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Calcul d'un concentration de départ d'ADN à partir de l'absorbance de la solution diluée.

Calcul d'un concentration de départ d'ADN à partir de l'absorbance de la solution diluée.  [...] Afin de déterminer la concentration d'une solution d'ADN, vous préparez un tube contenant. 3µl de cette solution d'ADN et 97µl d'H2O.  [...]

[Biochimie] Absorbance de la molécule d'ADN

Expérimentalement, on montre qu'une solution d'ADN simple brin a une absorbance plus élevé qu'une solution de même concentration d'ADN double brin, lequel a une absorbance plus faible qu'une solution de dNTP.  [...] Ta réponse est meilleure que l'histoire du solvant. En fait, c'est juste une question de géométrie. Dans de l'ADN double-brin, les bases sont empilées et ce sont bien elles qui absorbent les UV. Si un photon recontre une base et est absorbé, cet empilement fait que la base qui est juste derrière celle qui a absorbé le photon est dans l'ombre et ne pourra donc pas être détectée, ce qui conduit à sous-estimer la concentration réelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dosage de l'ADN

La concentration d'une solution d'ADN est déterminé par spectroscopie UV. La valeur de DO mesurée est de 0.456. Parmi les propositions suivantes, quelle est la seule proposition fausse.  [...] Beh si le simple-brin absorbe davantage et qu'avec les calculs plus haut tu trouves que tu as une concentration d'ADN correspondant a de l'ADN natif, la DO devrait augmenter s'il y a denaturation.  [...]

[Biochimie] Calcul d'une concentration en ADN

Bonjour, je voudrais savoir s'il existe un moyen de calculer la concentration d'ADN dans une solution avec comme seule information la masse d'unités osidiques que contient celle-ci (les bases, sucres et phosphates ont été séparés et sont toujours présent dans la solution).  [...] Comme on me demande la concentration je présume que je dois d'abord calculer la masse de plasmide ainsi que sa masse molaire, et en déduire la quantité de matière de plasmide, et diviser par le volume. Suis-je ok cette fois ci.  [...]

[Biologie Moléculaire] Densité Optique a quoi sa sert en biologie ?

Les acides nucéiques absorbent la lumière à 260nm de longueur d'onde (UV). Mesurer l'absorbance à 260nm d'une solution d'ADN ou d'ARN te permet donc d'en déduire la concentration en l'un ou l'autre (loi de Beer-Lambert).  [...] Les mesures de DO sont aussi utilisées en biologie pour mesurer des concentrations de protéines, suivre des réactions enzymatiques ou encore des croissances bactériennes ou de levures en milieu liquide par exemple, le tout étant de savoir quelle longueur d'onde regarder pour tel ou tel contexte.  [...]

[Biologie Moléculaire] extractiobn d'ADN plasmidique

10 ml de culture bactérienne sont centrifugés afin de concentrer les bactéries dans un petit volume V (ici 100µl) d'une solution Tris-EDTA-glucose. Elles sont ensuite lysées 5 minutes dans une solution Sodium Dodécyl Sulfate (SDS) 0.65% et de la soude, NaOH 0.  [...] La soude est ensuite neutralisée par de l'acétate de potassium (KAc) 1M en concentration finale (ajout de 1.5V d'une solution de KAc 3M.). Ceci induit la renaturation des macromolécules. L'ADN génomique et la plupart des protéines sont des molécules trop grosses pour retrouver leur conformation native et toutes ces molécules établissent des liaisons les unes avec les autres, formant un précipité blanchâtre Le plasmide étant petit il retrouve sa conformation native, est exclu du précipité et reste en solution.  [...]

[Biologie Moléculaire] travaux pratiques, isolation plasmide

L'éthanol 70% permet de faire précipiter l'ADN. On utilise d'abord de l'éthanol 96% (ou plus concentré) car on le rajoute en général à un volume de solution aqueuse qui contient l'ADN (souvent après une étape de phénol-chloroforme) et qui va diluer un peu l'éthanol.  [...] On rajoute un volume suffisant d'éthanol concentré pour obtenir une concentration finale à environ 70%. On centrifuge alors pour faire tomber l'ADN au fond du tube, on enlève le surnageant et on mets ensuite de l'éthanol à 70% directement, car il n'y a plus de solution aqueuse pour diluer l'éthanol.  [...]

[Biochimie] estimation de le concentration d'ADN aprés spectrophotometrie

Bonsoir, au cours de mon stage à la faculté, j'ai fais des extractions d'ADN à partir de sang humain, et aujourd'hui j'ai dosé mes echantillon par spectrophotometrie (ADN dilué au 1/100 dans du TE). Je voudrais calculer la concentration de mon ADN dans chaque echantillon, comment puis je faire à part la regle de. 1 DO correspond à 50 µg/ml.  [...] Je voudrais appliquer la formule de yumyum (plus haut) sur 2 µl d'ADN dilué dans 998µl d'eau distillé (le tout donne 1000µl), comment doit-je appliquer la règle précédemment cité si je veux trouver la concentration de ma solution en ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Température de fusion de l'ADN (Tm)

Voilà en fait je dois savoir expliquer selon quoi varie la Tm d'une molécule d'ADN... Je sais que ça dépend de la molécule elle même (% nucléotides), et du milieu dans lequel elle se trouve (concentration en ions, etc.).  [...] Peut-être obtenus de manière expérimentale...en tout cas cette formule ne tient pas compte de la concentration en ions de la solution aqueuse d'ADN.  [...]

problème de concentration

il s'agit de calculer une concentration d'une solution d'ADN natif, en ayant comme seule donnée la DO.  [...] enfin, nous c'est comme ca que l'on fait, on trace la courbe. sur cette courbe, on place la DO du tube ou l'on cherche la concentration, puis on litdirectement la concentration.  [...]