (des cellules primaires, immortalisées, tumorales, etc...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Recherche type cellulaire fragile à la congélation

Je me lance prochainement dans des tests de congélation/décongélation, et j'aimerai faire ces tests sur des cellules fragile à la congélation, afin de vérifier le bénéfice apporté par la méthode, et la robustesse de la technique.  [...] Je me permets de revenir à la charge. si quelqu'un a connaissance de types cellulaires qui ont du mal à supporter la congélation, n'hésitez pas à m'en faire part.  [...]

[Biologie Cellulaire] HEK et nitrogène

Je ne l'ai pas fais moi même donc je ne peux pas vous aider d'expérience. Cependant ce qui est certain c'est que la congélation directe n'est pas indiquée. Il faut utiliser des ampoules spéciales que l'on plonge dans je ne sais plus trop quel bidule (pas immédiatement de l'azote liquide) qui va refroidir progressivement les cellules. Ce n'est qu'ensuite que l'on congèle à -80°C.  [...] Ce qui pourrait poser problème c'est votre technique de congélation qui dégraderait les cellules. Ensuite une fois à -80°C ça ne bouge pas mais quand vous souhaitez les remettre en culture ben là, vous avez bien des cellules mais elles sont mortes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Au secours : Pb à la décongélation de cellules

La vitesse de congélation. Avez vous mis immédiatement les cellules au froid après les avoir mises en ampoule, ou avez vous eu un délai. celà peut tout tuer si le DMSO (utilisé en général entre et 1à et 20% dans les freezing media) donnant une forte pression osmotique a été trop longtemps en contact avec les cellules.  [...] Ce sont uniquement les miennes qui ne repartent pas. Pourtant, j'ai suivi à la lettre le protocole de décongélation. décongélation rapide de l'ampoule à 37°C puis je mets les cellules dans 5ml de SVF pur, je centrifuge et je reprends dans du milieu RPMI (leur milieu de culture) et enfi je le mets à 37°C, 5% CO2.. Très peu avait adhéré le lendemain.  [...]

[Biologie Cellulaire] Induction d'apoptose 3T3

Est-ce qu'on peut retrouver ce résultat soit en laissant les cellules plusieurs jours dans très peu de milieu et sans le changer, ou en mettant nos cellules dans du milieu de congélation sans les congeler (si oui, après combien de temps environ).  [...] Pour la congélation des cellules, il me semble qu'il faut un congélateur à -80°C, on ne peut pas les passer directement de -20 à -180, si.  [...]

[Biotechnologie] Protocole congélation de cellules et ELISA

[Biotechnologie] Protocole congélation de cellules et ELISA.  [...] Je vous demande svp de me passer le protocole de congélation des cellules depuis quelle densité cellulaire dans le flask (70% ou 80% ou)... jusqu'au les mettre dans de l'Azote liquide. Si vous avez une image de la boîte où l'on mets les vials je vous remercie encore plus.  [...]