• Santé - Congélation, Azote, Liquide

[Biochimie] Congélation dans l’azote liquide puis conservation dans le congélateur -80c°

Je dois doser une enzyme chez un gastéropode marin, mais je ne peux pas le faire dès l'échantillonnage. Le protocole de travail me dit que dans ce cas, je dois congeler l'organisme dans l'azote liquide puis le conserver dans le congélateur -80c°.  [...] quelques secondes suffisent pour congeler dans l'azote liquide. pour la decongelation mieux vaut tout mettre dans la glace.  [...]

[Biologie Cellulaire] cultures cellulaires primaires

selon lemode opératoire, ils ont congelé les cellules par l'azote à -80 C°, puis ils ont utilisé du réactif DMEM avec un sérum bovin et des antibiotiques pour le milieu de culture.  [...] Le DMSO est utilisé lors de la congélation en azote liquide pour protéger les cellules.  [...]

[Biochimie] 1,2,3 mammouth !

Parce que l'ADN sans les chromosomes, et les chromosomes sans cytoplasme ovulaire capable de l'accueillir, c'est comme le listing d'un programme informatique sans ordinateur ni système d'exploitation.   [...] Parce qu'ils sont en trop mauvais état (souvent même ça pue la charogne). Ce n'est pas une congélation dans l'azote liquide.  [...]

[Biochimie] Résultats d'expériences de congélations d'EV

Est-ce que quelqu'un pourrait me fournir des résultats de congélation sur des être-vivants.  [...] congélation classique j'entends. pas la congélation lente à l'azote liquide.  [...]

[Biologie Cellulaire] Utilisation du FACS

Ils nous ont aussi conseillé de fixer nos cellules soit en formol 2% soit en PAF 4% et de congeler azote liquide pour conserver. J'imagine bien évidemment qu'il faut rincer les cellules fixées avant de les congeler... La congélation est elle obligatoire, j'ai fait de l'immunoloc sur cellules et je n'ai jamais congelé j'ai toujours conservé mes préparation à 4°.  [...] Ma cinétique se déroulerait sur 40 jours et ça va être très difficile de le faire sur cellules fraiches. D'où la mise au point d'une methode de fixation/congélation la moins dénaturante possible. D'après ce que j'en sais la congélation à l'azote liquide devrait vitrifier l'eau ce qui n'endommage pas les cellules au moment de la décongélation mais c'est vrai que j'ai quand même quelques craintes.  [...]

durée de vies des spermatozoïdes?

Une congelation rapide dans l'azote liquide evite la formation de critaux de glace qui detruisent les cellules. une fois congelé les cellules peuvent etre conservées pendant tres longtemps.  [...] Juste pour compléter ce qui a déjà été dit. L'étape la plus délicate lorsque l'on travaille sur des cellules congelée dans l'azote liquide (ou à moins 80), c'estla décongélation parce qu'on reprend les cellules dans du milieu de décongélation (milieu de culture additionné d'autres éléments) mais il faut faire attention à prendre uniquement le glaçon de cellules.  [...]

Féconder des souris avec du sperme congelé, 15 ans plus tard

par exemple, une souris génétiquement modifiée pour reproduire une maladie humaine. Or le sperme de souris est très sensible à la congélation, que ce soit à -20°C, -80°C ou encore à -196°C (azote liquide ). lors de la cryogénisation, les parois cellulaires des spermatozoïdes se rompent, ce qui les détruit.  [...] Pour faciliter cet échange, Atsuo OGURA et son équipe ont simplement appliqué une technique de fécondation in-vitro. Ils ont récupéré le nucleus d'un spermatozoïde congelé et l'ont inséré dans un ovocyte grâce la technique d'injection intra-cytoplasmique ( Intracytoplasmic Sperm Injection ), par ailleurs utilisée en cas d' infertilité humaine.   [...]

[Biochimie] Conservation par azote liquide

Merci de votre réponse. Je vais travailler sur des reins complet en premier et dans le but de voir si la congélation n'affect pas les propriétés mechaniques du rein après un cycle de congélation/décongélation. C'est pas claire pour moi cette méthode à l'azote l'équide.  [...] Pour être plus claire, je souhaiterai mesurer le module d'élasticité du tissu rénal (rein de porc) avant et après congélation afin d'extraire les effets du cycle de congélation/décongélation. Dans mon cas je vais faire une congélation normal où je mets le rein dans un congélateur à -20°C par exemple et d'autre dans l'azote liquide à -196°C et voir le changement des propriétés mécaniques des reins en fonction de chaque méthode.  [...]

[Biochimie] Conservation de l'AMPc

Je me demande également si la congélation et donc l'absence d'eau liquide ne permet pas d'empécher l'hydrolyse de la liaison phosphodiester.  [...] la congélation n'empeche rien, il y a une activité spontanée de base, qui diminue avec la température (d'ou l'interet des stockage a -80 ou dans l'azote liquide), mais il faudrait etre au zero absolu pour etre sur que rien ne se passe.  [...]

[Biochimie] prélévements pour dosages parathormone

Soit environ 6-7 minutes entre le prélévement et la congélation. Quelqu'un a t il une idée/méthode pour aller plus vite (sans utilisation d'azote liquide...).  [...] Habituellement on considère qu'on dispose de 1h entre le prélèvement et la congélation du plasma (-20°C suffit pour un dosage jusqu'à 5j ap prélèvement).  [...]