• Santé - Concentré, Migration, Fragments

[Biochimie] Sds-page

Svp, quel est le rôle du TRIS dans l'electrophorese SDS-PAGE, et pourquoi sa concentration varie entre le STACKING GEL et le SEPARATING GEL.  [...] Le TRIS sert a créer les mailles de ton filet. Le stacking gel sert a mettre tous tes fragments au même niveau avant de commencer la séparation à proprement parler. Il est donc moins concentré que le separating gel pour permettre une migration plus facile et permettre a tous tes fragments d'arriver en même temps dans le separating gel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Temps de migration de long fragments d'ADN

Je pense pas pouvoir m'aider de la migration du bleu, il me semble avoir lu quelque part qu'il se comportait comme un fragment de 300 à 1000 pb.  [...] Pour les grands fragments il faut passer par une électrophorèse en champ pulsé pour les séparer convenablement dans un gel d'agarose. Pour le gel il me semble évident qu'il faut prendre le moins concentré, 0,5-0,6%. Le temps de migration c'est au feeling. Vous faites migrer une ou deux heures, vous regardez sous UV, si ce n'est pas bon, vous refaites migrer etc.  [...]

[Biochimie] Pb échantillon gel Tris-Tricine

Je travaille sur un peptide inférieur à 3 KDa et je voulais le visualiser en western blot. Mais je rencontre un petit problème. lors de la migration en gel tris-tricine, mes échantillons se reserrent )( dans mon gel de séparation. Pb de sels Mes échantillons sont préparés avec des cellules fraîches et broyées directement dans le tampon d'échantillon.  [...] Rq. une migration test pour le même type de gel (mêmes réactifs) a fonctionné avec d'autres échantillons (culots secs congelés d'autres cellules).  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

Ensuite, j'ai effectué une électrophorèse en gel d'agarose à 1%. la migration à duré 1heure environ, à 120volts. Le problème qui se pose est qu'à l'issue de la migration, les fragments des différents puits ont très peu migrés, puisqu'à peine 3 ou 4 bandes sont visibles en haut du gel.  [...] Si tes bandes ne descendent pas, c'est peut être aussi parce que tes fragments sont trop gros. Il faudrait essayer un gel moins concentré.  [...]

[Biochimie] differencier deux gel d'agarose de concentration différente

Concernant la fin du message, utiliser une concentration forte permet de mieux retenir les petits fragments, c'est donc indiqué lorsq'on a des fragments de taille inférieure à 150 pb. On perdra alors les plus gros, qui migreront très peu (voire pas du tout) et ne seront pas séparés.  [...] A l'inverse il faudra que le gel soit peu concentré pour séparer des gros fragments (simplement pour leur permettre de passer à travers du gel), mais dans ces conditions on perdra les petits fragments qui migreront tellement qu'ils risquent de sortir. Tout est affaire de choix par rapport à ce que tu souhaites faire migrer, pour l'ADN il existe des tableaux indicatifs donnant la gamme de pourcentage en agarose adaptée en fonction de la taille du ou des fragment(s) d'intérêt.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western Blot ATM phosphorylé

J'ai déjà testé de nombreux protocoles sans succès (méthodes d'extraction différentes, migration sur petit/grand gel, transfert liquide/semi-sec..), donc j'aimerais savoir si quelqu'un possède un protocole précis ou des indications.  [...] Il faut aussi être sur que la protéine rentre dans le gel au moment de la migration, tu devrais essayer si ce n'est pas déjà fait un gel moins concentré (genre 7% mais c'est de la vraie morve).  [...]

[Biologie Moléculaire] Western et révélation bandes

autres questions, si l'on ne voit pas les 3 dernières bandes cela est dû a un temps de migration trop long (et les bandes vont trop loin) ou c'est parceque le gel n'est pas assez concentré merci.  [...] Moi j'en fais de petits, disons 8 cm, donc avec le gel de concentration ca doit séparer sur 5 cm. Les trois dernières bandes ne se séparent jamais. Peut être n'en ont elles simplement pas le temps.  [...]

croquer et avaler un comprimé effervescent

Ne pas avaler. le gaz carbonique va se dégager dans ton estomac, ce qui est très inconfortable. Pour ce qui est de les croquer tu n'échapperas pas au goût (en plus très concentré.) et ça va mousser dans ta bouche. tu vas baver et avaler des fragments pas encore solubilisés qui vont dégazer dans ton estomac.  [...] Ce qui m'inquiète surtout, dans le plan de faire n'importe quoi, c'est qu'un médecin quelque part a prescrit un médicament avec des effets secondaires potentiellement graves, ou dans une indication sérieuse. Je parie que ce médicament est le solupred, et ça ne me fait pas rire qu'une personne fasse n'imp avec ça... (j'imagine déjà l'ulcère gastrique...).   [...]

[Biochimie] migration sds page

je viens de recommencer un gel en diminuant la concentration en glycérol, en prenant de nouveaux produits (acrylamide, tampons avec le bon pH, b-mercaptoéthanol...). La migration est un peu meilleur mais mes protéines ne dépassent toujours pas la moitié de mon gel de séparation alors que mes marqueurs et mon front de migration sont OK.  [...] Je viens de penser a autre chose. Quand tu fais le tampon de migration. Est ce que tu vérifies sont pH Normalement avec la recette il doit être au bon pH sans que tu ai à l'ajuster, sinon il y a un problème. Mais si tu l'ajustes quand même alors fait le avec du tris concentré (Tris-Hcl ou Tris-Base selon le cas) c'est mieux que de le faire avec du Hcl.  [...]

pourquoi l'osmose est un transport passif?

Dans l'osmose, c'est le flux net de solvant depuis le milieu le moins concentré vers le milieu le plus concentré qui a lieu. le solvant va certe à l'encontre du gradient de concentration du soluté, mais ça n'est pas pour autant qu'il est actif. Il faut voir comment ton système évolue.  [...] Quand il s'agit d'une diffusion, nous avons les solutés qui partent du milieu le plus concentré vers le milieu le moins concentré. C'est leur gradient de concentration. A la fin, on va obtenir deux milieux de meme concentrations en solutés, cela nous permet de dire que c'est un phénomène passif.  [...]