• Santé - Concentration, Culture, Levures, Promoteur

Promoteur Gal

je voudrais savoir à quelle concentration faut il mettre du galactose dans un milieu de culture de levures pour induire une surexpression d'un gène sous promoteur GAL.  [...] Je travaille sur S. cerevisiae au labo et j'utilise très fréquemment le galactose comme source de carbone (beaucoup de mes constructions contiennent le promoteur GAL). J'utilise toujours des milieux avec 2% de galactose et je n'ai jamais eu de problème.  [...]

[Microbiologie] Formule pour dénombrement

En effet je n'ai pas été très clair, je recommence donc. J'ai dénombré une culture de levure se trouvant dans un milieu liquide. J'ai effectué cette démarche dans le but de connaître la concentration cellulaire de la culture étant en phase de croissance, ou arrivant à son terme.  [...] J'ai été contrainte d'effectuer diverses dilutions sur cette culture, car si non le nombre de colonies excédait 150 (. 150 pour les levures), autrement dit la concentration cellulaire était trop haute pour être prise en compte. J'ai donc inoculé chaque dilution à double jusqu'à -8 et seuls les dilutions -7 et -8 avaient un nombre de colonie permettant d'être évalué (.  [...]

[Microbiologie] Yeast Two Hybrid System

BOn j'y connais rien aux levures et pas trop aux systemes hybrides, mais j'imagine que tu peux aussi bien faire le 2hybrid system dans milieu liquide non tu design le truc pour que l'intéraction des 2 protéine lève la répression d'une promoteur qui controle un gene de resistance ou truc du genre.  [...] Et sinon, 28 ou 37°C aucune importance. Se sera plus long à 28°C mais une culture 24h devrait suffire même pour des levures je pense.  [...]

Qui Pourrait M'aider ?

Quels sont les nutriments dont dispose chaque cellule.   [...] Quels sont les conséquences d'injection dans la culture de levures, des substances. huile, albumine, amidon et glucose.  [...]

[Biochimie] Culture de levures

Je souhaiterais me faire une petite culture de levures de boulanger pour pouvoir ensuite faire du pain moi-meme sans acheter de levure.  [...] Mon conseil ça serait d'utiliser un milieu prévu à cet effet, du malt extract. Cet extrait de malt s'achète sur le net chez les fabricants de milieux de culture et tu n'as qu'à rajouter du sucre à la préparation et le milieu est pratique pour les levures et champignons.  [...]

[Divers] Comment reproduire soi-même ses levures de boulanger?

La confusion est légitime, puisque le levain est bel et bien une culture de levures (mais en milieu semi-solide cette fois-ci). La description de solifugus le prouve d'une certaine façon. il dit que quand le levain a pris il sent le aigre, la vinasse. Cela montre que la fermentation a démarré et celle-ci n'a pas lieu facilement sans organismes vivants (des levures naturellement présentes dans la farine, l'eau ou l'air).  [...] A haute dose je pense qu'il serait donc aussi dangereux pour tes plantes que pour les bactéries susceptibles d'infecter une plaie. Maintenant, tes plantes ne sont pas plongées dans tes bouteilles de levures et pour atteindre de telles concentrations dans ton enceinte d'expérimentation il faudrait que l'enceinte soit vraiment hermétique.  [...]

levures chimio-compétentes

Personnellement mon protocole de transfo de levure par l'acetate de lithium prend 1/2 journée (temps d'incubation compris donc tu peux faire plein de truc en même temps) donc j'en vois pas trop l'utilité.  [...] C'est pour réaliser des stocks de levures compétentes et ne pas être obligé de remettre des levures en culture avant chaque transfo.  [...]

Le ribosome enfin en 3D !

Au cours de la dernière décennie, des premières images obtenues par cryomicroscopie électronique avait permis d'obtenir une idée de la structure, mais avec une faible précision. La revue Science a publié le 26 novembre la première structure aux rayons X du ribosome d'un eucaryote, en l'occurrence la levure Saccharomyces cerevisiae, réalisée par une équipe de recherche de l' Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (IGBMC).  [...] Pour résoudre ce problème, les scientifiques ont baissé la teneur en sucre du milieu de culture des levures. Sans cette source d' énergie, les levures sont au repos et synthétisent beaucoup moins de protéines, laissant la majorité des ribosomes vacants. Les ribosomes purifiés ont pu ensuite être préparés, de manière à obtenir des cristaux, c'est-à-dire une multitude de ribosomes identiques et bien alignés.  [...]

[Biotechnologie] Construction plasmidique

Suite à cela, ne pas oublier de désaler le produit résultant de gibson assembly si tu fais la transformation bactérienne ensuite par électroporation. Donc maintenant transformation de tes produits dans des bactérie compétente. Puis culture. Puis miniprep. Puis digestion pour voir si ta les bons plasmides dedans, puis t'envoi donc les bon clones au séquençage.  [...] Mon cour traite en fait des différents plasmides, et des éléments qui le compose ( promoteur fort ou non, adn polymérase, gène de resistance etc...) ainsi que les transformation génétique chez les levures et bactéries.  [...]

[Biologie Moléculaire] Beta galactosidase chez Saccharomyces cerevisiae

J'ai aussi essayé en mettant en amont du gène lacZ le peptide signal de l'invertase. Mais en mettant les levures en culture en présence de X-gal je n'ai aucune coloration.  [...] Ce type de cellule n'existe pas, mais je pensais mettre ma construction sous dépendance d'un promoteur fort, juste pour voir si c'est exprimé ou pas...Par contre si ça ne l'est pas, je ne saurai plus trop quoi faire, car j'ai des publi où ce système fonctionne mais sous dépendance d'un autre promoteur faible le CYC 1 (promoteur du cytochrome chez la levure).  [...]