• Santé - Concentration, ADN, Fragment

[Biologie Moléculaire] Passer de g/L en mol/L pour un ADN

J'ai un fragment d'ADN à une concentration connue en g/l et je souhaiterai convertir cette concentration en mol/L.  [...] Dernière modification par Ricc66. 22/10/2008 à 20h40. Motif. oubli de parenthèse.).   [...]

[Biologie Moléculaire] Calcul de rendement

Je crois, la concentration initiale de l'ADN plasmique initiale EST juste la concentration initiale du fragment digéré dont tu as besoin, parce que pour un plasmide, il n'existe qu'UN fragment de 784 bp qui est celui que tu cherches (la moitié 5' du gène, oui ).  [...] Les autres ne sont pas ceux dont tu as besoin. Donc, il n'est pas nécessaire de multiplier la concentration de l'ADN plasmique par le nombre des fragments théoriques (5484/784).  [...]

[Biologie Cellulaire] enzyme de restriction

Il est très possible de cloner un fragment d'ADN génomique amplifié par PCR dans un plasmide extrait mais non amplifié, mais il est préférable de déterminer la concentration approximative disponible de ces 2 olécules avant de les utiliser.  [...] Personnellement je n'ai jamais eut de probleme, mais je passe par une etape de purification sur colone ce qui me permet probablement de m'en debarasser (de la meme maniere que les fragments d'ADN clonés apres migration sur un gel d'agarose+BET. Ceci dit, il en faut vraiment pas bcp, car meme a tres faible concentration ca inhibe tres fort la digestion.  [...]

[Biologie Moléculaire] De la PCR à la méthode Sanger

[Biologie Moléculaire] De la PCR à la méthode Sanger.   [...] Après l'amplification d'un brin matrice par PCR, il y aura des produits PCR, pour un séquençage par la méthode de sanger, ces produits pcr doit être purifiés mais lors de la réaction de sanger, comment on évalue la concentration d'ADN, c'est à dire après la PCR on obtient plusieurs fragments d'ADN alors que par la méthode sanger c'est un seul fragment qui sera séquencer à ma connaissance.  [...]

[Biologie Moléculaire] plasmide recombinant et ADN ligase

- tu coupes avec EcoRV qui fait une coupe franche. Tu obtiens donc deux fragments linéarisés, et tu gardes le plus grand, qui contient tes sites BglII.  [...] Enfin, tu veux que ton fragment se recircularise, c'est à dire que l'un de ses bouts se lie avec son autre bout... Autrement dit, tu veux favoriser une réaction intramoléculaire. Dans quelle condition cela est favorisé Il faut que tu choisisses une concentration optimale en ADN. élevée ou faible.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme avec ma PCR

J'ai un ADN d'environ 400ng/ul. Et je fais des gammes de dilution avant PCR.J'ai une concentration finale d'environ 40ng/ul apres dilution.  [...] Ba si y en a pas assez tu peux avoir une amplification mais tu le vera pas sur le gel. En plus si c'est de l'ADN génomique, ta concentration est élevé mais ton nombre de copie beaucoup moindre. Et inversement, petit fragment avec concentration identique, sa fait beaucoup de copies... Tu est à combien en MgCl2.  [...]

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité

Je recherche un protocole ou une méthode permettant de visualiser la taille de fragment d'adn pour un extrait d'ADN de très faible concentration (eg. 1pg-1ng).  [...] Oui effectivement le Tm est un indicateur de la taille. Mais mon soucis est que je vais me retrouver avec une population comprenant des tailles de fragments différentes. Et ce que je recherche c'est d'identifier la taille de chacun des fragments, mais également la proportion de chaque groupe de fragment.  [...]

[Biologie Cellulaire] Reverse transcription et amorçage avec hexamères aléatoires ?

La concentration en amorces aléatoires conditionne la taille des fragments d'ADNc synthétisés. En effet, la longueur moyenne des brins synthétisés est inversement proportionnelle à la concentration en amorces. La concentration d'amorces aléatoires doit donc être déterminée en fonction de la taille du fragment à amplifier.  [...] On peut utiliser des quantités d'hexamères allant de 20 ng (ADNc longs) à plus de 5 µg (ADNc courts) pour une réaction de 20 µL. Il faut noter que de fortes concentrations d'hexamères n'exercent pas d'action inhibitrice sur la RT.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Par exemple les groupes sanguins ABO sont différenciés par des allèles différents. Ces gènes (allèles) donnerons des protéines différentes qui, toutes, participerons à la reconnaissance par le système immunitaire (elles auront donc la même fonction).   [...] Non car une séquence nucléotidique peut être un fragment d'ADN ou d'ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

Et on est bien d'accord que ce fragment agit à la fois sur le segment après réplication par son action exonucléase 5'3' de réparation et sur lesegment d'après par son activité à la fois polymérase 5'3' (synthétisation) et exonucléase 3'5' (réparation).  [...] L'ADN polymérase a en plus une activité exonucléase 5'-3' (que n'a pas le fragment de klenow). elle lui sert à retirer l'amorce d'ARN quand elle en rencontre une, pour la remplacer par de l'ADN. Mais ce n'est pas une fonction de réparation.  [...]