• Santé - Concentration, Antigène, Anticorps

[Immunologie] Elisa

le test en sandwich. d'abord tu coat ta plaque avec un anticorp par ex, ensuite tu rajoute ton antigène, puis enfin tu rajoute un autre anticorps qui va se fixer sur un autre épitope de ton antigène. le signal corespon a la concentration de ton antigène.  [...] le test par comptition. tu as coaté ta plaque avec un anticorps, mai la tu rajoute 2 antigène qui vont etre en compétition avec ton anticorps. sur l'un de tes Ag il y en aura un de concentration connu et marqué et l'autre sera celui recherché X. plus il y a de signal moin il y a d'AgX recherché.  [...]

Diagnostic bactériologique : comment dépister une infection ?

La migration ( chromatographie ) de cet assemblage anticorps/virus est visualisée dans les minutes qui suivent (principe identique à celui des tests de grossesse ) et renseigne alors un résultat positif.  [...] En moins de deux heures, les méthodes immunoenzymatiques, comme la méthode Elisa, permettent de détecter, soit la présence d'un antigène microbien, soit la présence d'anticorps spécifiques produits par l'organisme. La formation du complexe antigène/anticorps est révélée par l'action d'une enzyme laquelle présente une coloration d'autant plus intense que l'élément recherché (antigène ou anticorps) est en grande concentration.  [...]

[Biochimie] Dilutions d'ELISA !

Une interférence observée en cas d'excès d'Ag entraînant une saturation des Ac. Par conséquent, un même signal pourra correspondre à deux concentrations en Ag différentes. Pour s'affranchir de cette interférence il faut diluer l'échantillon.  [...] Au delà d'un certain seuil, la concentration de l'anticorps est trop élevée par rapport à la concentration d'Antigène coaté, donc tu ne peux plus détecter de différence de concentration, tu es arrivé à saturation.  [...]

Western blot- serum humain

En effet j'ai un antigène de P. falciparum contenu sur une membrane de nitrocellulose, j'aimerai savoir si les anticorps contenus dans du plasma humain reconnaissent cet antigène. Pour cela je dispose de plasma humain, d'anticorps anti IgG humain couplé à de la Phosphatase Alcaline (PA) fait dans la souris.  [...] Ta seule solution est de faire une gamme de concentration et de regarder laquelle fonctionne sur ton antigène. Vu que tu n'es pas sur que les anticorps du sérum réconnaissent l'antigène, l'idéal serait d'avoir un controle positif.  [...]

immunofluorescence

les 3 techniques sont bien utilisées toutes les 3 en elisa. celle en sandwich consiste a coaté une plaque avec un anticorps. ensuite tu rajoute ton antigène qui va se fixer a ton anticorps. tu rajoute ensuite un autre anticorps marqué avec un marqueur fluorescent qui va se fixer sur un autre épitope de ton antigène. tu n'as plus qu'à lire les résultats.  [...] la méthode de compétition. un anticorps (ou aussi un antigène) est coaté au fond du puit. mais tu rajoute ensuite 2 antigène dont un est marqué et de concentration connue et l'autre est celui recherché.  [...]

[Immunologie] Réaction antigène anticorps responsable de l'agglutination

je travaille depuis 2 mois sur la determination du groupe sanguin et pour cela je dois expliquer la reaction antigène anticorps, responsable de l'agglutination.  [...] Comment des liaisons faibles peuvent elles permettre une fixation si efficace car il existe de nombreuses liaisons faibles lors de la fixation antigène anticorps... on peut imager la situation en la comparant au Velcro. pleins de petits pics faibles se lient aux boucles, pour avoir au final un ensemble très cohésif.  [...]

[Biochimie] Principe et manipulations générales pour le test ELISA indirect

Comment procède-t-on pour réaliser une courbe standard Utilise-t-on une concentration connue de profiline avec différentes dilutions d'anticorps.  [...] Vous ne connaissez pas votre concentration d'antigène (Ag) puisque vous en faites justement le dosage donc il vous faut trouver la concentration d'anticorps (Ac) pour laquelle vous ne serez pas en excès d'Ag ce qui pourrait empêcher la lecture du signal par effet dit crochet ou de zone correspondant à un même signal pour deux concentrations différentes.  [...]

[Immunologie] Inhibition Hémaglutination

Je suis en train de préparer un Tp sur l'inhibition de l'hémmaglutination afin de déterminer la solution qui contient l'antigène B gal.  [...] Je me demandais quels étaient les mécanismes moléculaires à l'origine de l'hémma positive et celle de l'héma négative en fonction de la concentration en antigène soluble sachant que mes concentrations en anticorps et en hématies restent constantes.  [...]

[Immunologie] Test elisa

je ne voit pas, si l'on sort du contexte du test Elisa, pourquoi il faut diluer une solution d'anticorps. Je comprend que si la solution d'AC et trop peu concentrer tous les AG ne seront pas détectés mais en cas d'excès En effet si l'anticorps est en forte concentration par rapport a l'antigène le surplus est logiquement enlever par les étape de saturation et/ou de lavage au détergent.  [...] Est-ce suffisant cela peut aussi poser problème si je fais un autre test elisa dans le but et de doser un antigène puisque si ma concentration en antigène et très forte la quantité d'ac sera inférieur a la quantité d'AG. quel est la solution dans ce cas on procède a des dilutions de l'échantillon d'antigène.  [...]

Marquage anticorps secondaire

notre objectif est d'avoir le complexe anticorps-antigéne mais dans la derniere phrase il s'est concentré sur le couple marqueur et anticorps.  [...] Le principe à retenir est qu'on marque un anticorps avec une molécule détectable. un fluorophore, une enzyme possèdant une activité visible et/ou mesurable. Soit cet anticorps reconnait directement l'antigène, c'est la méthode directe, soit l'anticorps reconnait un autre anticorps qui quant à lui reconnait l'antigène, c'est la méthode indirecte.  [...]